合成一种光反应性聚氨酯（PU）凝胶预聚物IBGBMA，并探讨其对传统树脂基质体积收缩和机械性能的影响。

通过溶液法，以异氟尔酮二异氰酸酯、双酚-A和甲基丙烯酸羟乙酯等为原料，以1，4-丁二醇和三羟基甲基丙烷为扩链剂和交联剂合成一种光反应性PU凝胶预聚物IBGBMA，实现其与光固化树脂基质的化学结合，通过傅里叶变换红外光谱仪（FT-IR）对其结构进行表征。以不添加IBGBMA的Bis-GMA/TEGDMA（7∶3）传统树脂基质制备的试件为对照组，以添加5%、10%、15%和20%IBGBMA的传统树脂基质制备的试件为实验组。通过密度瓶法检测各组树脂基质固化后的体积收缩率，万能试验机检测各组试件挠曲强度（FS）和弹性模量（EM），维氏硬度仪检测各组试件维氏硬度，FT-IR峰面积法检测各组树脂基质双键转化率。

FT-IR检测出终产物碳碳（C=C）双键（1 638 cm^－1）和氨基甲酸酯基团（－NHCOO－）（3 310 cm^－1）特征性吸收峰，表明合成了具有反应性的目标产物IBGBMA，光固化时可与树脂基质发生聚合反应。随着IBGBMA添加量的增加，各实验组树脂基质固化后体积收缩率逐渐降低，且均低于对照组（P<0.05）。与对照组比较，20%IBGBMA实验组试件FS和EM明显降低（P<0.05），其余各组间比较差异均无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较，15%和20%IBGBMA实验组试件维氏硬度明显增加（P<0.05）。各实验组树脂基质双键转化率随IBGBMA添加量的增加而降低，15%和20%IBGBMA实验组树脂基质双键转化率低于对照组（P<0.05）。

成功合成了可光固化的反应性聚氨酯凝胶预聚物，其中添加了15%IBGBMA的实验组树脂基质固化后所制备的试件体积收缩率明显降低，维氏硬度增强，而FS和EM不受影响，其综合性能得到改善。

探讨解毒通络方在大鼠心肌纤维化进程中的作用，并阐明其作用机制。

30只SPF级Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、卡托普利组、低剂量解毒通络方组和高剂量解毒通络方组（n=6），以5 mg·kg^－1盐酸异丙肾上腺素皮下注射法复制大鼠心肌纤维化模型，卡托普利组、低剂量解毒通络方组和高剂量解毒通络方组大鼠分别用0.005 g·kg ^－1·d ^－1卡托普利和1、5 g·kg^－1·d ^－1解毒通络方灌胃28 d，对照组和模型组大鼠灌胃给予等体积蒸馏水，苏木素-伊红（HE）和Masson三色染色观察大鼠心肌组织病理形态表现并计算胶原纤维面积百分率，碱水解法检测大鼠心肌组织中羟脯氨酸水平，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠心肌组织中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平，免疫组织化学法检测转化生长因子β1（TGF-β1）和LIM激酶（LIMK）蛋白表达水平，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测大鼠心肌组织中Smad2、Smad3和Rho相关蛋白激酶（ROCK） mRNA表达水平，Western blotting法检测大鼠心肌组织中磷酸化Smad2/3（p-Smad2/3）和ROCK蛋白表达水平。

注射异丙肾上腺素28 d后，大鼠心肌组织呈典型纤维化改变，与正常对照组比较，模型组大鼠心肌组织中胶原纤维面积百分率及羟脯氨酸和Ang Ⅱ水平明显升高（P<0.05），TGF-β1和LIMK蛋白表达水平明显升高（P<0.05），Smad2、Smad3和ROCK mRNA表达水平明显升高（P<0.05），p-Smad2/3和ROCK 蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与模型组比较，卡托普利组、低剂量解毒通络方组和高剂量解毒通络方组大鼠心肌组织中胶原纤维面积百分率及羟脯氨酸和Ang Ⅱ水平明显降低（P<0.05），TGF-β1和LIMK蛋白表达水平明显降低（P<0.05），Smad2、Smad3和ROCK mRNA表达水平明显降低（P<0.05），p-Smad2/3和ROCK蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与卡托普利组比较，不同剂量解毒通络方组大鼠上述指标差异均无统计学意义（P>0.05）。

解毒通络方可通过抑制TGF-β1/Smad和ROCK通路延缓大鼠心肌纤维化进程。

观察血管紧张素（1-7）［Ang-（1-7））］预处理肢体缺血再灌注（LIR）小鼠肾组织和血清中Ang-（1-7）水平及肾组织中核因子κB（NF-κB）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）及Mas受体蛋白表达水平和分布，探讨Ang-（1-7）对LIR小鼠肾损伤的影响及其炎症机制。

30只10周龄C57BL/6小鼠随机分为对照组、LIR组和LIR+Ang-（1-7）组，每组10只。采用双后肢止血带套扎阻断血流2 h、再灌注4 h复制小鼠LIR模型。LIR+Ang-（1-7）组小鼠于造模前14 d埋置渗透泵皮下给予Ang-（1-7）（24 μg·kg^－1·h^－1），LIR组小鼠于造模前14 d埋置渗透泵皮下给予等量生理盐水。采用全自动生化分析仪检测小鼠血清中血肌酐（SCr）和尿素氮（BUN）水平，采用HE染色观察小鼠肾组织病理形态表现并进行肾组织病理损伤评分，采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠肾组织和血清中Ang-（1-7）水平，免疫组织化学染色法和Western blotting法检测小鼠肾组织中NF-κB、TNF-α和Mas受体蛋白表达分布情况和表达水平。

与对照组比较， LIR组小鼠血清中SCr和BUN水平明显升高（P<0.05），肾组织有明显充血、肾小管扩张、水肿、坏死和炎细胞浸润等病理损害，肾组织病理损伤评分明显升高（P<0.05），肾组织和血清中Ang-（1-7）水平明显降低（P<0.05），肾组织中NF-κB、TNF-α和Mas受体蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与LIR组比较，LIR+Ang-（1-7）组小鼠血清中SCr和BUN水平明显降低（P<0.05），肾组织充血等病理损害明显减轻，肾组织病理损伤评分明显降低（P<0.05），肾组织及血清中Ang-（1-7）水平明显升高（P<0.05），肾组织中NF-κB和TNF-α蛋白表达水平明显降低（P<0.05），Mas受体蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。

小鼠LIR可诱导远端肾脏损伤，Ang-（1-7）可能通过降低肾组织中NF-κB和TNF-α蛋白表达水平进而对小鼠LIR所致肾损伤起到改善作用。

观察腹部推拿对慢性应激所致慢性疲劳综合征（CFS）模型大鼠海马-下丘脑-垂体-肾上腺（海马-HPA）轴的影响，探讨其对海马神经的重塑作用机制。

选取成年健康Wistar雌性大鼠60只，分为正常组、模型组和实验组，每组20只，模型组和实验组大鼠采用复合应激方法复制CFS模型，实验组大鼠模型制作成功后进行腹部推拿干预，正常组大鼠不予以任何处理。采用行为学效应指标验证模型，电镜观察大鼠海马神经元超微形态表现，免疫组织化学法检测大鼠海马组织中FK506结合蛋白（FKBPs）、糖皮质激素受体（GR）和N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）阳性表达率，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清中促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（CORT）、促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）和糖皮质激素（GC）水平。

