目的：观察N-乙酰半胱氨酸（NAC）对糖尿病（DM）大鼠脾细胞凋亡和免疫因子的影响，为NAC在糖尿病并发症预防及糖尿病的治疗方面提供理论依据。方法：实验分为对照组、DM组和NAC+DM组，链脲佐菌素腹腔注射诱导DM大鼠模型，灌胃给予NAC，于给药结束4周末断头处死，分别采用Annexin V/碘化丙啶（PI）双荧光标记、PI单标记和PE标记TCRαβ抗体标记，流式细胞术检测脾细胞凋亡、细胞周期及TCRαβ百分数变化；ELISA法检测血清和脾细胞培养上清IL-2含量的变化。结果：与对照组比较，DM组大鼠脾细胞凋亡率、TCRαβ百分数及血清IL-2含量、G₀/G₁期和G₂/M期脾细胞数明显升高（P<0.05或P<0.001），S期脾细胞数和培养上清IL-2含量明显降低（P<0.05或P<0.001）；DM+NAC组脾细胞凋亡率有所下降，与对照组比较差异无显著性，且细胞周期各期细胞数无明显变化。与DM组比较，DM+NAC组脾细胞凋亡率、TCRαβ百分数、血清IL-2含量、G₀/G₁期和G₂/M期脾细胞数明显降低（P<0.05或P<0.001），S期脾细胞数和培养上清IL-2含量明显升高（P<0.05）。结论：NAC能降低DM所致的脾细胞凋亡增加，可纠正DM引发的脾细胞周期阻滞，调节DM所致的免疫因子失衡。

目的：探讨建立小鼠原位移植性肝癌模型的可行性并评价其生物学特性。方法：沿腹中线开腹后将5×10⁶个H22细胞接种到小鼠（17只）肝脏实质内，分别于接种后第13天（n=8）和小鼠死亡时（n=9）取主要脏器进行形态学观察和细胞增殖核抗原（PCNA）及免疫Ⅷ因子相关抗原（FⅧRag）免疫组织化学染色。 结果：小鼠平均生存期为18.8　d。接种后第13天，肝内肿瘤成瘤率为100%（8/8），肺转移率为37.5%（3/8），50%（4/8）的小鼠产生腹水，腹水量为（6.25±3.67）mL，肿瘤体积为（0.35±0.14） cm³。自然死亡时，肺转移率为100%（9/9），100%（9/9）小鼠产生腹水，腹水量为（10.88±1.92）mL，明显多于接种后第13天时的腹水量（P<0.01）；肿瘤体积为(0.61±0.31) cm³，明显大于接种后第13天时的肿瘤体积（P<0.05）。小鼠死亡时大多数瘤组织呈单结节状，异型性明显，肿瘤增殖指数和微血管密度分别为（71.39±20.74）% 和 （39.25±13.71）/高倍视野。结论：原位移植性肝癌模型制备成功率高，肿瘤肺转移率高，肿瘤组织具有丰富的微血管和旺盛的增殖能力。

目的：利用基因转染和RNA干扰（RNAi）技术，研究HIWI基因沉默对T24细胞生物学行为的影响，探讨HIWI基因作为抑制膀胱癌细胞增殖分子靶点的可能性。方法：实验分为转染pGenesil-2-HIWI1组、转染pGenesil-2-HIWI2263组、转染阴性对照质粒pGenesil-2-control组，只加转染试剂聚乙烯亚胺（PEI）的对照组和只加入PBS的阴性对照组，每组设4个平行样。利用PEI介导，将靶向HIWI基因的shRNA真核表达载体瞬时转染T24细胞，通过MTT法及流式细胞仪检测各组细胞增殖和细胞周期的改变。结果：转染后24 h，转染组的细胞增殖抑制率分别为32.60%和26.09%，较对照组细胞增殖抑制率（3.54%）明显降低（P<0.01）。转染后48 h，转染组S期细胞百分数［（29.39± 3.27）%和（30.87±10.88）%］较对照组［（39.36±2.09）%］明显降低，G₂/M期细胞百分数［（9.39±0.80）%和（11.46±1.53）%］较对照组［（5.57±0.40）%］明显增加（P<0.05）。结论：HIWI基因沉默对T24细胞具有增殖抑制作用，HIWI基因可以作为抑制膀胱癌细胞增殖的分子靶点；HIWI基因沉默对膀胱癌具有潜在的治疗价值。

目的：培养人骨髓间充质干细胞（hMSCs），体外向心肌细胞(CMs)定向诱导分化，进行超微结构观察，为hMSCs体外向CMs诱导分化提供理论依据。方法：体外分离培养扩增hMSCs并进行流式细胞仪分析鉴定；选用生长良好，纯度高的P5代hMSCs，用5-氮杂胞苷（5-Aza，10 μmol•L^-1）体外定向向CMs诱导分化，对其进行Desmin检测，在倒置显微镜及透射电镜下观察细胞形态学和超微结构。结果：流式细胞仪检测显示体外分离纯化培养扩增出细胞不表达CD34，高表达CD44，表明扩增细胞为hMSCs。hMSCs经5-Aza诱导分化后其形态发生改变，逐渐由长梭形变为多角形及星形，并表达Desmin。透射电镜下可见细胞大小不一致，细胞表面有许多微绒毛；细胞器丰富，胞质内可见丰富的线粒体、粗面内质网；部分细胞内可见大量糖原颗粒沉积，小部分细胞内可见髓样小体；胞浆内可见肌丝样结构，细胞间存在细胞连接。结论：体外分离培养扩增的hMSCs经5-Aza诱导，可分化成具有CMs超微结构特性的心肌样细胞。

目的：观察内毒素(LPS)对过氧化氢(H₂O₂)诱导的神经胶质瘤C6细胞损伤的影响，探讨其相关机制。方法：C6细胞按处理方法不同分为空白对照组、100 μmol•L^-1 LPS组、1 000 μmol•L^-1 H₂O₂组及1 000 μmol•L^-1 H₂O₂与100μmol•L^-1 LPS联合应用组。药物作用C6细胞6 h，取培养液上清与细胞沉淀，利用LDH检测试剂盒，采用紫外分光光度法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率；原位末端标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡率；应用RT-PCR检测相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达；Western blotting检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、细胞色素C(Cyt-C)及CLIC4蛋白水平。结果：与空白对照组比较， 100 μmol•L^-1 LPS组C6细胞凋亡率及LDH释放率增加(P<0.05)，在mRNA水平上Bcl-2、Bax表达率未见明显改变(P>0.05)，而Caspase-3表达率升高(P<0.05)；在蛋白水平上，与空白对照组比较，Bcl-2、Bax、CLIC4及胞浆Cyt-C蛋白水平未见明显变化(P>0.05) ，而Caspase-3蛋白水平高于空白对照组(P<0.05)。与空白对照组比较，1 000 μmol•L^-1 H₂O₂组C6细胞凋亡率及LDH释放率增加(P<0.05)；在mRNA水平上Bcl-2表达率低于空白对照组(P<0.05)，Bax、Caspase-3表达率高于空白对照组(P<0.05)；在蛋白水平上，Bcl-2蛋白表达低于空白对照组(P<0.05)，Bax、Caspase-3、CLIC4及胞浆Cyt-C蛋白水平明显高于空白对照组(P<0.05)。与H₂O₂组和LPS组比较，LPS与H₂O₂联合作用组细胞凋亡率及LDH释放率明显增加(P<0.05)，在mRNA水平上Bcl-2表达率下降(P<0.05)，Bax、Caspase-3表达率升高(P<0.05)；在蛋白水平上，Bcl-2蛋白表达低于对照组(P<0.05)，Bax、Caspase-3及胞浆Cyt-C蛋白水平明显高于对照组(P<0.05)，而CLIC4蛋白水平变化不明显(P>0.05)。结论：单独应用LPS能够激活Caspase-3信号通路，引起C6细胞早期凋亡，同时LPS能促进H₂O₂引起的C6细胞损伤，其机制可能与凋亡相关的Bcl-2/Bax及Caspase-3途径过度激活有关。线粒体氯通道蛋白CLIC4在此过程中作用不明显。

