2型糖尿病患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因及其剪接异构体的表达水平和临床意义

doi:10.13481/j.1671-587X.20230523

摘要/Abstract

摘要：

目的探讨2型糖尿病（T2DM）患者外周血淋巴细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶5调节亚基相关蛋白1类似物1（CDKAL1）基因及其剪接异构体的表达水平，并探讨其临床意义。方法收集65例糖尿病患者，其中T2DM患者20例（T2DM组）、糖尿病肾病（DN）患者23例（DN组）和糖尿病视网膜病变（DR）患者22例（DR组），并选择同期健康体检者28名（健康对照组）。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组研究对象外周血淋巴细胞中CDKAL1基因及其2种剪接异构体CDKAL1-X1和CDKAL1-X2表达水平，分析其表达与T2DM及其糖尿病微血管并发症的关系。结果与健康对照组比较，T2DM组患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因表达水平升高（Z=4.705，P<0.01），CDKAL1-X1表达水平升高（Z=2.698，P=0.007）。与健康对照组比较，DR组和DN组患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因和CDKAL1-X1表达水平升高（P<0.05）； DR组患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因表达水平高于DN组（P<0.05）。结论 T2DM患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因和CDKAL1-X1表达水平升高可能参与糖尿病及其并发症的发生发展。

关键词: 糖尿病,2型, 细胞周期蛋白依赖性激酶5调节亚基相关蛋白1类似物1, 基因表达, 糖尿病肾病, 糖尿病视网膜病变

Abstract:

Objective To discuss the expression levels of the cyclin-dependent kinase 5 regulatory subunit associated protein 1-like 1（CDKAL1） gene and its splice isoforms in peripheral blood lymphocytes of the patients with type 2 diabetes mellitus （T2DM）， and to clarify their clinical significances. Methods A total of 65 diabetes mellitus patients were enrolled， including 20 T2DM patients （T2DM group）， 23 diabetic nephropathy（DN） patients （DN group）， 22 diabetic retinopathy（DR）patients （DR group）， and 28 healthy examiners at the same term（healthy control group）. Real-time fluorescence quantitative PCR （RT-qPCR） method was used to detect the expression levels of CDKAL1 gene and its two splice isoforms， CDKAL1-X1 and CDKAL1-X2， in peripheral blood lymphocytes of the subjects in various groups. The relationships between the clinical significances of their expressions and T2DM and its microvascular complications were analyzed. Results Compared with healthy control group， the expression levels of CDKAL1 gene （Z=4.705， P<0.01） and CDKAL1-X1 （Z=2.698， P=0.007） in peripheral blood lymphocytes of the patients in T2DM group were increased. Compared with healthy control group， the expression levels of CDKAL1 gene and CDKAL1-X1 in peripheral blood lymphocytes of the patients in DR and DN groups were increased（P<0.05）； the expression level of CDKAL1 gene in peripheral blood lymphocytes of the patients in DR group was higher than that in DN group （P<0.05）. Conclusion The high expressions of CDKAL1 gene and CDKAL1-X1 in peripheral blood lymphocytes of the T2DM patients may play an important role in the occurence and development of diabetic mellitus and its complications.

Key words: Type 2 diabetes mellitus, Cyclin-dependent kinase 5 regulatory subunit associated protein 1-like 1, Gene expression, Diabetic nephropathy, Diabetic retinopathy

中图分类号:

R587.1

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图/表 2

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Gene	Primer sequence(5'－3')
CDKAL1		F:ACGAACATGGGGTTGTTCTC
CDKAL1		R:GGAGCCATAAATCTGCATCG
CDKAL1-X1		F:TGGAACGTGATCTGGATGTC
CDKAL1-X1		R:GTTGTATTCAGCACCGCAAC
CDKAL1-X2		F:CAGGAACTCCTGCTGCAAA
CDKAL1-X2		R:TTCAGTCCTGTCCCAGCTTC
GAPDH		F:GCACCGTCAAGGCTGAGAAC
GAPDH		R:TGGTGAAGACGCCAGTGGA

Group	CDKAL1				CDKAL1-X1
Group	n	Expression level	Z	P	n	Expression level	Z	P
Healthy control	28	0.83 (0.73，0.95)			28	0.94(0.67，1.30)	－	－
T2DM	20	1.83(1.05，2.21) ^*	4.705	<0.01	20	1.34(1.02，1.94) ^*	2.698	0.007
DN	23	1.47(0.81，1.98) ^*	－3.199	0.001	23	1.45(0.92，1.75) ^*	－2.508	0.012
DR	22	2.01(1.33，2.34) ^△*	－4.950	<0.01	22	1.55(1.01，2.41) ^*	－2.814	0.005
Group		CDKAL1-X2
Group		n	Expression level		Z		P
Healthy control		28	0.55(0.36，0.89)		－		－
T2DM		20	0.71(0.46，1.18)		1.317		0.188
DN		23	0.61(0.46，0.97)		－1.155		0.248
DR		22	0.55(0.36，0.82)		0.215		0.830

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