大鼠行为学效应指标检测，与正常组比较，模型组和干预前实验组大鼠悬挂不动时间明显延长（P<0.05），力竭游泳时间明显缩短（P<0.05），水平运动速度明显降低（P<0.05）；与模型组比较，干预后实验组大鼠悬挂不动时间明显缩短（P<0.05），力竭游泳时间明显延长（P<0.05），水平运动速度明显增加（P<0.05）。电镜下观察，与正常组比较，模型组大鼠海马神经元胞体缩小，部分神经元胞膜内陷，有凋亡小体形成；与模型组比较，实验组大鼠海马神经元病变明显减轻。与正常组比较，模型组大鼠海马组织中FKBPs、GR和NMDAR阳性表达率明显降低（P<0.05）；与模型组比较，实验组大鼠海马组织中FKBPs、GR和NMDAR阳性表达率明显升高（P<0.05）。与正常组比较，模型组大鼠血清中ACTH、CORT、CRH和GC水平明显升高（P<0.05）；与模型组比较，实验组大鼠血清中ACTH、CORT、CRH和GC水平明显降低（P<0.05）。

腹部推拿疗法可以促进慢性应激反应所致的损伤性海马神经重塑，降低ACTH、CORT和CRH激素水平，通过FKBPs-GR-NMDAR通路维持海马-HPA轴负反馈平衡。

探讨天冬酰胺合成酶（ASNS）在移植黑色素瘤模型淀粉样蛋白前体蛋白/早老素1（APP/PS1）小鼠骨骼肌减少中的作用，并阐明其作用机制。

C57BL/6J（C57）小鼠和APP/PS1小鼠分别移植黑色素瘤B16细胞（C57移植瘤组和APP/PS1移植瘤组），同时设C57对照组和APP/PS1对照组，每组7只。取小鼠腓肠肌组织，分析天平称量小鼠腓肠肌质量，计算小鼠腓肠肌质量与体质量比值即肌肉减少症指数（SI），采用HE染色观察小鼠腓肠肌组织形态表现，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测小鼠腓肠肌组织中肌肉组织特异萎缩相关基因E3 泛素连接酶1（Atrogin-1）、肌肉环指蛋白1（MuRF1）和ASNS mRNA表达水平， Western blotting法检测小鼠腓肠肌组织中ASNS及内质网应激途径相关蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、活化转录因子4（ATF4）、真核细胞起始因子2α（eIF2α）和磷酸化eIF2α（p-eIF2α）蛋白表达水平。

与C57对照组比较，C57移植瘤组小鼠腓肠肌SI降低（P<0.05），腓肠肌细胞呈玻璃样变性，肌浆蓝染，部分细胞核可见核内移现象，小鼠腓肠肌组织中Atrogin-1、MuRF1和ASNS mRNA表达水平升高（P<0.05），ASNS蛋白表达水平升高（P<0.05），GRP78、ATF4蛋白表达水平和p-eIF2α/eIF2α蛋白表达水平比值明显升高（P<0.05）；与APP/PS1对照组比较，APP/PS1移植瘤组小鼠腓肠肌SI降低（P<0.05），腓肠肌部分肌纤维肿胀，部分肌纤维变细，细胞核内移现象多见，肌浆颜色以红色为主，腓肠肌组织中Atrogin-1、MuRF1和ASNS mRNA表达水平升高（P<0.05），ASNS蛋白表达水平升高（P<0.05），GRP78、ATF4蛋白表达水平和p-eIF2α/eIF2α蛋白表达水平比值明显升高（P<0.05）；与C57移植瘤组比较，APP/PS1移植瘤组小鼠腓肠肌SI降低（P<0.05），腓肠肌组织中Atrogin-1 mRNA表达水平升高（P<0.05），ASNS mRNA水平降低（P<0.05），ASNS蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05），GRP78和ATF4蛋白表达水平及p-eIF2α/eIF2α蛋白表达水平比值明显降低（P<0.05）。

APP/PS1移植黑色素瘤模型小鼠腓肠肌更易发生肌肉减少，其机制可能与适应性反应ASNS转录水平降低有关，内质网应激PERK-eIF2a-ATF4信号途径可能参与调控ASNS转录活性。

探讨雌二醇联合1，25-二羟维生素D3［1，25（OH）₂D₃］对绝经后骨质疏松症（PMOP）大鼠的治疗作用，并阐明其作用机制。

40只雌性SD大鼠随机分为对照组、骨质疏松症模型组（模型组）、卵巢去势后雌二醇干预组（雌二醇组）和卵巢去势后雌二醇联合1，25（OH）₂D₃组［雌二醇联合1，25（OH）₂D₃组］，每组10只，连续喂养24周后取大鼠血清，采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组大鼠血清中成骨标志物碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OC）、骨保护素（OPG）、Ⅰ型前胶原氨基端原肽（PINP）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）和骨吸收标志物核因子κB受体活化因子配体（RANKL）水平。取大鼠双侧股骨，采用HE和TRAP染色观察大鼠骨组织形态表现，采用骨密度仪和力学生物仪检测各组大鼠股骨骨密度（BMD）和骨组织弹性模量、刚度、最大应力及最大承受力。取大鼠双侧胫骨，采用逆转录PCR（RT-PCR）法和Western blotting法检测各组大鼠骨组织中ALP、OC、OPG及RANKL mRNA和蛋白表达水平。

与对照组比较，模型组大鼠血清中ALP、OC、OPG、PINP、TRACP和RANKL水平明显升高（P<0.01）；大鼠骨膜厚度明显增加，破骨细胞数量增多且骨外膜下可见少许点状虫蚀状缺损，呈现典型骨质疏松特点；大鼠股骨BMD和生物力学指标明显降低（P<0.01），骨组织中ALP、OC、OPG及RANKL mRNA和蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）。与模型组比较，雌二醇联合1，25（OH）₂D₃组大鼠血清中ALP、PINP、TRACP和RANKL水平明显降低（P<0.01），OPG/RANKL比值明显升高（P<0.01）；骨膜内成骨细胞增生活跃，且骨膜下无虫蚀状缺损；大鼠股骨BMD和生物力学指标明显升高（P<0.01），骨组织中ALP、OC及RANKL mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。与雌二醇组比较，雌二醇联合1，25（OH）₂D₃组大鼠血清中OC和OPG水平及OPG/RANKL比值明显升高（P<0.01），TRACP和RANKL水平明显降低（P<0.01），大鼠股骨BMD和生物力学指标中弹性模量及最大应力明显升高（P<0.01），骨组织中OPG mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01），RANKL　mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。

雌二醇联合1，25（OH）₂D₃能更有效地促进大鼠成骨细胞的增殖和分化，二者联合应用可在治疗PMOP的同时降低过量激素替代导致的不良反应发生率。

探讨独参汤（DST）对D-半乳糖（D-gal）诱导的衰老模型大鼠神经元损伤、脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）的活性、丙二醛（MDA）和环磷酸腺苷（cAMP）水平的影响以及对cAMP/蛋白激酶A（PKA）/cAMP反应元件结合蛋白（CREB）信号通路的激活，阐明DST对D-gal诱导衰老模型大鼠认知功能障碍的改善作用。