目的：研究电离辐射和5-氟尿嘧啶（5-FU）对EL-4细胞周期解偶联的时间-效应关系和剂量-效应关系。方法：取指数生长期EL-4细胞，采用不同照射剂量（0、1.0、2.0和4.0 Gy）电离辐射和不同浓度5-FU（0、0.001、0.010、0.100和1.000 mg•L^-1）处理EL-4细胞，于0、4、8、16、24和48 h后分别收集细胞，碘化丙啶（PI）荧光标记及流式细胞术（FCM）检测细胞倍体变化。结果：与假照组比较，2.0 Gy X射线照射后，EL-4细胞二倍体细胞百分率在照射后8~24 h显著增加（P<0.05或P<0.01），48 h恢复至正常水平；四倍体细胞百分率在照射后8~48 h显著降低（P<0.05或P<0.01）；八倍体细胞百分率在照射后16~24 h显著降低（P<0.05）。1.0~4.0 Gy X射线照射后16 h，与假照组比较，二倍体细胞百分率剂量依赖性增加（P<0.05或P<0.01），四倍体细胞百分率呈剂量依赖性下降（P<0.01），八倍体细胞百分率变化不显著。0.100 mg•L^-1 5-FU 给药后，与0 mg•L^-1组比较，EL-4细胞二倍体细胞百分率在给药后16~48 h显著降低（P<0.01）；四倍体细胞百分率在给药后8~24 h显著增加（P<0.05 或 P<0.01），48 h回降；八倍体细胞百分率在给药后4~16 h显著增加（P<0.05）。不同剂量5-FU给药后16 h，与0 mg•L^-1组比较，EL-4细胞二倍体细胞百分率显著降低（P<0.05或P<0.01），四倍体细胞百分率显著增加（P<0.05或P<0.01），二者变化在0.001~1.000 mg•L^-1剂量范围内呈剂量依赖性；八倍体细胞百分率仅在0.010和0.100 mg•L^-1组显著增加（P<0.05或P<0.01）。结论：1.0~4.0　Gy电离辐射无诱导EL-4细胞发生细胞周期解偶联作用，0.010~0.100 mg•L^-1 5-FU可以诱导EL-4细胞发生细胞周期解偶联。

目的：探讨靶向人结缔组织生长因子（CTGF）锤头核酶对人肝星状细胞系（LX-2）细胞Ⅰ型胶原转录和分泌及细胞增殖的抑制作用，为肝纤维化基因治疗提供实验依据。方法：构建含有CTGF锤头核酶及其5′和3′端分别连接一自剪酶cDNA序列的重组质粒pTriCTGF-Rz。实验分5组：未转染组、空质粒pTriEx2转染组、空质粒转染加TGF-1组、pTriCTGF-Rz转染组和pTriCTGF-Rz转染加TGF-1组。半定量RT-PCR检测CTGF mRNA和Ⅰ型胶原 mRNA水平，ELISA检测LX-2细胞分泌Ⅰ型胶原的水平，流式细胞仪检测LX-2细胞周期。结果：与pTriEx2转染组比较，pTriCTGF-Rz组LX-2细胞CTGF mRNA水平和TGF-1诱导CTGF mRNA的水平降低（P<0.05），pTriCTGF-Rz组LX-2细胞Ⅰ型胶原mRNA转录和蛋白分泌减少，TGF- 1诱导I型胶原的转录水平降低（P<0.05）。 与空质粒pTriEx2转染组比较，pTriCTGF-Rz转染组LX-2细胞 G₀-G₁期细胞数增多(P<0.05)，S期细胞减少(P<0.01)。 结论:靶向CTGF的锤头核酶具有抑制人肝星状细胞介导肝纤维化的作用，可能成为肝纤维化基因治疗的新途径。

目的：观察大鼠在局灶性脑缺血早期脑组织内血管生成素（Ang）-1和Ang-2 mRNA在不同时间点的表达变化，探讨其变化规律并分析脑缺血后Ang-1、Ang-2在缺血性脑卒中发病中的作用机制。方法：大鼠随机分为正常对照组（C组）、假手术组（S组）和缺血组（I组），缺血组又分为缺血1、3、6、12、24、48和72 h组，采用改进的线栓法制做永久性大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,采用RT-PCR技术检测各组大鼠脑组织缺血半影区内Ang-1 mRNA及Ang-2 mRNA的表达水平。结果：正常对照组和假手术组Ang-1 mRNA中等量表达，两组表达量比较差异无显著性（P>0.05）；Ang-2 mRNA极低量表达，两组表达量比较差异无显著性（P>0.05）；缺血组Ang-1 mRNA表达水平在脑缺血早期（3～6 h）低于C组（P<0.01），脑缺血48～72 h高于C组（P<0.01）；Ang-2 mRNA在脑缺血后3 h表达水平高于C组，在脑缺血后12 h出现高峰，且持续至脑缺血后72 h（P<0.01）。结论：Ang-1和Ang-2可能在局灶性脑缺血后与其他血管特异性生长因子共同参与缺血半影区的新血管形成并抑制神经元细胞凋亡，有利于改善缺血半影区血液供应和促进神经功能恢复。

目的:在毕赤酵母（Pichia pastoris）中高效表达人β-淀粉样蛋白1-42(hAβ_1-42)，用80 L的发酵罐大量制备hAβ_1-42。方法: 在成功构建表达载体pPICZα-hAβ_1-42并电转化至毕赤酵母X-33的基础上，筛选高表达hAβ_1-42工程菌，对发酵液的pH值、溶解氧、甲醇流加速度以及诱导表达的时间等发酵条件进行系统优化，通过阳离子交换层析和反向疏水层析对其进行纯化，实现其大规模制备。结果: 筛选出的高表达工程菌采用80 L发酵罐甲醇诱导补料批式发酵,在pH 4.0、溶解氧浓度20 %～30 %、罐内压力为10 psi、甲醇诱导48 h时产量最高可达150 mg•L^-1；纯化的hAβ_1-42经SDS-PAGE分析显示单一区带,相对分子质量约为4 200。结论:构建、筛选出高效表达hAβ_1-42的毕赤酵母工程菌,并建立稳定的发酵和纯化制备工艺。

目的：研究来源于川金丝猴的柯萨奇B3病毒株CVB/SGM-05对BALB/c小鼠的致病变特点。方法：4~6周龄健康雄性BALB/c小鼠30只，通过腹腔注射途径将滴度为10⁵个TCID₅₀/0.1 mL的CVB/SGM-05接种小鼠（0.2 mL/只），观察感染小鼠的临床症状及大体病变特点；分别摘取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、胃、肠、脑和脂肪组织，经10%的中性甲醛溶液固定后制作常规的病理石蜡切片，光镜下观察其病理变化特点。结果：小鼠于接毒后60 h开始死亡，死亡率达80%；发病小鼠均出现典型的结膜炎。对死亡小鼠剖检可见，肝脏明显肿大，呈淡黄色样改变，表面可见针尖大灰白小点；部分小鼠的脾脏肿大、边缘与坏死的脂肪发生粘连；最明显的病变为腹腔内脂肪的大量坏死。病理切片观察可见心、肝、肾组织均有不同程度的细胞变性，心肌纤维间有炎性细胞浸润，肝细胞坏死严重；胃、肠黏膜上皮坏死、脱落；脑组织可见轻度淤血；脂肪坏死尤其明显。结论：与人源的标准毒株Nancy比较，猴源的CVB/SGM-05感染BALB/c小鼠可引起多脏器损伤，提示不同来源的CVB3毒株可能对感染动物的致病性有一定差异。

