吉林大学学报(医学版) 2020, 46(03) 431-438 DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200301    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R

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基础研究
肾元颗粒对db/db糖尿病肾病小鼠血管钙化的改善作用及其机制
王岚1,2, 朱国双1, 孙龙1, 王小琴2
1. 湖北中医药大学第一临床学院, 湖北 武汉 430061;
2. 湖北省中医院肾内科湖北省中医药研究院肾病研究所, 湖北 武汉 430061
摘要:目的:通过高磷诱导db/db糖尿病肾病(DN)小鼠血管钙化,探讨肾元颗粒对db/db DN小鼠血管钙化的改善作用及其可能机制。方法:将20只SPF级db/db小鼠随机分为模型组和肾元颗粒组(n=10),同系背景野生型(WT)小鼠作为空白组(n=10)。给药12周后,取各组小鼠血清、肾脏和胸主动脉组织。ELISA法检测各组小鼠血清FGF23水平,HE和von Kossa法检测各组小鼠胸主动脉病理形态表现以及钙盐沉积情况,实时荧光定量PCR (Real-time PCR)法检测各组小鼠肾脏组织中KlothomRNA和胸主动脉组织中Pit-1、Runx2及SM22α mRNA表达水平,Western blotting法检测各组小鼠肾脏组织中Klotho蛋白和胸主动脉组织中Pit-1、Runx2及SM22α蛋白表达水平,免疫组织化学法检测各组小鼠胸主动脉组织中Pit-1蛋白表达水平,免疫荧光法检测各组小鼠胸主动脉组织中SM22α和Runx2蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠血清FGF23水平明显升高(P<0.05),肾脏组织中Klotho mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),胸主动脉组织中Pit-1和Runx2 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.01),SM22α mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),胸主动脉组织中Pit-1和Runx2蛋白表达水平明显升高(P<0.01),SM22α蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与模型组比较,肾元颗粒组小鼠血清FGF23水平降低(P<0.05),肾脏组织中Klotho mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01),胸主动脉组织中Pit-1和Runx2 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.01),胸主动脉组织中SM22α mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:肾元颗粒可通过上调小鼠肾脏组织中Klotho蛋白表达水平,减少Pit-1表达水平,抑制FGF23/Pit-1信号通路,调节血管平滑肌细胞(VSMC)的表型转化,达到血管保护作用。
关键词: Klotho 糖尿病肾病 血管平滑肌细胞 肾元颗粒 血管钙化
收稿日期  2019-11-20   修回日期    网络版发布日期  2020-06-11  
DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200301
基金项目: 国家自然科学基金青年基金资助课题(81703991);国家自然科学基金面上项目资助课题(81874439)
通讯作者: 王小琴,教授,博士研究生导师(Tel:027-87748223,E-mail:wangxiao773@hotmail.com)
作者简介: 王岚(1983-),女,湖北省武汉市人,副教授,医学博士,主要从事中西医结合防治慢性肾脏病方面的研究。

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