40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组和DST组，每组10只。除对照组外，其余各组大鼠均按500 mg·kg^－1·d^－1剂量腹腔注射D-gal 40 d建立大鼠衰老模型，建模第5天，阳性药组大鼠给予维生素E 0.027 g·kg^－1，DST组大鼠给予独参汤5 mL（相当于生药量0.3 g·kg^－1·d^－1），共36 d。观察大鼠状态并绘制生长曲线，水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力，采用生物化学和酶联免疫吸附测定法（ELISA）试剂盒分别检测大鼠脑组织中SOD、GSH活性及MDA和cAMP水平，透射电镜观察大鼠海马区神经元超微结构表现，刚果红染色观察大鼠海马组织老年斑形成情况，Western blotting法检测大鼠海马组织中cAMP/PKA/CREB信号通路相关蛋白表达水平。

与模型组比较，阳性药组和DST组大鼠体质量增加，水迷宫实验中逃避潜伏期和运动总距离明显缩短（P<0.05），穿越平台有效区域次数明显增加（P<0.05），大鼠脑组织中SOD、GSH活性和cAMP水平明显升高（P<0.05），MDA水平明显降低（P<0.05）。与模型组比较，阳性药组和DST组大鼠神经元超微结构病理性改变明显改善，大鼠海马组织中橘红色沉积物及老年斑面积明显减少（P<0.01），大鼠脑组织中PKA、cAMP、腺苷酸环化酶（ADCY）、CREB和脑源性神经营养因子（BDNF）蛋白表达水平明显升高（P<0.05），鸟嘌呤核苷酸结合蛋白α抑制剂（GNAI）表达水平明显降低（P<0.05）。

DST可明显提高D-gal诱导的衰老模型大鼠的认知能力，其机制可能与清除自由基和激活cAMP/PKA/CREB信号通路进而改善神经细胞损伤有关。

探讨柯萨奇病毒A16型（CA16）3C蛋白对横纹肌肉瘤RD细胞凋亡的影响，并阐明其可能的作用机制。

体外培养RD细胞，分为对照组（转染0.4 μg空载体质粒pCMV-HA）、0.1 μg pCMV-HA-3C组（转染0.1 μg pCMV-HA-3C和0.3 μg pCMV-HA）、0.2 μg pCMV-HA-3C组（转染0.2 μg pCMV-HA-3C和0.2 μg pCMV-HA）、0.4 μg pCMV-HA-3C组（转染0.4 μg pCMV-HA-3C）和蛋白激酶B （AKT）激活剂SC79处理组（先用4 mg·L^－1 SC79处理细胞4 h，然后转染0.2 μg pCMV-HA-3C和0.2 μg pCMV-HA）。MTT法检测各组细胞存活率，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，实时荧光定量 PCR（RT-qPCR）法检测各组RD细胞中Bcl-2同源拮抗剂/杀伤剂（Bak）、Bcl-2相关的细胞死亡激动剂（Bad）和p53上调凋亡调节因子（PUMA）mRNA表达水平，Western blotting 法检测各组 RD细胞中Bad、Bak、PUMA、聚ADP核糖聚合酶（PARP）、裂解聚ADP核糖聚合酶（cleaved-PARP）、裂解含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved-caspase-3）、AKT和磷酸化AKT（p-AKT）蛋白表达水平。

与对照组比较，0.4 μg pCMV-HA-3C组细胞存活率明显降低（P<0.01）。与对照组比较，不同剂量pCMV-HA-3C组细胞凋亡率明显升高（P<0.01）。与对照组比较，0.2 μg pCMV-HA-3C组细胞中Bak、Bad和PUMA mRNA和蛋白表达水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）。与对照组比较，不同剂量 pCMV-HA-3C组细胞中cleaved-PARP和cleaved-caspase-3蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。SC79处理实验中，与对照组比较，0.2 μg pCMV-HA-3组细胞中cleaved-PARP、cleaved-caspase-3和AKT蛋白表达水平明显升高（P<0.05），p-AKT蛋白表达水平明显降低（P<0.01）；与0.2 μg pCMV-HA-3C组比较，SC79处理组细胞中cleaved-PARP、cleaved-caspase-3和AKT蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01），p-AKT蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。

CA16型3C蛋白可能通过抑制AKT信号通路诱导RD细胞凋亡。

通过测试子代雄性SD大鼠成年后的焦虑样行为，阐明婴幼期声音干预对大鼠成年后焦虑样行为的影响。

6只孕14~15 d的SD大鼠随机分为正常噪声环境对照组（NN组）、莫扎特D大调双钢琴奏鸣曲K448组（MK组）和大自然声音组合组（NS组）。NN组大鼠不给予任何特殊的声音刺激；MK组大鼠每天给予莫扎特D大调双钢琴奏鸣曲K448声音刺激2 h，音量为50~70 dB，持续30 d；NS组大鼠每天给予大自然声音组合刺激2 h，音量为65~75 dB，持续30 d。刺激结束后5周，选取体质量相近的NN组11只、MK组8只和NS组11只雄性子代大鼠进行旷场实验、明暗箱实验和高架十字迷宫实验。旷场实验检测大鼠总运动路程、站立次数、进入中央区域次数和进入中央区域的时间，明暗箱实验检测大鼠在明箱停留时间百分率、穿梭次数和总运动路程，高架十字迷宫实验检测大鼠在开臂的时间百分率、进入次数和运动路程。

旷场实验中3组大鼠的总运动路程、站立次数、进入中央区域次数和进入中央区域的时间比较差异均无统计学意义（P>0.05）。明暗箱实验，与NN组比较，NS组大鼠在明箱停留时间百分率明显升高（P<0.05）；与NN组和MK组比较，NS组大鼠在明暗箱之间的穿梭次数和总运动路程明显增加（P<0.05或P<0.01）。高架十字迷宫实验，与NN组比较， NS组大鼠在开臂的时间百分率明显升高（P<0.05）。

婴幼期大自然声音的干预可减少雄性SD大鼠成年后的焦虑样行为。

探讨葡萄糖调节蛋白78（GRP78）对肝癌细胞放射敏感性的影响，初步阐明其分子机制。

采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法和Western blotting法检测肝癌SMMC-7721、HepG2、PLC、Huh7和QGY-7703细胞中GRP78 mRNA和蛋白表达水平，筛选GRP78高表达和低表达的肝癌细胞作为研究对象。采用RNA干扰技术在GRP78高表达的人肝癌SMMC-7721细胞中靶向沉默GRP78，命名为siGRP78- SMMC-7721（siGRP78组），以siNC-SMMC-7721为对照组（siNC组）；采用基因重组技术在GRP78低表达的人肝癌HepG2细胞中过表达GRP78，命名为Flag-GRP78-HepG2（Flag-GRP78组），以空载体3×Flag-HepG2为对照组（3×Flag组）。各组细胞分别给予0、2、4、6、8和10 Gy剂量X射线照射后，采用MTT法检测肝癌细胞存活率，5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷（EdU）荧光染色法检测肝癌细胞增殖率，Western blotting法检测肝癌细胞中磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路中磷酸化PI3K（p-PI3K）和磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达水平。