目的：探讨氯通道ClC-2 反义寡核苷酸(AON)抑制ClC-2基因表达对顺铂(DDP)作用下神经胶质瘤U251细胞侵袭力的影响，为ClC-2成为神经胶质瘤综合治疗的新基因靶点提供理论依据。方法：U251细胞按处理方法不同分为对照组（转染无义寡核苷酸）、AON组（转染ClC-2反义寡核苷酸）、DDP组（无义寡核苷酸与顺铂联用）和AON +DDP组（ClC-2反义寡核苷酸与顺铂联用）。应用RT-PCR检测相关基因ClC-2、cyclin D1 、MMP-2、MMP-9 mRNA表达；Transwell 小室侵袭实验检测各组细胞侵袭力；Transwell 小室迁移实验检测各组细胞迁移率。结果：与对照组比较，AON组、DDP组和AON +DDP组ClC-2、cyclin D1 、MMP-2、MMP-9 mRNA表达率降低（P＜0.05）；Transwell 小室侵袭实验中对照组、AON组、DDP组和AON +DDP组侵袭细胞数分别为81.00±4.58、42.01±4.36、48.33±2.52和12.67±5.13；与对照组比较，AON组、DDP组和AON +DDP组穿透细胞数明显降低（P＜0.05）。Transwell 小室迁移实验中AON 组、DDP组、AON +DDP组细胞迁移率（%）分别为72.40±2.20、51.48±1.29、37.87±1.50，与对照组比较均明显降低（P＜0.05）。结论：①转染ClC-2反义寡核苷酸能有效抑制ClC-2 mRNA表达；②抑制ClC-2 mRNA能降低U251细胞的迁移力和侵袭力；③ClC-2 mRNA表达降低可促进顺铂对U251细胞迁移力和侵袭力的抑制作用。

目的：探讨INF-γ对体外培养的人肾小球系膜细胞高迁移率〖JP3〗族蛋白1（HMGB1）和基质金属蛋白酶2〖JP〗（MMP-2）表达的影响及可能机制，为系统性红斑狼疮（SLE）肾脏损害的治疗提供依据。方法：将常规培养的人肾小球系膜细胞分为正常对照组和INF-γ刺激组，于6、12和24 h收集细胞和上清，RT-PCR和免疫细胞化学法检测HMGB1 mRNA和蛋白表达；双抗夹心ELISA法检测细胞培养上清中HMGB1和MMP-2表达；免疫细胞化学法检测细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）和MMP-2表达。结果：与对照组比较，INF-γ刺激组系膜细胞PCNA蛋白表达强度增加，INF-γ刺激12和24 h时系膜细胞中HMGB1 mRNA水平明显增加(P<0.01)，HMGB1蛋白表达强度增加；培养上清中HMGB1浓度明显增加(P<0.01)；与对照组比较，INF-γ刺激组系膜细胞中MMP-2表达强度增加，培养上清中MMP-2蛋白水平升高(P<0.01)；培养上清中HMGB1 浓度与MMP-2蛋白表达量呈正相关关系（r=0.915，P<0.01）。结论：INF-γ通过促进系膜细胞合成和分泌HMGB1而上调MMP-2的表达，可能与SLE肾脏损伤有关联。

目的：观察西洋参叶20s-原人参三醇组皂苷（PQTS）对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用，为新药开发提供依据。方法：50只大鼠随机分为假手术组、再灌注模型组及PQTS 12.5、25.0、50.0 mg•kg^-1组（每组10只），PQTS组动物腹腔注射PQTS，假手术组和再灌注模型组注射生理盐水，结扎冠状动脉前降支30 min，松扎再灌注120 min造成心肌缺血再灌注损伤模型，检测各组心肌梗死范围（MIS），血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、心肌型肌酸激酶同功酶（CK-MB）、超氧物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、丙二醛（MDA）含量、血浆前列环素（PGI₂）及血栓素A₂（TXA₂）水平。结果：与再灌注模型组比较，PQTS 25.0和50.0 mg•kg^-1组MIS缩小（P<0.01），血清AST、LDH、CK-MB活性及MDA含量降低（P<0.01），SOD及GSH-Px活性升高（P<0.05），血浆TXA₂水平下降（P<0.05），PGI₂水平及PGI₂/TXA₂比值增高（P<0.05或P<0.01）。上述指标PQTS 12.5 mg•kg^-1组与对照组及再灌注模型组比较差异无显著性。结论：PQTS对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有明显保护作用，可能与其增强抗氧化酶活性、减少自由基对心肌的氧化损伤、纠正血管活性物质平衡失调等机制有关。

目的: 提取强力天麻杜仲胶囊（QLTM）的活性成分，检测其药物活性及其对巨噬细胞的调节作用。方法: 随机将小鼠分为对照组（生理盐水组）、QLTM胶囊组（阳性药物组）及QLTM活性成分高、中、低剂量提取物组，连续灌胃14 d，通过热板致痛法观察小鼠首次舔后足时间和1 min内的舔后足次数，通过醋酸致痛法观察小鼠首次扭体时间和15 min内的扭体次数，通过腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验检测巨噬细胞活性。结果:在热板致痛实验中，高、中剂量提取物组小鼠首次舔后足时间延长，1 min内的舔后足次数减少（P<0.05或P<0.01）；在醋酸致痛实验中，高、中剂量提取物组小鼠首次扭体时间延长，15 min内的扭体次数减少（P<0.05）；高、中剂量提取物组及QLTM胶囊组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率均降低，但中剂量组低于对照组（P<0.05）。结论: QLTM活性成分具有镇痛和抑制巨噬细胞活性作用。

目的： 构建编码Twist mRNA 的短发卡样RNA （shRNA ）质粒表达载体,并筛选出基因沉默效果最明显的shRNA 质粒表达载体。方法： 以Twist mRNA 编码区中第777位和第845位序列作为RNA干扰靶点,分别构建2个shRNA 质粒表达载体和1个阴性对照质粒表达载体，构建后通过PCR 酶切电泳和质粒测序进行鉴定。经鉴定后分别转染稳定表达Twist基因的膀胱癌T24细胞,RT-PCR 和Western blotting 分别从mRNA 和蛋白质水平检测抑制效果。结果： 构建的质粒表达载体PCR鉴定均可扩增出400 bp的目的条带,插入片段测序结果与合成的shRNA 结果一致。靶向Twist基因的shRNA 对膀胱癌T24细胞中Twist基因mRNA 抑制率为90%，蛋白质抑制率为86%,两种干扰质粒中shRNA1干扰效果最明显。结论： 成功构建了靶向Twist 基因的shRNA 质粒表达载体,其中抑制效果最为明显的shRNA 质粒表达载体为pGenesil-shRNA1 质粒。

目的：克隆人膜型基质金属蛋白酶1（MT1-MMP）基因，构建真核表达载体，并检测其在人肝癌细胞HepG2中的表达。方法：采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）从人正常肝组织中扩增MT1-MMP全长cDNA，将之与pMD18-T载体连接，测序后将该片段亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1中。将构建好的pcDNA3.1/MT1-MMP真核表达载体经酶切鉴定后，采用脂质体法转染入HepG2细胞，经G418筛选，得到阳性克隆细胞株。应用RT-PCR检测转染前后该细胞株MT1-MMP mRNA表达水平。结果：①RT-PCR获得长度约为704 bp的目的片段，与预期片段相符;②将pcDNA3.1/MT1-MMP真核表达载体经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切鉴定，得到约5 400 bp和704 bp两个片段，测序结果证实所插入目的片段与GenBank中MT1-MMP cDNA序列匹配；③重组质粒转染株MT1-MMP mRNA表达水平（1.66±0.43）明显高于空质粒组（1.21±0.25）和对照组（1.19±0.18)(P<0.01）。结论：成功构建pcDNA3.1/MT1-MMP真核表达载体，并在人肝癌细胞株HepG2中稳定表达。

目的:构建靶向存活素（survivin）基因的RNA干扰(RNAi）载体，观察其联合X射线照射对肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法:根据GenBank中survivin的cDNA序列设计干扰序列，构建重组干扰质粒pGenesil2-survivin。酶切、测序鉴定正确后，干扰质粒经脂质体介导转染肺腺癌A549细胞；实验设正常组、空载体组、pGenesil2-survivin组、5 Gy照射组和pGenesil2-survivin + 5 Gy照射组。流式细胞术与TUNEL检测细胞凋亡的变化，Western blotting检测survivin及caspase-3蛋白表达。结果：KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切，得到大小为389 bp和4 206 bp的两个片段，与预期结果一致；测序结果与寡核苷酸链经DNAssist2.0软件进行比对，二者完全一致，说明载体构建正确；质粒pGenesil2-survivin转染肺腺癌A549细胞48 h，pGenesil2-survivin与5 Gy X射线照射都能诱导细胞凋亡百分率增加（P< 0.05），二者共同作用凋亡百分率增加更明显；Western blotting结果显示，pGenesil2-survivin组中survivin蛋白与β-actin蛋白灰度比值较正常组明显降低（P< 0.01）；而caspase-3蛋白与β-actin蛋白灰度比值较正常组明显增强，且pGenesil2-survivin+5 Gy照射组增加更明显（P< 0.01）。结论:靶向存活素基因的RNAi能够明显抑制survivin蛋白表达，增强caspase-3蛋白表达，促进凋亡；联合5 Gy X射线照射，增强促凋亡作用。

