吉林大学学报(医学版) 2020, 46(03) 470-475 DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200307    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R
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基础研究
癫痫持续状态后小鼠海马组织神经元中微管蛋白和内体-溶酶体系统表达的变化及其意义
陈玲萌1,2, 孟祥玥1, 张艳3, 桂玥1, 吴霜1, 李艳超1, 谭百宏4
1. 吉林大学基础医学院组织学与胚胎学教研室, 吉林 长春 130021;
2. 吉林医药学院基础医学院人体解剖教研室, 吉林吉林 132013;
3. 吉林大学基础医学院实验教学中心, 吉林 长春 130021;
4. 吉林大学生命科学公共技术中心, 吉林 长春 130021
摘要：目的：探讨癫痫持续状态（SE）后小鼠海马组织神经元中微管蛋白β-tubulin和内体-溶酶体系统表达的变化，阐明神经元迟发性死亡过程中微管和内体-溶酶体系统的变化规律。方法：40只雄性ICR小鼠分为对照组（n=7，给予生理盐水）和实验组（n=33，给予匹鲁卡品），实验组中达到SE标准的SE小鼠根据SE后时间分为SE1d、SE2d、SE3d和SE7d组（n=5）。Nissl和Fluoro-Jade B （F-JB）染色检测各组小鼠海马组织神经元损伤情况，免疫荧光法检测各组小鼠海马组织神经元中微管蛋白β-tubulin、内体蛋白Rab5和溶酶体结构蛋白LAMP1表达强度及β-tubulin、Rab5和LAMP1阳性面积百分比；双重荧光法检测各组小鼠海马组织CA1区β-tubulin与Rab5和LAMP1表达的关系。结果：与对照组比较，SE1d组小鼠海马CA1和CA3区神经元数减少（P<0.01），F-JB阳性细胞数增加（P<0.01）；SE2d、SE3d和SE7d组小鼠海马组织中Nissl阳性神经元数明显减少（P<0.01）。与对照组比较，SE2d、SE3d和SE7d组小鼠海马组织中F-JB阳性神经元数增加（P<0.01）。与对照组比较，SE2d、SE3d和SE7d组小鼠海马CA1和CA3区神经元树突中β-tubulin阳性面积百分比明显降低（P<0.05），其变化趋势与神经元损伤相似。与对照组比较，SE1d、SE 2d、SE 3d和SE 7d组小鼠海马组织神经元中Rab5和LAMP1表达强度随着时间延长呈下降趋势；Rab5阳性面积百分比明显降低（P<0.05或P<0.01）；LAMP1阳性面积百分比在SE后第1天出现一过性增多，之后逐渐减少（P<0.05或P<0.01）。双重荧光染色检测，SE后1 d是早期内体减少和溶酶体一过性增多的关键点，并与神经元微管损伤的出现时间极为一致。结论：SE引起神经元迟发性死亡的同时神经元微管骨架受损，内体-溶酶体系统的定位和功能也发生异常改变。
关键词： 癫痫持续状态 神经元 微管蛋白 内体-溶酶体系统 神经元迟发性死亡
收稿日期  2019-10-15   修回日期    网络版发布日期  2020-06-11  
DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200307
基金项目: 国家自然科学基金资助课题（81871014）
通讯作者: 谭百宏,工程师(Tel:0431-85619477,E-mail:tanbaihong@jlu.edu.cn);李艳超,教授,博士研究生导师(Tel:0431-85619477,E-mail:liyanchao@jlu.edu.cn)
作者简介: 陈玲萌(1993-),女,吉林省德惠市人,助理实验师,医学硕士,主要从事神经元死亡机制方面的研究。
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