RT-qPCR法和Western blotting法检测，SMMC-7721细胞中GRP78 mRNA和蛋白表达水平最高，HepG2细胞中GRP78 mRNA和蛋白表达水平最低，选取SMMC-7721和HepG2细胞作为研究对象。MTT法检测，随着放射剂量的增加，肝癌细胞存活率逐渐降低；与siNC组比较，6 Gy以上剂量X射线照射后，siGRP78组细胞存活率明显降低（P<0.01）；与3×Flag组比较，4 Gy以上剂量X射线照射后，Flag-GRP78组细胞存活率明显升高（P<0.05或P<0.01）。EdU荧光染色法检测，与siNC组比较，siGRP78组细胞增殖率明显降低（P<0.05）；与3×Flag组比较，Flag-GRP78组细胞增殖率明显升高（P<0.05）。Western blotting法检测，与siNC组比较，siGRP78组细胞中p-PI3K和p-Akt蛋白表达水平明显降低（P<0.01）；与3×Flag组比较，Flag-GRP78组细胞中p-PI3K和p-Akt蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。

高表达水平的GRP78可降低肝癌细胞放射敏感性，其作用机制可能与GRP78激活PI3K/Akt信号通路有关。

筛选靶向上调雌激素受体β（ERβ）转录和表达的人参皂苷单体，研究其对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响及其机制。

采用PGL2-ERβ和内参Renilla荧光素酶质粒Prep7-Rluc共同转染HEK293T细胞，细胞分为对照组，雌二醇组（1×10^－6 mmol·L^－1），人参皂苷Rb1组、Rb2组、Rd组、Rg1组、Rg2组和Rh1组（1×10^－5 mmol·L^－1），通过双荧光素酶报告基因实验检测各组细胞双荧光素酶活性。进一步将MC3T3-E1细胞分为对照组、雌二醇组和不同浓度（1×10^－6、1×10^－5及1×10^－4 mmol·L^－1）人参皂苷Rh1组，采用Western blotting法检测各组MC3T3-E1细胞中ERβ蛋白表达水平。通过Auto Dock分子对接实验，模拟人参皂苷Rh1与ERβ蛋白分子的结合情况。MC3T3-E1细胞分为对照组、雌二醇组和不同浓度（5×10^－6、1×10^－5、5×10^－5、1×10^－4、1×10^－3及5×10^－3 mmol·L^－1）人参皂苷Rh1组，分别作用24、48和72 h后，采用CCK-8法检测各组细胞增殖率。MC3T3-E1细胞分为对照组、雌二醇组（1×10^－6 mmol·L^－1）和不同浓度（1×10^－5及1×10^－4 mmol·L^－1）人参皂苷Rh1组，配制成骨诱导液，分别诱导MC3T3-E1细胞7、14和21 d，采用碱性磷酸酶（ALP）染色和茜素红染色检测细胞中ALP和钙化结节染色面积，观察人参皂苷Rh1对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响。

双荧光素酶报告基因实验，各组HEK293T细胞中转染ERβ-PGL2质粒后，与对照组比较，1×10^－5 mmol·L^－1人参皂苷Rh1组细胞荧光素酶活性明显升高（P<0.05）。 Western blotting法检测，与对照组比较，不同浓度人参皂苷Rh1组细胞中ERβ蛋白表达水平明显升高（P<0.05），且1×10^－4 mmol·L^－1人参皂苷Rh1组细胞中ERβ蛋白表达水平最高。Auto Dock分析，人参皂苷Rh1可以结合在ERβ蛋白的配体结合口袋内。CCK-8实验，培养24、48和72 h后，与对照组比较，1×10^－5、5×10^－5、1×10^－4和1×10^－3 mmol·L^－1人参皂苷Rh1组MC3T3-E1细胞增殖率均明显升高（P<0.01），其中72 h时1×10^－4 mmol·L^－1人参皂苷Rh1组细胞增殖率最高。成骨诱导分化后，与对照组比较，不同浓度人参皂苷Rh1组细胞中ALP染色面积明显增加，1×10^－4 mmol·L^－1人参皂苷Rh1组细胞中ALP染色面积最大，而且14 d时ALP染色面积较7 d时明显增加，具有时间和浓度依赖性；与对照组比较，不同浓度人参皂苷Rh1组细胞矿化结节茜素红染色面积明显增加。

人参皂苷Rh1能够明显促进成骨细胞的增殖和分化，其机制可能与其靶向上调细胞中ERβ的转录和表达有关。

靶向沉默HeLa细胞中α-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X染色相关蛋白（ATRX），探讨其对辐射诱导的细胞周期阻滞和细胞凋亡的作用。

利用RNA干扰（RNAi）技术建立稳定沉默ATRX的HeLa细胞模型，命名为shATRX1-HeLa，以shCon-HeLa为阴性对照。分别给予0、2和8 Gy X射线照射后，采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性，采用PI单染和流式细胞术检测各组细胞中G₀/G₁、S和G₂/M期细胞百分率，采用Annexin Ⅴ-PE/7-AAD双染和流式细胞术检测各组细胞凋亡率，采用Western blotting法检测各组细胞中多聚（腺苷酸二磷酸核糖基）聚合酶1（PARP1）、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 9（cleaved caspase-9）和裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3（cleaved caspase-3）蛋白表达情况。

0、2和8 Gy X射线照射后0、6、10、24和48 h，与shCon-HeLa组比较，不同照射剂量 shATRX1-HeLa组细胞增殖活性均明显降低（P<0.05或P<0.01）。0和2 Gy X射线照射后，与shCon-HeLa组比较， shATRX1-HeLa组G₀/G₁期细胞百分率明显降低（P<0.05），G₂/M期细胞百分率和细胞凋亡率则明显升高（P<0.05）；8 Gy X射线照射后，与shCon-HeLa组比较，shATRX1-HeLa组G₀/G₁期细胞百分率明显升高（P<0.05），而G₂/M期细胞百分率明显降低（P<0.05），细胞凋亡率明显升高（P<0.01）。Western blotting法检测，与shCon-HeLa组比较，经2和8 Gy照射后24和48 h，shATRX1-HeLa组细胞中PARP1、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3蛋白表达均明显增加。

靶向沉默HeLa细胞ATRX可降低辐射诱导的细胞G₂/M期阻滞、抑制细胞增殖并促进细胞凋亡，本研究结果为肿瘤放疗提供了新的分子靶点。

研究锌指转录因子Snail高表达对子痫前期（PE）大鼠胎盘滋养细胞侵袭能力的影响，并探讨其相关机制。

建立大鼠PE模型，作为模型组，取健康大鼠作为对照组。从PE大鼠绒毛膜滋养层组织分离和培养原代滋养细胞。取对数生长期滋养细胞，分为Neo组（转染Snail阴性对照质粒pL-tdTomato-Neo）和mSnail组（转染Snail过表达质粒pL-tdTomato-mSnail），以不作处理的细胞为空白对照组。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Western blotting法检测对照组和模型组大鼠胎盘绒毛膜滋养层组织及空白对照组、Neo组和mSnail组细胞中Snail mRNA和蛋白表达水平，Transwell小室实验检测各组细胞侵袭能力，Western blotting法检测各组细胞中上皮性钙黏蛋白（E-cadherin）、神经性钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）蛋白表达水平。

与对照组比较，模型组大鼠胎盘绒毛膜滋养层组织中Snail mRNA和蛋白表达均明显降低（P<0.05）；荧光显微镜下观察，Neo组和Snail组细胞转染效率均>80%。与空白对照组和Neo组比较，mSnail组细胞中Snail mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05），每个视野平均穿过微孔的细胞数明显增加（P<0.05），E-cadherin蛋白表达水平明显降低（P<0.05），N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。