目的：探讨RNA干涉技术下调survivin基因表达对人肝癌细胞的生长抑制及促凋亡的作用，为肝癌的基因治疗提供有效靶点及技术。 方法：构建pSU6-si-survivin重组质粒,转染人肝癌细胞株Bel7402，设空白组、阴性组和治疗组，采用MTT法检测肝癌细胞的增殖活性，RT-PCR检测survivin基因mRNA水平，Western blotting及免疫组化法检测survivin蛋白表达，流式细胞技术(FCM)及AO/EB染色观察细胞凋亡。结果：MTT法检测，治疗组24、48〖JP3〗和72　h细胞生长抑制率(%)分别为21.43±1.67、39.07±3.80和59.72±〖JP〗7.05，与阴性组比较差异有显著性 (P<0.01）。RT-PCR及Western blotting检测，治疗组细胞survivin基因在mRNA及蛋白水平上表达均下降，上述产物量与β-actin的比值与空白组和阴性组比较差异均有显著性（P<0.01）。FCM检测治疗组细胞阻滞于G₀/G₁期，凋亡率为（20.65±1.28）%，与空白组及阴性组比较差异有显著性(P<0.01)。AO/EB双染色治疗组细胞呈早中期凋亡。结论：重组质粒pSU6-si-survivin可抑制survivin基因在人肝癌细胞中的表达,抑制肝癌细胞生长,促进肝癌细胞凋亡；survivin基因可作为肝癌基因治疗的重要靶点。

目的:研究辛伐他汀对柯萨奇B3病毒（CVB3）感染BALB/c小鼠后心肌细胞 L-型钙通道(LCCs)mRNA表达的影响，探讨辛伐他汀对病毒性心肌炎的治疗作用。方法：应用 CVB3 感染BALB/c小鼠制作病毒性心肌炎模型，辛伐他汀混悬液灌胃，按辛伐他汀剂量分为10 mg•kg^-1 组、30 mg•kg^-1 组及90 mg•kg^-1 组，并设正常对照组及病毒感染对照组，行心肌病理观察，采用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测正常对照组、病毒感染组及辛伐他汀组心肌细胞LCCs　α₁亚单位mRNA 表达量。结果:病毒感染组小鼠心肌组织有局灶性或弥漫性以单核细胞为主的炎性细胞浸润，重者可见大片状心肌细胞坏死；辛伐他汀组心肌组织炎症细胞浸润及坏死灶明显减轻；正常对照组和病毒模型组心肌LCCs α₁亚单位的mRNA表达量分别为0.06±0.01和1.37±0.32，二者比较差异有显著性（P<0.05）；辛伐他汀10 mg•kg^-1、30 mg•kg^-1 及90 mg•kg^-1 组LCCs α₁ 亚单位的mRNA表达量分别为1.14±0.22、0.17±0.04和0.11±0.02，与病毒模型组比较差异有显著性（P<0.05）,其中以中、高剂量组下降最明显。结论:辛伐他汀可减轻病毒性心肌炎的病理损害，并以剂量依赖的方式抑制心肌细胞LCCs α₁ 亚单位的mRNA表达,发挥心肌保护功能，对病毒性心肌炎有一定的治疗作用。

目的：研究羊蹄根丙酮、乙醚提取物对小鼠血小板减少症的治疗作用。方法： 80只BACB/C小鼠随机分为5组（每组16只）：阴性对照组（色拉油）、羊蹄根丙酮提取物中剂量（0.5 g生药•kg^-1）、高剂量（5.0 g生药•kg^-1）组和乙醚提取物中剂量（0.5 g生药•kg^-1）、高剂量（5.0 g生药•kg^-1）组。小鼠连续3 d皮下注射环磷酰胺（0.3mL/20g），建立血小板减少症模型；将造模成功小鼠分别给予色拉油，中、高剂量羊蹄根丙酮提取物及中、高剂量羊蹄根乙醚提取物灌胃，20 d后处死动物采血检测血小板数、红细胞数、白细胞数。结果： ①与造模前比较，造模后第14天各组小鼠血小板数量降至最低(P<0.01)；②造模后第20天（实验结束时）各组小鼠血小板数量高于第14天（P<0.01)，且小鼠血小板数羊蹄根丙酮、乙醚提取物各实验组高于阴性对照组（P<0.01) ；③羊蹄根丙酮、乙醚提取物各实验组小鼠红细胞、白细胞的数量与对照组比较差异无显著性（P>0.05）。结论：中、高剂量羊蹄根丙酮、乙醚提取物对小鼠血小板减少症有明显治疗作用。

目的：筛选含有外源性TIP30的人肾透明细胞腺癌细胞系786-0，探讨TIP30基因对786-0的生长抑制作用，寻找肾癌基因治疗的潜在靶点。方法：采用RT-PCR技术扩增TIP30基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-TIP30，转染786-0细胞,利用RT-PCR及Western blotting检测稳定转染pcDNA3.1-TIP30载体、转染pcDNA3.1(+)空载体及未处理的786-0细胞中TIP30的表达,另通过MTT法检测转染后细胞增殖能力的变化，流式细胞仪测定细胞周期分布的变化。 结果：与未处理的和转染pcDNA3.1(+)的786-0细胞比较,转染pcDNA3.1-TIP30的786-0细胞中TIP30基因的mRNA和蛋白表达水平均明显增加(P<0.05)；未处理与转染pcDNA3.1(+)的786-0细胞中TIP30的表达水平比较差异无显著性(P>0.05)。转染pcDNA3.1-TIP30的786-0细胞生长抑制率明显高于未处理的和转染pcDNA3.1(+)的786-0细胞(P<0.01)。流式仪检测细胞周期,与未处理的和转染pcDNA3.1(+)的786-0细胞比较,转染pcDNA3.1-TIP30的786-0细胞G₀-G₁期细胞比例显著增加，S和G₂-M期细胞比例降低(P<0.01)。结论: 786-0细胞能够稳定表达外源基因TIP30；提高肾癌细胞中TIP30蛋白的表达,可抑制肿瘤细胞的生长；TIP30是肾癌基因治疗的潜在靶点。

目的：观察急性肾功能衰竭（ARF）时钠转运蛋白NKCC₂和γENaC的水平及细胞定位，探讨ARF时水盐代谢障碍的机制。方法：ARF组大鼠肌注甘油建立ARF模型，对照组(Control)则给等量生理盐水；观察肾组织病理学改变，检测血清及尿液生化指标，应用免疫组化和蛋白印迹方法检测肾脏NKCC₂和γENaC表达及胞内定位。结果：肌注甘油后第1、2和3天 ARF组大鼠尿量分别为（35.2±8.7）、（47.9±11.0）和（43.2±17.0） mL•d^-1，明显高于对照组(P<0.05)，〖JP3〗第4天开始逐渐恢复到对照组水平［(22.0±5.2 )mL•d^-1］；〖JP〗ARF大鼠血肌酐和尿素氮分别为（53.8±12.2）和（9.5±1.2） mmol•L^-1，明显高于对照组［分别为（38.9±9.1 ）和（7.9±1.5） mmol•L^-1］ (P<0.05)；ARF组大鼠肾小管管腔变小，上皮细胞发生脂肪变性，管周有炎细胞浸润；免疫组化检测ARF组大鼠NKCC₂和γENaC表达增加；蛋白印迹光密度比值分析，肾小管上皮细胞膜NKCC₂和γENaC蛋白增加比例(分别为2.54±0.27和1.83±0.23)明显高于细胞质(分别为1.53±0.17和1.21±1.18) (P<0.05)。结论：ARF时细胞膜及细胞质NKCC₂和γENaC表达均增高，以细胞膜增高更为明显，提示AFR时肾组织相对正常肾单位代偿性功能增强，通过钠转运蛋白水平及细胞定位的变化参与水盐代谢的调节。

