吉林大学学报(医学版) 2020, 46(03) 482-491 DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200309    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R
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	基础研究
	microRNA-9-5p靶向MEF2C对腺泡状横纹肌肉瘤细胞生物学行为的影响
	商浩1,2, 李春森1, 李锋1,3, 刘春霞1
	1. 石河子大学医学院病理学系, 新疆石河子 832002; 2. 浙江省立同德医院司法鉴定所, 浙江 杭州 310012; 3. 首都医科大学附属北京朝阳医院病理科, 北京 100020
	摘要：目的：探讨microRNA-9-5p （miR-9-5p）靶向肌细胞增强因子2C （MEF2C）对腺泡状横纹肌肉瘤（ARMS）细胞生物学行为的影响，为ARMS的分子诊断和靶向治疗提供依据。方法：qRT-PCR法检测ARMS组织和细胞中miR-9-5p和MEF2CmRNA表达水平，CCK-8法检测细胞增殖率，流式细胞术检测细胞凋亡率，Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移能力，双荧光素酶报告基因检测293T细胞中荧光素酶活性，Western blotting法检测细胞中MEF2C蛋白表达水平。结果：ARMS组织和细胞中miR-9-5p表达水平高于正常骨骼肌组织和HSKMC细胞（P<0.05）。与miR-NC组比较，miR-9-5p抑制剂组RH30细胞中miR-9-5p表达水平降低（P<0.01），细胞增殖率降低（P<0.05），细胞凋亡率升高（P<0.05），细胞侵袭和迁移数降低（P<0.05）。加入miR-9-5p后，共转染MEF2C-3'-UTR-WT的293T细胞中荧光素酶活性降低（P<0.01）；与miR-NC组比较，miR-9-5p抑制剂组RH30细胞中MEF2C mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05）。ARMS组织中MEF2C mRNA表达水平低于正常骨骼肌组织（P<0.01），且与ARMS组织中miR-9-5p表达呈负相关关系（r=-0.542，P<0.05）；RH30细胞和PLA802细胞中MEF2CmRNA表达水平低于HSKMC细胞（P<0.01）。与转染对照质粒（EV）比较，转染MEF2C过表达质粒后RH30细胞中MEF2C mRNA表达水平升高（P<0.01），细胞增殖率降低（P<0.01），细胞凋亡率升高（P<0.05），细胞侵袭数降低（P<0.05），细胞迁移数降低（P<0.01）。与转染si-NC比较，转染MEF2CsiRNA后RH30细胞中MEF2C mRNA表达水平降低（P<0.05），细胞增殖率升高（P<0.05），细胞凋亡率降低（P<0.05），细胞侵袭数升高（P<0.01），细胞迁移数升高（P<0.01）。结论：miR-9-5p通过直接靶向MEF2C mRNA的3'-UTR诱导mRNA降解而抑制MEF2C表达，从而促进RH30细胞的增殖、侵袭、迁移以及抗凋亡能力。
	关键词： 腺泡状横纹肌肉瘤 miR-9-5p 肌细胞增强因子2C 细胞增殖 细胞凋亡
	收稿日期  2019-07-17   修回日期    网络版发布日期  2020-06-11
	DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200309
	基金项目: 国家自然科学基金资助课题（81660441，81460404）
	通讯作者: 李锋,教授,博士研究生导师(Tel:0993-2850955,E-mail:lifeng7855@126.com);刘春霞,教授,硕士研究生导师(Tel:0993-2850955,E-mail:liuliu2239@sina.com)
	作者简介: 商浩(1990-),男,河北省秦皇岛市人,在读医学硕士,主要从事法医病理学方面的研究。
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