Snail高表达可增强PE大鼠胎盘滋养细胞的侵袭能力，其机制可能与Snail促进胎盘滋养细胞上皮-间质转化过程有关。

探讨醉茄素A对缺血性脑卒中大鼠神经功能的保护作用，阐明其可能作用机制。

75只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组（尼莫地平组，12 mg·kg^－1）、低剂量醉茄素A组（25 mg·kg^－1）和高剂量醉茄素A组（100 mg·kg^－1），每组15只。采用改良Longa线栓法制备缺血性脑卒中大鼠模型，建模成功后灌胃给药，每天1次，连续14 d。采用Zea-Longa评分法评估各组大鼠神经功能，检测大鼠脑组织含水量，TTC染色法检测大鼠脑梗死体积，生化法检测大鼠脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）活性和丙二醛（MDA）水平，TUNEL染色法检测大鼠脑细胞凋亡率，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Western blotting法检测大鼠脑组织中核因子E2相关因子2（Nrf2）和血红素加氧酶1（HO-1）mRNA和蛋白表达水平。

与假手术组比较，模型组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、脑梗死体积、细胞凋亡率和脑组织中MDA水平均明显升高（P<0.05），脑组织中SOD、GSH-Px、CAT活性及Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与模型组比较，尼莫地平组和高剂量醉茄素A组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、脑梗死体积、细胞凋亡率和脑组织中MDA水平明显降低（P<0.05），脑组织中SOD、GSH-Px和CAT活性及Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达水平均明显升高（P<0.05），而低剂量醉茄素A组大鼠上述指标差异无统计学意义（P>0.05）。

醉茄素A能提高缺血性脑卒中大鼠机体抗氧化水平，减轻脑组织氧化损伤，抑制脑组织神经细胞凋亡，改善大鼠神经行为功能，其机制可能与Nrf2/HO-1信号通路的激活有关。

探讨氯喹（CQ）对吉西他滨（GEM）耐药胰腺癌（PC）细胞的影响，阐明其相关作用机制。

利用低浓度依次递增法建立GEM耐药PC PANC1细胞株（PANC1/GEM），分为GEM耐药（PANC1/GEM）组、CQ组和GEM耐药组+CQ（PANC1/GEM+CQ）组，并以PANC1细胞为对照组。CCK-8法验证PANC1/GEM细胞株是否成功建立；透射电子显微镜下观察各组细胞中自噬小体数量，Western blotting法检测自噬标志蛋白胞浆型微管相关蛋白1轻链3（LC3-Ⅰ）、膜型微管相关蛋白1轻链3（LC3-Ⅱ）和P62蛋白表达水平，分别应用JC-1法、DCFH-DA法和Annexin Ⅴ-FITC/PI双染法采用流式细胞仪检测各组细胞中线粒体膜电位、活性氧（ROS）水平和细胞凋亡率，采用Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Cleaved caspase-3）蛋白表达水平。

成功建立PANC1/GEM细胞株， 与PANC1细胞比较，GEM对PANC1/GEM细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）明显增加（P<0.01）。与对照组比较，PANC1/GEM组、CQ组和PANC1/GEM+CQ组细胞中自噬小体数量明显增加且LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显升高（P<0.05），PANC1/GEM组和PANC1/GEM+CQ组细胞中P62蛋白表达水平明显降低（P<0.05），CQ组细胞中P62蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与PANC1/GEM组比较， PANC1/GEM+CQ组细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显降低（P<0.05），P62蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与对照组比较，PANC1/GEM组和PANC1/GEM+CQ组细胞线粒体膜电位、ROS水平和细胞凋亡率明显降低（P<0.05），CQ组细胞线粒体膜电位、ROS水平和细胞凋亡率明显升高（P<0.05）；与PANC1/GEM组比较，PANC1/GEM+CQ组细胞线粒体膜电位、ROS水平和细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。与对照组比较，PANC1/GEM组和PANC1/GEM+CQ组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.05），Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显降低（P<0.05），CQ组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05），Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与PANC1/GEM组比较，PANC1/GEM+CQ组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05），Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。

CQ能够明显促进耐药PC细胞对GEM的敏感性，其机制可能与抑制PC细胞自噬，降低细胞线粒体膜电位，促进细胞中ROS的产生，从而上调GEM所诱导的细胞凋亡有关。

检测非结构蛋白μNS和σNS之间的相互作用及其结合区域，阐明纳尔逊湾正呼肠孤病毒（NBV）的致病机制。

采用Lipo3000转染试剂将pCAG M3和pEFHAσNS质粒分别和共同转染至BHK细胞中，免疫荧光法检测μNS和σNS蛋白在细胞中的定位和分布；用NBV感染BHK细胞，采用Western blotting法检测μNS和σNS蛋白在感染细胞中的表达。构建σNS蛋白N末端10~60个氨基酸（aa）残基缺失的质粒，免疫荧光法检测μNS和σNS蛋白在细胞内共定位的结合区域，酵母双杂交实验验证μNS和σNS蛋白相互作用的结合区域。

亚细胞定位显示，NBV的μNS蛋白在无其他病毒蛋白的情况下会形成包涵体结构，而σNS蛋白弥散地分布在整个细胞质中。Western blotting检测证实μNS和σNS蛋白在感染细胞中表达。采用偶联抗体进行免疫染色，共聚焦显微镜下观察到μNS和σNS蛋白共定位于细胞质中。利用酵母双杂交实验检测到与μNS蛋白相互作用的σNS蛋白的基本区域位于σNS蛋白 N末端区域的60个aa残基区域内。

NBV自噬相关蛋白σNS蛋白可以通过与μNS蛋白相互作用而共同表达于病毒包涵体中，σNS蛋白与μNS蛋白的结合区域位于σNS蛋白N末端的60个aa残基区域内。

探讨薯蓣皂苷对滑膜炎大鼠症状的改善作用及对Toll样受体2（TLR2）-核转录因子κB（NF-κB）信号通路的影响，阐明薯蓣皂苷治疗滑膜炎的可能机制。

通过皮内注射弗氏完全佐剂的方法建立滑膜炎大鼠模型，随机分为模型组10只、阳性药组（吲哚美辛10 mg·kg^－1）11只、低剂量薯蓣皂苷（60 mg·kg^－1）组12只和高剂量薯蓣皂苷（120 mg·kg^－1）组12只，另取10只健康SD大鼠设为对照组。采用屈关节疼痛实验评分法和水容积法评价干预后第3、7、14和21天各组大鼠关节疼痛和肿胀情况，酶联免疫吸附测定法检测大鼠滑膜组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素1β（IL-1β）水平，HE染色观察各组大鼠滑膜组织病理形态表现，Western blotting法检测各组大鼠滑膜组织中TLR2、髓样分化因子88（MyD88）、NF-κB和磷酸化NF-κB（p-NF-κB ）p65蛋白表达水平。

