吉林大学学报(医学版) 2016, 42(02) 260-265 DOI: 10.13481/j.1671-587x.20160214    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R
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基础研究
慢病毒介导靶向P27RF-Rho基因沉默对肝癌细胞侵袭性的影响
马强, 谢淑丽, 王广义, 邢光远, 杨耀群, 吕国悦
吉林大学第一医院肝胆胰外科, 吉林长春 130021
摘要：

目的: 探讨慢病毒靶向介导技术沉默P27RF-Rho基因,阐述其对肝癌细胞侵袭性的影响。方法: 构建P27RF-Rho RNAi慢病毒。慢病毒感染肝癌细胞BEL7402。实验分为P27RF-Rho-siRNA实验组、Scramble-siRNA阴性对照组和BEL7402空白对照组。Western bloting法检测P27RF-Rho基因沉默效果及肝癌相关蛋白RhoA、RhoC、VEGF、P53和PTEN表达水平;明胶酶谱分析肿瘤侵袭相关基质金属蛋白酶(MMPs)活性;细胞划痕和体外Transwell小室侵袭实验比对细胞迁移和侵袭能力的改变。结果: Western blotting法检测,P27RF-Rho-siRNA实验组BEL7402中P27RF-Rho、RhoA、RhoC和VEGF蛋白表达水平明显低于2个对照组(P<0.05),P53和PTEN表达水平高于2个对照组(P<0.05)。明胶酶谱,P27RF-Rho-siRNA实验组MMPs活性明显降低(P<0.01)。划痕实验,P27RF-Rho-siRNA实验组细胞迁移距离明显低于2个对照组(P<0.01)。实验组穿过Transwell小室的平均细胞数明显少于2个对照组(P<0.01)。结论: 沉默P27RF-Rho基因可以降低肝癌细胞BEL7402的侵袭和迁移能力。
关键词： P27RF-Rho 慢病毒 肝癌细胞 侵袭和迁移
收稿日期  2015-05-14   修回日期    网络版发布日期  2016-03-31  
DOI: 10.13481/j.1671-587x.20160214
基金项目:

吉林省科技厅科研基金资助课题(20130413021GH)
通讯作者: 吕国悦,教授,硕士研究生导师(Tel:0431-88783331,E-mail:lgy08@sina.com)
作者简介: 马强(1990-),男,吉林省长春市人,医师,在读医学硕士,主要从事肝胆胰腺疾病外科治疗研究。
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