吉林大学学报(医学版) 2019, 45(06) 1267-1274 DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190613 ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R | ||
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基础研究 | ||
血栓性疾病个体化用药指导基因芯片试剂盒的制备和效果评价 | ||
袁语泽1, 马明星2, 王国强1, 关雪娃1, 王紫嫣1, 郭英俏3, 郑敬彤1, 章宏4, 陈光5, 王放1 | ||
1. 吉林大学基础医学院病原生物学教研室, 吉林 长春 130021; 2. 吉林寰基生物科技有限公司, 吉林 长春 130012; 3. 吉林大学基础医学院遗传学教研室, 吉林 长春 130021; 4. 吉林大学基础医学院生理学教研室, 吉林 长春 130021; 5. 吉林大学第一医院血管外科, 吉林 长春 130021 |
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摘要:目的:探讨血栓性疾病(TD)个体化用药指导基因芯片的制备过程,阐明一种快速、高通量检测氯吡格雷和华法林药物代谢基因的方法。方法:根据氯吡格雷药物代谢基因位点(CYP3A4、CYP2C19*17、CYP2C19*2和CYP2C19*3)和华法林药物代谢基因位点(CYP4F2*3、GGCX、VKORC1-2、VKORC1-1、CYP2C9*2和CYP2C9*3)设计相应的探针和引物,制备TD个体化用药指导的基因芯片检测试剂盒。经过DNA提取、PCR扩增、杂交、洗脱和扫描等步骤对基因芯片的灵敏性、重复性和稳定性进行评价。收集3个地区的150例TD受试者样本并进行药物代谢基因检测,以受试者在临床中接受的用药指导及6个月后患者的疾病恢复情况为依据,评价基因芯片试剂盒的有效率。结果:基因芯片检测2种药物的代谢基因均出现良好的杂交信号;芯片检测PCR扩增产物的最低检测浓度为103 copies·mL-1;对不同批次的3张芯片及同一批次的10张芯片进行平行测定,符合率为100%;芯片具有稳定性,有效期长达6个月;来源于3个地区的150例TD样本验证基因芯片检测试剂盒的有效率在90%以上。结论:成功制备了高通量检测氯吡格雷和华法林药物代谢基因的TD个体化用药指导基因芯片试剂盒,该方法灵敏度高,重复性好,稳定性强,制备效果优良。 | ||
关键词: 血栓性疾病 基因芯片 氯吡格雷 华法林 | ||
收稿日期 2019-02-18 修回日期 网络版发布日期 2019-12-05 | ||
DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190613 | ||
基金项目: 吉林省发改委产业创新专项资金项目资助课题(2016C050-3);吉林省科技厅中药办科技成果转化计划项目资助课题(20170311040YY);吉林省发改委产业技术研究与开发项目资助课题(2017c058-1) | ||
通讯作者: 王放,教授,博士研究生导师(Tel:0431-85619509,E-mail:wf@jlu.edu.cn) | ||
作者简介: 袁语泽(1994-),女,吉林省吉林市人,在读医学博士,主要从事血栓性疾病早期诊断和机制方面的研究。 | ||
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