与对照组比较，各时间点模型组、阳性药组、低剂量薯蓣皂苷组和高剂量薯蓣皂苷组大鼠疼痛评分明显升高（P<0.05），足趾肿胀程度明显增加（P<0.05），关节滑膜组织中TNF-α和IL-1β水平明显升高（P<0.05）；与模型组比较，各时间点阳性药组、低剂量薯蓣皂苷组和高剂量薯蓣皂苷组疼痛评分明显降低（P<0.05），足趾肿胀程度明显降低（P<0.05），关节滑膜组织中TNF-α和IL-1β水平明显降低（P<0.05）；与阳性药组比较，各时间点低剂量薯蓣皂苷组和高剂量大鼠薯蓣皂苷组疼痛评分明显升高（P<0.05），足趾肿胀程度明显增加（P<0.05），关节滑膜组织中TNF-α和IL-1β水平明显升高（P<0.05）；与低剂量薯蓣皂苷组比较，各时间点高剂量薯蓣皂苷组大鼠疼痛评分明显降低（P<0.05），足趾肿胀程度明显降低（P<0.05），关节滑膜组织中TNF-α和IL-1β水平明显降低（P<0.05）。HE染色，对照组大鼠滑膜组织形态正常，细胞排列整齐，无水肿、充血和增生，未见炎症细胞浸润；模型组大鼠滑膜组织水肿、充血严重，滑膜细胞排列紊乱并大量增生，大量炎症细胞浸润；低剂量薯蓣皂苷组大鼠滑膜组织充血、水肿减轻，细胞增生略有减少；阳性药组和高剂量薯蓣皂苷组大鼠滑膜组织轻度水肿、充血，细胞排列相对整齐，少量炎症细胞浸润，少见增生。与对照组比较，模型组、阳性药组、低剂量薯蓣皂苷组和高剂量薯蓣皂苷组大鼠滑膜组织中TLR2、MyD88和p-NF-κB p65蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与模型组比较，阳性药组、低剂量薯蓣皂苷组和高剂量薯蓣皂苷组大鼠滑膜组织中TLR2、MyD88和p-NF-κB p65蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与阳性药组比较，低剂量薯蓣皂苷组和高剂量薯蓣皂苷组大鼠滑膜组织中TLR2、MyD88和p-NF-κB p65蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与低剂量薯蓣皂苷组比较，高剂量薯蓣皂苷组大鼠滑膜组织中TLR2、MyD88和p-NF-κB p65蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。

薯蓣皂苷可能通过抑制TLR2-NF-κB信号通路改善滑膜炎大鼠症状。

探讨氧化苦参碱（OMT）对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响，并阐明其作用机制。

SiHa细胞分为对照组、低剂量OMT组、中剂量OMT组和高剂量OMT组，分别以含二甲基亚砜（DMSO）及含0.4、0.8和1.6 g·L^－1 OMT的RPMI 1640培养基培养。培养24 h后，Hoechst33258染色法观察细胞形态表现；分别培养24、48和72 h后，MTT法检测各组细胞增殖活性；培养48 h后，流式细胞术检测各组不同细胞周期细胞百分率和凋亡率；实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Western blotting法分别检测各组细胞中β-连环蛋白（β-catenin）、细胞周期蛋白D1（cyclinD1）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）及Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA和蛋白表达水平。

荧光显微镜下观察，对照组细胞生长良好，蓝色荧光较弱；低剂量OMT组细胞可见少量凋亡小体；中剂量OMT组细胞数量减少，凋亡小体数量增多；高剂量OMT组蓝色荧光增多，细胞解体，核皱缩，凋亡小体数量明显增加。与对照组比较，培养24、48和72 h后，低、中和高剂量OMT组细胞增殖活性明显降低（P<0.05），G₀/G₁期细胞百分率明显升高（P<0.05），S期和G₂/M期细胞百分率明显降低（P<0.05），细胞凋亡率明显升高（P<0.05），细胞中β-catenin、cyclinD1及Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05），Bax mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。

OMT可将SiHa细胞阻滞在G₁期，抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡，其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

探讨香叶木素（Dio）对异丙肾上腺素（Iso）诱导的小鼠心肌肥大的抑制作用，并阐明其生物学机制。

28只小鼠随机分为对照组、模型组、低剂量Dio组和高剂量Dio组。对照组和模型组小鼠分别连续14 d皮下注射生理盐水或Iso（5 mg·kg^－1·d^－1）；低和高剂量Dio组小鼠连续14 d皮下注射Iso（5 mg·kg^－1·d^－1），同时连续14 d腹腔注射Dio（5和20 mg·kg^－1·d ^－1）。14 d后处死小鼠，收集心脏和胫骨，称量心脏质量和左心室质量，测量胫骨长度，并计算心脏质量指数和左心室质量指数。采用HE、FITC-Lectin和Masson染色法观察小鼠左心室心肌组织病理形态表现，采用免疫组织化学法检测小鼠左心室心肌组织中α-肌球蛋白重链（α-MHC）和β-肌球蛋白重链（β-MHC）蛋白表达水平，采用Western blotting法检测大鼠左心室心肌组织中细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）、磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）、c-Jun氨基末端激酶1/2（JNK1/2）和磷酸化JNK1/2（p-JNK1/2）蛋白表达水平。

与对照组比较，模型组小鼠心脏质量指数和左心室质量指数均明显升高（P<0.01），左心室心肌组织形态发生明显改变，心肌纤维破坏，出现炎性细胞浸润，心肌细胞横截面积明显增大（P<0.01），心肌组织微循环灌注降低，间质纤维化程度明显增加（P<0.01）；左心室心肌组织中α-MHC蛋白表达水平明显降低（P<0.01），β-MHC、p-ERK1/2和p-JNK1/2蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。与模型组比较，不同剂量Dio组小鼠心脏质量指数和左心室质量指数明显降低（P<0.05或P<0.01），心肌组织损伤明显减轻，心肌细胞横截面积明显缩小（P<0.05或P<0.01），心肌组织微循环灌注增强，间质纤维化程度明显降低（P<0.05或P<0.01）；左心室心肌组织中α-MHC蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01），β-MHC、p-ERK1/2和p-JNK1/2蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01），且呈剂量依赖性。

Dio能改善Iso诱导的小鼠心肌肥大，其机制可能与其抑制ERK1/2和JNK1/2信号通路有关。

探讨薄芝糖肽对人角质细胞（KC）增殖和黏附因子β-连环蛋白（β-catenin）表达的影响，阐明薄芝糖肽治疗银屑病的可能机制。

增殖功能实验中，对数生长期的人永生化角质形成细胞（HaCaT细胞）分为对照组和不同浓度（0.011 719、0.023 438、0.046 875、0.093 750、0.187 500、0.375 000、0.750 000和1.500 000 g·L^－1）薄芝糖肽组，分别处理24 h后，采用CCK-8法检测各组细胞增殖率，确定薄芝糖肽作用的有效浓度；对数生长期HaCaT细胞分为对照组和不同浓度（0.625、1.250、2.500、5.000、10.000、20.000、40.000和80.000 mg·L^－1）薄芝糖肽组，分别处理24和48 h后，采用CCK-8法检测各组细胞增殖率。黏附功能实验中，对数生长期HaCaT细胞分为对照组和不同浓度（10和20 mg·L^－1）薄芝糖肽组，分别处理24和48 h后，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组细胞中β-catenin mRNA表达水平，Western blotting法检测各组细胞中β-catenin蛋白表达水平。

增殖功能实验，与对照组比较，作用24 h后，0.011 719~0.093 750 g·L^－1薄芝糖肽组细胞增殖率均明显降低（P<0.01），该浓度区间为薄芝糖肽有效浓度区间。与对照组比较，作用24和48 h后， 1.250、2.500、5.000、10.000、20.000、40.000和80.000 mg·L^－1薄芝糖肽组细胞增殖率均明显降低（P<0.05或P<0.01），且20 mg·L^－1薄芝糖肽组作用48 h时细胞增殖率降低最明显（P<0.01）。黏附功能实验，与对照组比较，作用24 h时10和20 mg·L^－1薄芝糖肽组细胞中β-catenin mRNA表达水平明显降低（P<0.01），作用48 h时10和20 mg?L^－1薄芝糖肽组细胞中β-catenin mRNA表达水平降低更明显（P<0.01）；与对照组比较，作用24 h时10 mg?L^－1薄芝糖肽组细胞中β-catenin蛋白表达水平明显降低（P<0.01），作用48 h时10和20 mg?L^－1薄芝糖肽组细胞中β-catenin蛋白表达水平有增高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。