目的：探讨雌激素受体α基因多态性与中国北方汉族人群子宫肌瘤的关系。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法，检测167例子宫肌瘤患者和170例健康女性的雌激素受体α基因rs722209和rs9322346 SNPs位点的基因型，应用SPSS 12.0分析基因多态性与子宫肌瘤的关联性。结果：病例组与对照组人群2个SNPs的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律；病例组rs722209和rs9322346的等位基因及基因型的频数分布与对照组比较差异均无显著性(P>0.05)。结论：雌激素受体α基因rs722209和rs9322346基因多态性可能与中国北方汉族人群子宫肌瘤发病无关。

目的:研究汉防己甲素（TTD）对白血病细胞株K562/A02多药耐药(MDR)逆转的机理。方法：以白血病细胞系K562及其耐药细胞系K562/A02为TTD作用的靶细胞。细胞水平检测实验分5组（K562组、K562/A02组、K562+ADM组、K562/A02+ADM组和K562/A02+TTD+ADM组），采用MTT法检测TTD对K562和K562/A02细胞的非细胞毒性剂量，流式细胞术检测细胞内阿霉素(ADM)的浓度，基因、酶学、蛋白水平检测实验分3组（K562组、K562/A02组和K562/A02+TTD组），采用RT-PCR法检测mdr1 mRNA的表达，免疫细胞化学方法检测谷胱甘肽S转移酶π（GST-π）和拓扑异构酶Ⅱ（Topo Ⅱ）的表达水平，Western-blotting法检测P-糖蛋白（P-gp）和bcl-2表达。结果：1.562 5 mg•L^-1的TTD处理K562/A02细胞后，细胞内ADM的浓度较单用ADM组明显提高（P<0.01）；与空白对照组比较，K562/A02细胞内mdr1 mRNA/P-gp的表达量减少（P<0.01）；GST-π和TopoⅡ表达无明显变化；凋亡抑制基因bcl-2的表达量减少（P<0.01）。结论:TTD主要通过增加细胞内ADM浓度，下调mdr1/P-gp和bcl-2表达逆转耐药。

目的：将已构建完成的分泌型核心蛋白聚糖真核表达载体转染到HepG2细胞中并检测核心蛋白聚糖及p21^WAF1/CIP1的表达，探讨核心蛋白聚糖抗肿瘤作用的机制。方法：HepG2细胞分为转染pcDNA3.1-DCN载体的转染组和转染pcDNA3.1空载体的对照组，脂质体介导核心蛋白聚糖真核表达载体及质粒pcDNA3.1载体分别转染到HepG2细胞中，经G418筛选建立稳定转染的细胞株，采用RT-PCR法检测核心蛋白聚糖和p21^WAF1/CIP1 mRNA表达；Western blotting法检测核心蛋白聚糖和p21^WAF1/CIP1蛋白质的表达；免疫组化法检测核心蛋白聚糖蛋白质的表达。结果：RT-PCR检测转染组细胞核心蛋白聚糖及p21^WAF1/CIP1 mRNA表达的灰度比值均高于对照组 (P<0.05)，Western blotting检测核心蛋白聚糖及p21^WAF1/CIP1 蛋白质表达的灰度比值也高于对照组 (P<0.05)，免疫组化检测转染组细胞核心蛋白聚糖蛋白质表达的阳性细胞计数高于对照组 (P<0.05)。结论：成功建立了稳定转染核心蛋白聚糖的HepG2细胞株，并证实核心蛋白聚糖能够提高p21^WAF1/CIP1mRNA和蛋白质的表达。

目的：探讨Bcl-2、Bax在维生素K3 (VK3)诱导人肝癌细胞SMMC-7721损伤过程中的变化，为研究VK3诱导肝癌细胞损伤的机制提供参考。方法：体外培养SMMC-7721细胞，取对数生长期细胞分为对照组和不同浓度VK3处理的实验组（20、40和60 μmol•L^-1），MTT法检测各组SMMC-7721细胞生存率；紫外分光光度法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率；RT-PCR检测Bcl-2及Bax mRNA表达水平；Western blotting检测Bcl-2及Bax蛋白表达水平。结果：与对照组比较，20 μmol•L^-1 VK3组细胞存活率、LDH释放率、Bcl-2和Bax mRNA表达量及其蛋白表达量未见明显变化；与对照组比较，40和60 μmol•L^-1 VK3组细胞存活率降低(P<0.05或P<0.01)；LDH释放率增加(P<0.05或P<0.01)；Bcl-2 mRNA表达率降低(P<0.05)；Bax mRNA表达量率升高(P<0.05)；Bcl-2蛋白表达水平下降(P<0.05)；Bax 蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论：40 μmol•L^-1剂量的VK3能够诱导SMMC-7721细胞损伤，其机制可能与下调Bcl-2和上调Bax蛋白表达有关。

目的：通过观察海人藻酸（KA）致痫鼠在KA不同剂量条件下其海马各亚区病理变化特点，探讨癫痫的信号传导通路及发病机制。 方法：Wistar雄性大鼠30只，随机分为正常对照组、小剂量KA组（0.025 μg）和大剂量KA组（0.100 μg）（每组10只），用微管注射法在右侧杏仁核内注射KA制备癫痫模型，观察不同剂量KA引起的海马各亚区病理变化特点。 结果：与正常对照组比较， 大剂量KA组大鼠海马区表现为以CA3区细胞脱落为主，CA1区锥体细胞及齿状回颗粒细胞大小形态正常，排列整齐。小剂量KA注射则使CA1和CA3区细胞均受损，而齿状回细胞始终保持完好。 结论：KA致痫鼠海马各亚区病理变化随KA剂量不同而不同，可能与癫痫信号传导的顺序及海马自身的特性有关。

目的：观察罗格列酮(RSG)对大鼠急性心肌缺血再灌注(I-R)损伤心肌梗死面积、心律失常发生率和心肌病理学改变的影响。方法：结扎大鼠左冠状动脉前降支30 min、再灌注120 min建立大鼠心肌I-R损伤模型，将大鼠随机分为I-R损伤模型组、RSG高剂量(6 mg•kg^-1)、低剂量(3 mg•kg^-1)组和假手术组，灌胃给药1周后行I-R损伤手术，观察心肌梗死面积、心律失常发生次数和类型、心肌组织学改变和心肌细胞超微结构的变化。结果：与模型组比较，RSG高剂量组心肌梗死面积与左心室面积百分率（IS/LV％,29.3±4.9 vs 37.6±3.2）以及心肌梗死面积与危险区面积比值(IS/AAR％,76.1±9.6 vs 93.5±7.4)减少（P<0.05或P<0.01）；RSG高量组心律失常评分（2.6±0.4）低于I-R损伤模型组（4.2±0.6）(P<0.05)。RSG组心肌病理组织学和心肌细胞超微结构损伤轻于I-R损伤模型组。结论：RSG可通过减少I-R损伤大鼠心肌梗死面积、减少恶性心律失常的发生及改善病理组织学损伤而起到对大鼠心肌I-R损伤的保护作用。

目的:探讨老龄兔骨髓间充质干细胞(MSCs)移植治疗心肌梗死的最佳时间,为细胞移植治疗心肌细胞坏死性相关疾病提供前期的实验依据。方法：选择月龄大于或等于36个月的新西兰大耳白兔30只（36月　龄兔相当人60岁左右，为老龄兔），建立心肌梗死模型，将造模成功兔随机分为6组（空白对照组、1 d组、1周组、2周组、3周组、4周组），每组5只；取标记后的MSCs细胞（密度为2×10⁷•mL^-1）200 μL，分别多点注射于心肌梗死后1 d、1周、2周、3周、4周的心脏梗死区，空白对照组注射等量生理盐水。8周后进行心功能参数、心脏房室瓣血流率及血液动力学指标检测。结果：与对照组比较， 1 d移植组心功能参数、心脏房室瓣血流率及血液动力学指标高于对照组（P<0.05）；1周、2周及3周移植组心功能参数、心脏房室瓣血流率及血液动力学指标明显高于对照组（P<0.01）；4周移植组与对照组比较心功能虽有提高，但差异无显著性（P>0.05）；1周、2周及3周移植组心功能参数、心脏房室瓣血流率及血液动力学指标高于1 d移植组（P<0.05）；1周、2周、3周三组之间比较差异无显著性（P>0.05）。结论：心肌梗死后不同时间进行相同剂量细胞移植时，1 d~3周行MSCs细胞移植治疗均能改善心功能，以第1~3周移植效果最佳。

