吉林大学学报(医学版) 2018, 44(04) 753-758 DOI: 10.13481/j.1671-587x.20180411    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R

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基础研究
RNAi沉默survivin和HIF-1α基因对胃癌BGC-823细胞体外增殖和凋亡的影响
王淼1, 母润红2, 李明成1, 李洪杰2
1. 北华大学医学检验学院免疫教研室, 吉林 吉林 132013;
2. 北华大学基础医学院免疫教研室, 吉林 吉林 132013
摘要:目的:应用RNA干扰(RNAi)技术抑制胃癌BGC-823细胞中survivin和HIF-1α基因的表达,探讨其对胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡的影响。方法:分别设计并合成经过化学修饰的靶向survivin和HIF1α mRNA的小干扰RNA (siRNAs),同时合成错义RNA (SCR),采用HifectinⅡ真核体外转染胃癌BGC-823细胞,将转染siRNA-survivin、siRNA-HIF-1α和SCR的各组细胞分别命名为sis组、siH组和SCR组,同时设空白对照组(无血清培养基),RT-PCR法检测各组细胞中survivin和HIF-1αmRNA表达水平。将胃癌BGC-823细胞分为单干扰组(survivin-siRNA,sis组)、联合干扰组(survivin-siRNA+HIF1α-siRNA,sis+siH组)、非靶向特异性组(SCR组)和空白对照组(无血清培养基),MTT法检测各组细胞增殖活性,Western blotting法检测各组细胞中survivin和HIF-1α蛋白表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果:与空白对照组比较,sis组细胞中survivin mRNA表达水平和siH组细胞中HIF-1αmRNA表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。与空白对照组比较,SCR组细胞增殖活性无明显变化(P>0.05),sis组和sis+siH组细胞增殖活性明显降低(P<0.05);与sis组比较,sis+siH组细胞增殖活性明显降低(P<0.05)。与空白对照组比较,sis+siH组细胞中surviving和HIF-1α蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。结论:联合靶向沉默survivin和HIF-1α基因可下调靶基因的表达,抑制胃癌BGC-823细胞增殖,促进细胞凋亡,RNAi基因沉默技术有望成为治疗胃癌的新方法。
关键词: 小干扰RNA 缺氧诱导因子1α 人胃癌BGC-823细胞 细胞增殖 survivin 细胞凋亡
收稿日期  2017-11-19   修回日期    网络版发布日期  2018-07-27  
DOI: 10.13481/j.1671-587x.20180411
基金项目: 吉林省教育厅科研基金资助课题(2014第202);吉林省吉林市科技局科研基金资助课题(201339052)
通讯作者: 母润红,副教授,硕士研究生导师(Tel:0432-64608107,E-mial:murunhong@126.com)
作者简介: 王淼(1976-),女,吉林省吉林市人,副教授,医学硕士,主要从事肿瘤分子生物学方面的研究。

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