薄芝糖肽在一定的浓度和作用时间内可以抑制KC增殖，并可通过降低β-catenin表达抑制KC黏附功能，可能是薄芝糖肽治疗银屑病的作用机制之一。

探讨热休克蛋白27（HSP27）对口腔鳞状细胞癌（OSCC）CAL27细胞侵袭和迁移的影响，并阐明其作用机制。

CAL27细胞分为对照组［转染阴性对照小干扰RNA（NC-siRNA）］和实验组［转染HSP27小干扰RNA （HSP27-siRNA）］，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Western blotting法检测2组CAL27细胞siRNA干扰效率，细胞划痕实验检测2组CAL27细胞划痕愈合率，Transwell小室实验检测2组CAL27细胞侵袭和迁移细胞数，RT-qPCR和Western blotting法检测2组CAL27细胞中上皮-间质转化（EMT）标记物N-钙黏蛋白（N-cadherin）mRNA和蛋白表达水平。

与对照组比较，实验组CLA27细胞中HSP27 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。细胞划痕实验，与对照组比较，实验组CAL27细胞划痕愈合率明显降低（P<0.01）。Transwell小室实验，与对照组比较，实验组CAL27细胞中迁移和侵袭细胞数明显减少（P<0.01）。与对照组比较，实验组CAL27细胞中N-cadherin mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。

靶向沉默HSP27可以导致OSCC CAL27细胞迁移和侵袭能力降低，可能与抑制EMT有关。

探讨金银花提取物对脂多糖（LPS）诱导的急性前部葡萄膜炎（AAU）小鼠的抗炎作用，并阐明其作用机制。

将50只BALB/c小鼠随机分为对照组，模型组，低、中和高剂量金银花提取物组，每组10只。低、中和高剂量金银花提取物组小鼠灌胃给予250、500 和 750 mg·kg^－1金银花提取物，对照组和模型组小鼠均给予等体积生理盐水。连续给药15 d后，除对照组外其余各组小鼠于玻璃体腔内注射125 mg·L^－1LPS建立小鼠AAU模型。采用HE染色观察小鼠眼组织病理形态表现，采用实时荧光定量PCR法（RT-qPCR）和Western blotting法检测小鼠眼组织中Toll样受体4（TLR4）及核因子κB（NF-κB）mRNA和蛋白表达水平，采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠眼组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素10（IL-10）水平。

对照组小鼠眼组织结构完整，无炎症细胞浸润；模型组小鼠视网膜水肿，葡萄膜组织中出现大量炎症细胞浸润；与模型组比较，低、中和高剂量金银花提取物组小鼠葡萄膜组织中炎症细胞浸润不同程度减轻。与对照组比较，模型组小鼠眼组织中TLR4及NF-κB mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05），TNF-α、IL-6和IL-10水平明显升高（P<0.05）；与模型组比较，低、中和高剂量金银花提取物组小鼠眼组织中TLR4及NF-κB mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05），TNF-α、IL-6和IL-10水平明显降低（P<0.05）；与低剂量金银花提取物组比较，中和高剂量金银花提取物组小鼠眼组织中TLR4及NF-κB mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05），TNF-α、IL-6和IL-10水平明显降低（P<0.05）；与中剂量金银花提取物组比较，高剂量金银花提取物组小鼠眼组织中TLR4及NF-κB mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05），TNF-α、IL-6和IL-10水平明显降低（P<0.05）。

金银花提取物可通过TLR4/NF-κB信号通路下调炎症细胞表达，减轻AAU小鼠的眼部组织炎症反应，且呈剂量依赖性。

比较具有相同尖端直径的Reciproc Blue（RB）、M-Pro（MP）、HyFlex CM（HCM）、Orodeka Plex-2.0（OP）和P3-Blue（PB） 5种热处理型机用镍钛器械（即镍钛锉）的抗弯曲疲劳性能，为临床上热处理型镍钛器械的选择提供参考依据。

选取 RB（25/0.08）、MP（25/0.06）、HCM （25/0.06）、OP （25/0.06）和PB（25/0.06）新镍钛锉各20支，每组再分为2个亚组，每个亚组10支，即60°弯曲模拟根管RB组、HCM组、MP组、OP组和PB组，90°弯曲模拟根管RB组、HCM组、MP组、OP组和PB组。按照厂家所推荐的转速和扭矩设置根管马达，分别在内径为1.5 mm、弯曲半径为5 mm、弯曲角度为60°和90°的金属模拟根管中测试镍钛锉的抗弯曲疲劳性能，用计时器记录每只镍钛锉从开始旋转到疲劳折断的时间（TTF），同时用游标卡尺测量并记录折断段的长度（FL）。收集折断后的镍钛锉，用扫描电子显微镜（SEM）扫描折断后镍钛锉的断面，观察其断端形貌。

在60°弯曲模拟根管中，RB组镍钛锉的TTF最长，HCM组和 MP组次之，OP组和PB组最低；与PB组和OP组比较，MP组、HCM组和RB组镍钛锉的TTF明显增加（P<0.05）；与 MP组和HCM组比较，RB组镍钛锉的TTF明显增加（P<0.05）。在90°弯曲模拟根管中，RB组镍钛锉的TTF最长，MP组次之，HCM组、PB组和OP组最低；与PB组和OP组比较，MP组和RB组镍钛锉的TTF明显增加（P<0.05）；与MP组和HCM组比较，RB组镍钛锉的TTF明显增加（P<0.05）。90°弯曲模拟根管中各亚组镍钛锉的TTF均明显少于60°弯曲模拟根管中相应各亚组（P<0.05）。各组镍钛锉FL比较差异均无统计学意义（P>0.05）。SEM下观察，各组镍钛锉的断面均显示出典型的循环疲劳特征即疲劳条纹和韧窝样结构。

RB镍钛锉在60°和90°弯曲模拟根管内的抗弯曲疲劳性能明显优于其他热处理型镍钛锉。

建立兔宫腔黏连（IUA）模型，探讨宫腔内放置新鲜羊膜预防IUA的效果和对子宫内膜容受性的改善作用。

雌性新西兰大白兔30只随机分为对照组、模型组和治疗组，每组10只，模型组和治疗组兔用刮勺搔刮宫腔机械性损伤子宫内膜并于宫腔内放置浸泡脂多糖（LPS）的棉线使宫腔感染，建立兔IUA模型，治疗组兔于模型建立同时宫腔内放置新鲜羊膜，对照组为假手术组，不进行宫腔处理。收集建模后第1和2周时的子宫标本，采用HE染色和Masson染色检测各组兔子宫内膜组织中腺体数量和子宫内膜纤维化面积百分率，采用免疫组织化学染色法检测各组兔子宫内膜组织中整合素αVβ3和白血病抑制因子（LIF）蛋白表达水平。