目的：观察胡桃楸树皮提取物（JMME）对SMMC-7721、MCF-7和A549 3种肿瘤细胞的生长抑制作用，确定其抑瘤的药用价值，通过检测JMME诱导肿瘤细胞凋亡、抑制端粒酶活性变化阐述其抑瘤机制。方法：分别以25、50、100、200、400和800 mg•L^-1JMME作用于体外培养的SMMC-7721、MCF-7和A549肿瘤细胞72 h，采用MTT法检测生长抑制率；以200 mg•L^-1JMME作用于体外培养的SMMC-7721、MCF-7和A549，于倒置显微镜下观察细胞形态学变化；琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡；PCR-ELISA法检测端粒酶活性。结果：不同浓度JMME（25、50、100、200、400和800 mg•L^-1）对SMMC-7721的细胞生长抑制率(%)分别为13.06、21.77、29.88、41.74、69.82和78.08；对MCF-7的抑制率(%)为24.91、38.63、49.72、61.84、65.69和81.28；对A549的抑制率(%)为12.32、26.21、41.65、55.38、62.87和80.13；与对 照组比较，JMME各浓度作用的3种肿瘤细胞的生长抑制率均升高（P<0.05），抑制率随JMME对SMMC、MCF-7和A549细胞的浓度的增加而增高（P<0.05）。JMME对SMMC、MCF-7和A549细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为211.21、111.07和176.20 mg•L^-1，对MCF-7的IC₅₀小于其他两种瘤细胞株。经不同浓度JMME作用单位视野内细胞数量明显减少，细胞间隙增大，细胞体积明显缩小，细胞失去原有的形态，胞体皱缩变圆，出现膜发泡现象，对照组无此变化。提取DNA进行琼脂糖凝胶电泳，见DNA Ladder，表明3种肿瘤细胞经不同浓度JMME作用后出现不同程度凋亡。3种肿瘤细胞与阴性对照组比较端粒酶活性升高，而经过JMME作用后端粒酶活性均受到了抑制，抑制率分别为42.86%、73.30%和58.78%。结论：胡桃楸树皮提取物在体外有抗肿瘤活性，其机制可能与其诱导肿瘤细胞凋亡﹑抑制端粒酶活性有关。

目的：观察电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞TLRs介导的信号传导通路中TLR4和转接蛋白MyD88表达的影响，探讨低剂量辐射诱导机体免疫效应的机制。方法：昆明系雄性小鼠160只。时间-效应实验60只，随机分为假照组、照射后4、8、16、24和48 h实验组，每组10只；剂量-效应实验100只，随机分为假照组、0.050、0.075、0.100、0.200、0.500、1.000、2.000、4.000和6.000 Gy照射组，每组10只；X 线全身照射 (WBI) 后，采用流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞中TLR4和MyD88阳性细胞百分率。结果：时间-效应实验表明，与假照组比较，0.075 Gy 照射后TLR4和MyD88表达率在4 h后开始增高，分别在16 h和4 h达高峰（P<0.05或P<0.01，）；2.000 Gy 照射后，TLR4和MyD88表达率在4 h后开始增高， 16 h达高峰（P<0.01）。剂量-效应实验表明，与假照组比较，各剂量照射组 TLR4和MyD88表达率均随照射剂的增加递增，在0.075 Gy 开始明显增加（P<0.05），在2.000 Gy 照射后达高峰（P<0.01）。结论：电离辐射使小鼠腹腔巨噬细胞TLR4和转接蛋白MyD88表达增高,促进小鼠的免疫反应，启动固有免疫及适应性免疫。

目的：探讨银杏叶提取物对高糖环境下人脐静脉内皮细胞（ECV304）的保护作用及机制。方法：体外培养的ECV304细胞分为高糖组、银杏叶保护组、甘露醇高渗对照组（甘露醇组）和正常细胞组，在35 mmol•L^-1高糖条件下培养ECV304细胞24 h后，分别收集不同处理组的细胞，检测细胞产生羟自由基（•OH）、超氧阴离子（O^-₂）、丙二醛(MDA)水平，同时测定细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性；采用不同处理组的细胞制作扫描电镜图片，观察细胞及线粒体形态的改变。结果：高糖组细胞产生•OH、O^-₂和MDA水平高于银杏叶保护组（P<0.05），SOD活性低于银杏叶保护组（P<0.05）。甘露醇组细胞产生•OH、O^-₂、MDA水平显著低于高糖组（P<0.05）。电镜下可见银杏叶保护组线粒体形态完好，线粒体内嵴清晰可见；高糖组线粒体肿胀，线粒体内嵴消失，坏死细胞增多。结论：银杏叶提取物对高糖导致的ECV304细胞损伤具有保护作用。

目的：探讨慢病毒载体在白血病细胞中的基因转导效率，为白血病基因治疗提供关键依据。方法：应用1型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)改造而成的第3代自身失活(SIN）慢病毒载体（lentiviral vector）系统，与鼠白血病病毒（MLV）SIN载体进行比较，通过荧光显微镜观察细胞内标记基因绿色荧光蛋白（GFP）的表达情况，应用流式细胞术检测基因导入细胞百分比，评价两种载体系统在人白血病细胞系K562中的基因转导效率。结果：通过荧光显微镜可定性观察GFP在K562细胞中的表达情况，在同样的基因转导条件下，HIV载体转导的白血病细胞中被转导的标记基因GFP的表达强度及GFP阳性细胞数明显高于MLV载体转导的细胞。流式细胞仪定量检测HIV载体的转导效率接近100%，而MLV低于40%,两组间转导效率比较差异有显著性（P＜0.05）。结论：基于慢病毒载体基因转导的高效性，该载体系统可作为白血病细胞基因转导的极好工具。

目的:获得具有良好生物相容性和骨引导作用的骨修复材料——煅烧骨粉并探讨其理化特性，为骨缺损修复寻找理想支架。方法：以牛骨为材料，通过煅烧彻底去除其有机成分（相应的抗原性和可能存在的病原微生物），保留其与人体骨基本一致的无机成分和天然的三维交通结构，经前期处理后煅烧至850℃的牛骨制成颗粒状，通过X-射线衍射、电子探针、电感耦合等离子体原子光谱法、电镜及光电子能谱检测煅烧骨理化特征及化学成分。结果:X-射线（粉末）衍射显示煅烧后牛骨粉的成分为羟基磷灰石(HAP)，通过电感耦合等离子体原子光谱法检测煅烧骨未检出氮元素,表明无蛋白、无有机成分；扫描电镜观察显示清晰的天然骨的骨小梁、小梁间隙及骨内管腔系统；孔隙大小为200～850 μm，平均孔隙率为（84.9±0.6）%。 结论:高温煅烧后的牛骨粉主要成分是羟基磷灰石，与骨组织有亲合力，具有三维交通孔隙结构，基本符合骨缺损修复理想支架的要求。

目的：检测TGFβ₁、TGFβ受体Ⅱ及其下游Smad调节因子等基因在乳腺癌和正常乳腺上皮细胞中的表达，探讨TGFβ在乳腺癌发展过程中发挥作用的分子机制。方法：分离纯化人正常乳腺上皮细胞，应用RT-PCR检测乳腺癌细胞系MCF7及正常乳腺上皮细胞中TGFβ₁、TGFβ受体Ⅱ、Smad4、Smad6、Smad7的表达。结果：TGFβ₁、TGFβ受体Ⅱ、Smad6、Smad7与内参照GAPDH比值在正常乳腺上皮细胞中（0.721±0.214、1.001±0.312、0.689±0.12和0.221±0.124）与MCF7细胞（0.698±0.324、0.998±0.217、0.718±0.257；0.246±0.138）比较表达水平差异无显著性，Smad4在乳腺癌细胞中的表达水平（0.498±0.221）低于正常乳腺上皮细胞（1.132±0.314）（P<0.05）。结论：Smad4在乳腺癌细胞中的低表达可能与TGFβ对乳腺癌的促癌作用有关联。

