吉林大学学报(医学版) 2006, 32(4) 543-546 DOI: 国家自然科学基金资助课题(30500142);教    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R

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基础研究
p53基因突变子175 H、248 W和273 H的定点突变及表达载体的构建
刘 扬,赵银龙,刘晓冬*,马淑梅,龚守良,刘树铮
吉林大学公共卫生学院 卫生部放射生物学重点实验室,吉林 长春130021
摘要:目的:定点诱变合成p53基因突变子进而构建表达载体。 方法:以野生型p53基因为模板,采用PCR体外定点突变技术,设计2对引物,将突变位点设 计在引物上,通过重叠延伸法2次PCR扩增,扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩 增片段克隆入pcDNA3.1载体中。 结果:在预期位点已经发生突变,p53基因第175位密码子由精氨酸(cgc)突变为组氨酸(cac),第248位密码子由精氨酸(cgg)突变为色氨酸(tgg),第273位密码子由精氨酸(cgt)突变为组氨酸(cat)。p53基因突变子表达载体成功构建。 结论:PCR技术诱导定点突变准确、高效。基因突变体的成功构建,为进一步研究该突变位 点奠定了基础。
关键词: p53 突变子 定点突变 遗传载体 聚合酶链反应 方法
收稿日期  2005-11-22   修回日期  1900-01-01   网络版发布日期  2006-07-28  
DOI: 国家自然科学基金资助课题(30500142);教
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通讯作者: 刘晓冬
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