吉林大学学报(医学版) 2021, 47(3) 652-659 DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210315    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R

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基础研究
MCM10沉默对乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用及其机制
巩培1,刘竟然1,赵世敏1,王玉珍1,谢基明2()
1.内蒙古农业大学生命科学学院生物制药工程系,内蒙古 呼和浩特 010108
2.内蒙古自治区人民 医院检验科,内蒙古 呼和浩特 010020
摘要目的

探讨微小染色体维持蛋白10 (MCM10)基因沉默对乳腺癌细胞的增殖抑制作用,并阐明其作用机制。

方法

将人三阴性乳腺癌(TNBC)MDA-MB-231细胞分为对照组、MCM10干扰组1(shMCM10-1组)和MCM10干扰组2(shMCM10-2组)。构建MCM10慢病毒干扰载体MCM10-1和MCM10-2,分别感染shMCM10-1组和shMCM10-2组MDA-MB-231细胞,对照组MDA-MB-231细胞感染阴性对照病毒。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测各组MDA-MB-231细胞中MCM10 mRNA和蛋白表达水平,Cellomics计数法检测各组MDA-MB-231细胞的增殖率,流式细胞术检测各组MDA-MB-231细胞凋亡率,采用Caspase3/7活性检测试剂盒检测各组MDA-MB-231细胞中Caspase3/7活性。

结果

与对照组比较,shMCM10-1组和shMCM10-2组MDA-MB-231细胞中MCM10 mRNA表达率明显降低(P<0.01),未检测到MCM10蛋白表达;与对照组比较,shMCM10-1组和shMCM10-2组MDA-MB-231细胞相对增殖倍数明显降低(P<0.01),MDA-MB-231细胞凋亡率明显升高(P<0.01),MDA-MB-231细胞中Caspase3/7 活性明显升高(P<0.01)。

结论

MCM10基因沉默可以抑制MDA-MB-231细胞增殖,促进细胞凋亡,增加细胞中Caspase3/7 活性。

关键词: 微小染色体维持蛋白10 慢病毒载体 乳腺肿瘤 MDA-MB-23细胞 细胞凋亡
收稿日期  2020-10-06   修回日期    网络版发布日期  2021-05-28  
DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210315
基金项目: 国家自然科学基金项目(81360394);内蒙古自治区高等学校科学技术研究项目(NJZY21472)
通讯作者: 谢基明
作者简介: 巩 培(1982-),男,内蒙古自治区呼和浩特市人,讲师,在读医学博士,主要从事小分子药物开发方面的研究。

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