目的：探讨细胞死亡调节因子（GRIM-19）蛋白在肾脏透明细胞癌组织和正常肾组织中的表达及意义，阐明GRIM-19在肾脏透明细胞癌发生发展中的抑癌作用。方法： 采用免疫组织化学染色方法检测21例肾脏透明细胞癌组织和7例正常肾组织GRIM-19蛋白的表达；RT-PCR方法检测4例正常肾组织和8例肾脏透明细胞癌组织中GRIM-19基因mRNA的表达。结果： 免疫组化检测GRIM-19蛋白在肾脏透明细胞癌组织中阳性表达率为52.3%（11/21），在正常肾脏组织的阳性表达率为100%（7/7），两者比较差异有显著性（P<0.05）。病理分级Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级的肾脏透明癌组织中的表达率分别为100%（6/6）、40%（4/10）和20%（1/5），三种病理分级GRIM-19表达率比较差异有显著性（P<0.01）。RT-PCR检测GRIM-19基因在肾脏透明细胞癌组织中阳性表达率为62.5%（5/8），在正常肾脏组织的阳性表达率为100%（4/4），两者比较差异有显著性（P<0.01）。结论：GRIM-19在肾脏透明细胞癌基因和蛋白水平表达明显下降，并与其病理分级存在明显的关联性，提示GRIM-19蛋白可能在肾脏透明细胞癌发生发展中发挥抑癌作用。

目的：探讨SAPAP3基因多态性与强迫症的关系，为强迫症的易感基因研究奠定基础。方法：采用聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对190例强迫症大学生和190例健康大学生SAPAP3基因上的标签SNP位点rs11264155进行基因型检测。结果：rs11264155位点PCR扩增目的片段长度为219 bp，经酶切后呈现CC、CG、GG 3种基因型；rs11264155位点基因型频数分布符合Hardy-Weinberg平衡定律；rs11264155位点在病例组和对照组中基因型频数和等位基因频数分布差异无显著性(P>0.05)；该位点的基因型频数和等位基因频数在不同临床类型的强迫症大学生中分布差异无显著性(P>0.05)。结论：SAPAP3基因tag SNP rs11264155位点的多态性可能与强迫症的发生无关联。

目的：分析肝癌组织中生长抑素受体亚型SSTR2和SSTR5 mRNA表达状况及其与肿瘤的关联性，为应用生长抑素及其类似物诊断和治疗肝癌奠定理论基础。方法：肝癌患者肝组织标本22例，采用RT-PCR检测并鉴定肝癌癌组织、癌旁组织及正常肝组织SSTR2和SSTR5　mRNA表达率，分析表达率与肿瘤特征之间的关系。结果：SSTR2mRNA肝癌癌组织的表达率为81.8%(18/22) ，表达水平为118.27±17.25，与正常肝组织［36.4%(8/22)，69.49±19.43］比较差异有显著性（P<0.05）；与癌旁组织［72.7%（16/22），111.18±23.74］比较差异无显著性（P>0.05）；癌旁组织与正常肝组织比较差异有显著性（P<0.05）。SSTR5 mRNA表达率和表达水平肝癌癌组织［18.2%（4/22）， 51.67±30.32］、癌旁组织［18.2%（4/22），49.56±27.61］及正常肝组织［9.1%（2/22），48.73±15.72］三组间两两比较差异均无显著性（P>0.05）。高分化肝癌组织中 ［SSTR2 100%（18/18）,SSTR5 25%（4/16）］和无淋巴结转移的肝癌组织中表达率［SSTR2 25.0%（4/16）,SSTR5 100%(4/4)］分别高于低分化的表达率［0(0/4),0(0/6)］和有淋巴结转移的表达率［0(0/6),0(0/18)］（P<0.05）；Ⅰ、Ⅱ期［SSTR2 85.7%（12/14），SSTR5 21.4%（3/14）］与Ⅲ、Ⅳ期［75.0%（6/8），12.5%（1/8）］表达率比较差异无显著性。结论:SSTR2 mRNA亚型在肝癌中呈高表达，其表达率、表达水平与癌组织分化程度、有无淋巴结转移有关联性，与肝癌的分期无关联。

目的:通过肝动脉造影观察肝动脉及其肝外分支的不同变异情况，为肝癌介入治疗提供影像学指导。方法:收集200例原发或转移性肝癌患者的介入术前肝动脉造影资料，2名介入科医生共同阅片观察Michels肝动脉变异分型，分析肝动脉变异发生概率、肝固有动脉缺失变异情况及肝动脉肝外分支的出现概率、起始部位的变异情况。结果:最常见的肝动脉变异是MichelsⅢ型17例（8.5%），其次是Ⅱ型10例（5.0%）和Ⅴ型9例（4.5%）。Ⅰ型中肝固有动脉缺失25例，且发现5种亚型。肝外供血分支5种，最常见的是胃右动脉肝外供血分支156例（78.0%），其次是胆囊动脉126例（63.0％）、副胃左动脉19例（9.5％）、肝镰状动脉5例（2.5%）、副左膈动脉4例（2.0％）。结论:肝动脉变异除Michels分型外尚有其他亚型，且肝动脉的肝外分支变异较多，充分认识这些变异有助于提高肝癌介入治疗效果，预防并发症发生。

目的： 探讨血清铜和血清游离铜对肝豆状核变性的诊断价值，为肝豆状核变性的诊断提供依据。方法：分别采用免疫散射比浊法和原子吸收光谱法检测8例暴发型肝豆状核变性、49例普通型肝豆状核变性、87例病毒性肝炎（慢性肝炎22例、重型肝炎46例、肝硬化19例）和57例其他肝病患者的血清铜蓝蛋白和血清铜，并根据血清铜和铜蓝蛋白计算出血清游离铜。结果：①暴发型肝豆状核变性患者血清铜 ［（105.0±29.4） μg•dL^-1］高于普通型肝豆状核变性［（28.1±14.9） μg•dL^-1］和重型肝炎患者［（70.5±41.7） μg•dL^-1］（P<0.05）；普通型肝豆状核变性患者血清铜均低于正常，与其他各组比较差异有显著性（P<0.01）；血清铜诊断肝豆状核变性敏感度为86.0%，特异度为47.2%。②暴发型肝豆状核变性患者血清游离铜平均为（62.3±27.7） μg•dL^-1，最高达113 μg•dL^-1，明显高于其他各组（P<0.01）。普通型肝豆状核变性的血清游离铜平均为（10.2±9.3） μg•dL^-1，高于其他肝病组（P<0.01），血清游离铜诊断肝豆状核变性的敏感度为59.6%，特异度为100%。 结论： 血清铜和血清游离铜对肝豆状核变性的诊断有一定的参考价值，而血清游离铜可作为诊断暴发型肝豆状核变性的指标。

目的：研究化脓性脑膜炎（BM）和病毒性脑膜炎（VM）患儿脑脊液中胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF-Ⅱ）和胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）水平变化，为BM和VM的鉴别诊断提供依据。方法：采用ELISA法检测30例中枢神经系统感染（BM13例，VM17例）患儿和15例对照组（不具有中枢神经系统及其他系统感染的同期住院患儿）脑脊液IGF-Ⅱ和IGFBP-3水平。结果：BM组脑脊液IGF-Ⅱ和IGFBP-3水平高于VM组及对照组（P<0.01）；VM组与对照组IGF-Ⅱ和IGFBP-3浓度比较差异无显著性。结论：BM患儿脑脊液IGF-Ⅱ和IGFBP-3水平升高，VM患儿IGF-Ⅱ和IGFBP-3水平无明显变化；脑脊液IGF-Ⅱ和IGFBP-3检测可作为BM和VM的鉴别诊断依据。

