整合素连接激酶相关磷酸酶（ILKAP）抗体的制备及其特异性分析

J4 ›› 2012, Vol. 50 ›› Issue (02): 356-360.

整合素连接激酶相关磷酸酶（ILKAP）抗体的制备及其特异性分析

张应玖¹, 亓晓艳¹, 周旺¹, 郑宇¹, 韩树海²

1. 吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室, 长春 130012;2. 吉林大学白求恩第一医院麻醉科, |130021

收稿日期:2011-11-03 出版日期:2012-03-26 发布日期:2012-03-21
通讯作者: 韩树海 E-mail:zyjiujiu@yahoo.com.cn

Preparation and Specificity of AntiILKAP Antibody

ZHANG Yingjiu¹, QI Xiaoyan¹, ZHOU Wang¹, ZHENG Yu¹, HAN Shu hai²

1. Key Laboratory of Molecular Enzymology and Engineering of Ministry of Education, Jilin University,Changchun 130012, China|2. Department of Anesthesiology, First Hospital, Jilin University, Changchun 130021, China

Received:2011-11-03 Online:2012-03-26 Published:2012-03-21
Contact: HAN Shu hai E-mail:zyjiujiu@yahoo.com.cn

摘要/Abstract

摘要：

以整合素连接激酶相关磷酸酶（ILKAP）全蛋白为抗原, 采用腿部肌肉注射和耳缘静脉注射相结合的方法对新西兰大白兔进行免疫, 共免疫6次, 最
终获得ILKAP抗血清. 采用Protein A agrose柱纯化抗体, 获得ILKAP的多克隆抗体. 免疫印迹分析表明, 所获得的ILKAP多克隆抗体具有较高的特异性, 间接ELISA方法测定ILKAP多克隆抗体的滴度为1 ∶1 600. 免疫荧光分析表明, 所获得的ILKAP多克隆抗体在细胞水平应用效果较好.

Abstract:

Two rabbits were immunized six times with the whole integrinlinked kinaseassociated phosphatase (ILKAP) protein as antigen by intramuscular and intravenous injections, and the antiserum against ILKAP was obtained. Then, antiILKAP polyclonal antibody was prepared via Protein A agrose column. Western blot analysis shows that the antiILKAP polyclonal antibody had higher specificity, and the antibody titer came to 1 ∶1 600 via indirect enzymelinked immunosorbent assay (indirect ELISA). Immunofluorescence analysis demonstrates that the prepared ILKAP polyclonal antibody had a good application in cell researches.

Key words: integrinlinked kinaseassociated phosphatase (ILKAP), antiserum, antibody, titer, specificity

中图分类号:

Q556

张应玖, 亓晓艳, 周旺, 郑宇, 韩树海. 整合素连接激酶相关磷酸酶（ILKAP）抗体的制备及其特异性分析[J]. J4, 2012, 50(02): 356-360.

ZHANG Ying-Jiu, QI Xiao-Yan, ZHOU Wang, ZHENG Yu, HAN Shu-Hai. Preparation and Specificity of AntiILKAP Antibody[J]. J4, 2012, 50(02): 356-360.

[1]	陈文龙, 张阳阳, 张生英, 邢小勇, 胡永浩. 牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的克隆、表达及多克隆抗体制备[J]. 吉林大学学报(理学版), 2020, 58(3): 711-717.
[2]	董雪, 徐雨昕, 郭晶, 龚忠阔, 夏霖亚, 殷玉和, 吴丛梅. 重组人源抗血管内皮生长因子单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 吉林大学学报(理学版), 2019, 57(06): 1538-1543.
[3]	史晶莹, 郭晶, 李雪, 董雪, 孙博, 吴丛梅, 殷玉和. 抗人PD-L1单克隆抗体的瞬转表达[J]. 吉林大学学报(理学版), 2018, 56(4): 1024-1028.
[4]	姜涛, 吴丛梅, 刘新涛, 金浩, 殷玉和. 轮状病毒间接免疫荧光的检测方法[J]. 吉林大学学报(理学版), 2016, 54(04): 919-923.
[5]	赵天倚, 陈韵, 尹艳春, 邢述, 付学奇. JAK2基因单倍型46/1对中国人群骨髓增殖性肿瘤易感性的影响[J]. 吉林大学学报(理学版), 2016, 54(02): 396-400.
[6]	罗速, 张逢春, 刘成柏, 项小丰. 肿瘤标志物联合检测在原发性肝细胞癌早期诊断中的应用[J]. J4, 2004, 42(04): 625-627.
[7]	李维佳，魏景艳，孙晔，牟颖，吕绍武，闫岗林，罗贵民. 具有GPX活性单链抗体的制备及其抗氧化效应[J]. J4, 2004, 42(03): 458-462.
[8]	张应玖, 金宁一, 王宏伟, 黄薇 , 张东威, 沈家骢. 用杆状病毒表达系统表达的HIV-2 gp105和gp36的反应原性与抗原特异性分析[J]. J4, 2002, 40(01): 105-107.