目的:探讨早期关节镜下采用双股半腱肌肌腱重建急性膝关节前交叉韧带不全损伤的方法和临床疗效。方法：采用双股半腱肌肌腱、Endobutton纽扣钢板和可吸收界面螺钉重建急性不全损伤的膝关节前交叉韧带15例(手术组)，具有同样损伤行非手术治疗患者7例（非手术组），应用Lysholm功能评分表评估两组患者膝关节功能，采用KT-2000关节测量仪检测韧带重建后膝关节的稳定性。结果：两组患者均获得2～24个月的术后随访，平均随访时间15个月。治疗康复12个月后，手术组患者术后患膝关节Lysholm平均功能评分由术前的（61.5±6.7）分提高到术后（90.3±9.3）分，术后与术前比较差异具有显著性（P＜0.05）；KT-2000关节测量仪检测显示：患侧与健侧松弛度对比差异在3 mm以内。非手术组中7例患者平均Lysholm功能评分仅由治疗前的（60.1±3.2）分提高到康复治疗后（72.8±2.5）分,治疗前后比较差异无显著性（Ｐ＞0.05）；仍存在膝关节不稳症状，KT-2000关节测量仪检测松弛度对比大于6 mm。结论：早期关节镜下应用双股半腱肌肌腱重建急性不全损伤的前交叉韧带可更好地恢复膝关节的稳定性，且创伤小，并发症少，近、远期疗效满意。

目的：探讨磁共振弥散张量成像(DTI)对判断胶质瘤良恶性和侵袭性的价值及胶质瘤与脑白质结构间关系，观察纤维束受损情况，为制定胶质瘤手术方案提供影像学依据。方法：31例不同级别胶质瘤（低级别胶质瘤15例，高级别胶质瘤16例）患者均行常规磁共振成像(MRI)和DTI检查，分别绘制FA图、DEC图并重建弥散张量纤维素成橡(DTT)图。选择肿瘤实质、瘤周水肿及水肿边缘作为感兴趣区，分别比较不同级别胶质瘤相应感兴趣区内的rFA值，并观察肿瘤周围白质纤维束的改变。结果：低级别胶质瘤与高级别胶质瘤的平均rFA值均表现出实质部分（低级别组0.428±0.078，高级别组0.366±0.055）、瘤周水肿（低级别组0.578±0.120，高级别组0.458±0.158）、水肿边缘（低级别组0.834±0.074，高级别组0.676±0.138）的顺序递增的趋势。高级别胶质瘤组实质部分、瘤周水肿和水肿边缘的rFA值均较低级别胶质瘤组明显降低（P<0.05）。在FA图中各级别胶质瘤表现为不同程度的低信号。DEC图中病变区颜色黯淡混杂、纤维束整体形态异常。在DTT图中低级别胶质瘤多数表现为纤维束部分中断（12/15），少数表现为受压、偏移（3/15）；高级别胶质瘤中，纤维束多呈现明显的变形移位，多数表现为纤维束明显中断、稀疏（13/16）；少数表现为纤维束全部或大部分中断（2/16）；1例主要表现为受压移位。结论： DTI能够在术前评价胶质瘤的恶性程度及瘤细胞侵袭性并能较全面地观察纤维束改变，可为胶质瘤手术方案的制定、判断手术效果及观察预后提供影像学依据。

目的：探讨椎管造影检查在不同腰椎管狭窄症定位诊断和手术方法选择中的作用，明确椎管造影检查在腰椎管狭窄症诊断及治疗中的价值。方法：行腰椎管造影检查的腰椎管狭窄症患者42例，比较椎管造影较其他影象学检查（CT,MRI）在定位诊断方面的优势。结果：7例患者可通过腰椎管造影检查解释临床症状与CT和MRI检查结果不相符情况；11例患者在CT和(或)MRI检查定位不明确时通过腰椎管造影检查能够明确定位；20例患者可于多节段腰椎管狭窄确定责任节段。4例患者仍需行间盘、神经根造影检查明确诊断。全部患者经手术证实诊断正确并可解释症状及体征。结论：在腰椎管狭窄症患者的诊断中，临床症状、体征与CT、MRI等检查结果不相符或CT、MRI无法准确定位时椎管造影检查可作为有效的诊断方法明确定位，并在多节段腰椎狭窄确定责任节段。

目的:探讨多层CT与超声影像检查对急性胰腺炎（包括急性胆源性胰腺炎）的诊断价值,为急性胰腺炎的影像学诊断提供依据。方法:多层CT及超声检查120例急性胰腺炎（包括急性胆源性胰腺炎85例）患者，对多层CT与超声影像检查诊断急性胰腺炎的阳性率进行分析比较。结果:超声影像检查对急性胰腺炎诊断的阳性率为57.5%，多层CT的阳性率为88.3%，二者比较差异有显著性(P<0.05）；超声影像检查对急性胆源性胰腺炎诊断的阳性率为88.2%，多层CT的阳性率为75.3%，二者比较差异有显著性（P<0.05）。结论:多层CT对急性胰腺炎的诊断有重要意义，而超声影像检查对急性胆源性胰腺炎的诊断价值优于多层CT。

目的:对吉林西部草原小尾寒羊肉进行评定分析，为吉林省西部草原小尾寒羊的开发和利用提供科学依据。方法：吉林省西部草原有4种草场类型：平原草甸草原草场类Ⅰ(1)型（羊草型）、平原草甸草原草场类Ⅰ(2)型（羊草+杂草型）、平原草甸草原草场类Ⅱ型和丘陵台地干草原草场类Ⅲ型。每种类型草场各采3只羊，共12只，取其背长肌、前肢臂三头肌和后肢股二头肌作为样品，检测样品肉中水分、灰分、蛋白质、脂肪、矿物元素及重金属含量。结果：吉林省西部草原4种草场类型小尾寒羊样品肉中蛋白质平均含量为（19.14±0.88）%；脂肪平均含量为(2.06±0.30)% ，四种草场类型样品肉常规营养成分含量差异无显著性（P>0.05）；样品肉中矿物质元素含量丰富，四种草原类型间钾、镁、铁、镍、钼、锰和铬的含量差异无显著性（P>0.05），钙、钠、磷、钴、铜、锌、硒、碘和硼的含量差异有显著性（P<0.05）；样品肉中重金属镉、砷、汞的含量符合无公害畜禽肉食品卫生国家标准；结论：吉林省西部草原小尾寒羊羊肉营养成分全面，能够提供丰富的优良蛋白质和矿物质，脂肪含量适中，食用安全。

目的：改进小鼠腹腔异位心脏移植模型，探索简捷的手术方法。方法：借鉴大鼠腹腔心脏移植Ono术式，将C57BL/6雄性小鼠80只随机分为供体、受体，20对小鼠（供体、受体各20只）采用传统Ono术式（对照组），20对小鼠（供体、受体各20只）采用改进术式（实验组）。结果：实验组总手术时间［(109.0±10.5)min］低于对照组［(122.0±13.6) min］（P<0.05），其中实验组供心血管吻合时间 ［(21.7±3.1) min］低于对照组［(36.7±7.6) min］（P<0.05），[JP3]实验组供心冷缺血时间［ (29.5±3.5) min］低于对照组［（37.1±6.9) min］（P<0.05）；实验组供心热缺血时间 ［(1.0±0.3) min］与对照组［(0.9±0.2) min］比较差异无显著性（P>0.05）。实验组心脏移植成功17例，失败3例，成功率为85％；对照组心脏移植成功11例，失败9例，成功率为55％，两组成功率比较差异有显著性（P>0.05）；实验组移植心脏存活时间［（25.67±5.47）d］高于对照组［（8.50±1.52）d］（P<0.05）。结论：改进的小鼠腹腔异位心脏移植模型制作技术具有所需手术时间短、造模成功率高及模型小鼠存活时间长的优点。

分化型甲状腺癌（DTC）术后残留甲状腺组织主要应用radioiodine-131(¹³¹I)去除，去除成功后既可彻底消除DTC术后的隐匿病灶，又可通过检测血清甲状腺球蛋白（Tg）的变化来监测有无复发和转移，便于随访。首次去除的成功率受多个因素的影响，其中最为关键的是¹³¹I剂量，通过优化剂量，使患者首次去除效果最大化，并避免可能带来的副作用。本文针对目前应用的几种DTC术后残留甲状腺组织¹³¹I去除剂量研究进展进行综述。