与对照组比较，第1和2周时模型组和治疗组兔子宫内膜组织中腺体数量明显减少（P<0.05），子宫内膜纤维化面积百分率明显升高（P<0.05），子宫内膜组织中整合素αVβ3和LIF蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与模型组比较，第1和2周时治疗组兔子宫内膜组织中腺体数量明显增加（P<0.05），子宫内膜纤维化面积百分率明显降低（P<0.05），子宫内膜组织中整合素αVβ3和LIF蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与第1周时比较，第2周时对照组和治疗组兔子宫内膜组织中腺体数量、子宫内膜纤维化面积百分率及子宫内膜组织中整合素αVβ3和LIF蛋白表达水平差异均无统计学意义（P>0.05），但第2周时模型组兔子宫内膜纤维化面积百分率明显降低（P<0.01），子宫内膜组织中整合素αVβ3和LIF蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。

宫腔内放置新鲜羊膜可以减轻IUA的程度，改善子宫内膜容受性，且起效快并作用持久。

建立人浆液性卵巢癌细胞体外培养体系，为浆液性卵巢癌患者的临床用药提供实验模型和理论依据。

采用Ⅱ型胶原酶消化和差速离心法分离培养人浆液性卵巢癌细胞，培养至第3代的浆液性卵巢癌细胞用于实验。倒置相差显微镜下观察卵巢癌细胞形态表现，绘制并分析细胞生长曲线。免疫荧光法检测细胞中人癌抗原125（CA125）、配对盒基因8（PAX8）和人附睾蛋白4（HE4）表达情况，对所培养原代细胞进行鉴定， 同时检测胚胎干细胞同源转录因子Nanog和八聚体结合转录因子4（Oct-4）的表达情况。药物敏感性检测分为不同浓度5-氟尿嘧啶（5-FU）（0、0.625、1.250、2.500、5.000 mg·L^－1）组、紫杉醇（PTX）（0、0.062 5、0.125 0、0.250 0、0.500 0 mg·L^－1）组、替莫唑胺（TMZ）（0、0.125、0.250、0.500、1.000 mg·L^－1）组、卡铂（CBP）（0、0.625、1.250、2.500、5.000 mg·L^－1）组、阿霉素（DOX）（0、0.125、0.250、0.500、1.000 mg·L^－1）组和褪黑素（MLT）（0、0.625、1.250、2.500、5.000 mg·L^－1）组，其中0 mg·L^－1 组为对照组，CCK-8法检测各组细胞存活率。

原代浆液性卵巢癌细胞接种4 h后开始贴壁，培养8~10 d生长融合成片；连续传代后细胞形态均一，生长迅速，细胞接种后2~7 d为线性增长期。免疫荧光法检测细胞中CA125、PAX8、HE4、Nanog和Oct-4均呈高表达。药物敏感性检测，卵巢癌细胞对5-FU、TMZ、CBP和MLT均有较高的敏感性，与相对应对照组比较，不同浓度5-FU组、TMZ组、CBP组、MLT组及0.062 5和0.125 0 mg·L^－1PTX组细胞存活率明显降低（P<0.05或P<0.01），且细胞存活率随药物浓度升高逐渐降低。

成功建立了人浆液性卵巢癌细胞体外培养体系，该细胞对5-FU、TMZ、CBP和MLT具有较高的敏感性，该结果对浆液性卵巢癌患者术后化疗药物的选择有指导意义。

探讨阻塞性睡眠呼吸暂停（OSA）患者睡眠中氧降速率和复氧速率对患者昼夜间血压的影响，并阐明其作用机制。

收集106例OSA患者整夜多导睡眠呼吸监测资料，包括睡眠参数、呼吸事件参数和当天清醒期及睡眠期无创多点连续血压监测资料。根据OSA患者每个呼吸事件的氧降幅度与氧降时间的比值获得氧降速率，同样方法获得复氧速率。根据血压监测结果将患者分为OSA并发高血压组（OSA+HT组，59例）和OSA未并发高血压组（OSA－HT组，47例），分析2组患者氧降速率和复氧速率的差异，分别对所有入组患者进行氧降和复氧速率与白天血压值、夜间血压值以及夜间血压波动性（NBPF）的相关性分析。

OSA+HT组患者氧降速率和复氧速率明显高于OSA－HT组（P<0.01）。氧降速率与患者夜间收缩压、舒张压、平均动脉压及白天舒张压和平均动脉压均呈正相关关系（r=0.311，P=0.001；r =0.245，P=0.011；r=0.308，P=0.001；r=0.203，P=0.037；r =0.219，P=0.024），复氧速率与患者夜间收缩压、舒张压、平均动脉压及白天舒张压和平均动脉压均呈正相关关系（r=0.327，P=0.001；r=0.288，P=0.003；r=0.343，P=0.000；r=0.250，P=0.01；r=0.259，P=0.007）；氧降速率和复氧速率均与OSA患者NBPF呈正相关关系（r=0.595，P<0.01；r=0.646，P<0.01）。

OSA患者间歇性氧降和复氧的损害与其昼夜血压升高有直接关联，氧降与复氧速率的变化是导致OSA患者NBPF的重要因素。

评价三维重建技术联合吲哚菁绿（ICG）荧光染色在肝脏肿瘤诊断和治疗中的应用价值，并探讨该联合技术能否有助于降低肝脏肿瘤患者术后并发症的发生率。

采用回顾性研究方法，收集70例肝脏肿瘤患者的临床资料，依据患者是否行三维重建联合ICG术中导航分为常规术前评估及肝切除术组（常规组，36例）和三维重建联合ICG荧光染色术中导航组（联合组，34例）。记录2组患者术中病灶的检出及切除情况、术中出血量、术中输血情况、手术时间、术后住院时间、Clavien-Dindo并发症分级和国际肝脏外科学组（ISGLS）定义的肝切术后主要并发症的发生率。

联合组34例患者通过术中ICG荧光染色较术前CT/MRI新发现病灶15个，经术后病理证实其中4个为肝细胞癌，2个为肠癌肝转移灶，其余9个为肝硬化结节，敏感度95.35%，特异度68.75%。与常规组比较，联合组患者手术时间明显缩短（P<0.05），Clavien-Dindo并发症分级明显改善（P<0.05），术中出血量、术中输血情况、术后住院时间和ISGLS肝切除术后并发症发生率差异均无统计学意义（P>0.05）。2组患者手术切缘均达到完全切除（R0切除）标准，常规组有1例患者于术后3个月复查时发现肿瘤复发。

三维重建技术联合ICG荧光染色通过充分的术前评估及入路规划，在提高肝脏肿瘤手术安全性的同时做到精准定位，能有效缩短手术时间，提高病灶检出率，并对降低术后并发症发生率有一定的积极作用，实现了精准肝切除。

探讨硼替佐米致多发性骨髓瘤患者急性肺损伤的发病机制、临床表现和治疗策略，为该病的诊治提供参考。

收集1例硼替佐米致多发性骨髓瘤患者急性肺损伤的临床资料，并进行相关文献的归纳复习。

患者，男性，48岁，因多发性骨髓瘤在行VCD方案（硼替佐米、环磷酰胺和地塞米松）第4化疗疗程中出现发热伴呼吸困难症状，经影像学、实验室、病原学和支气管镜等检查诊断为硼替佐米治疗相关的急性肺损伤，停用硼替佐米并给予糖皮质激素和无创呼吸机辅助通气等治疗后，患者病情好转出院。

硼替佐米治疗相关的急性肺损伤发生率低，病情进展迅速，病死率高，对该类疾病的及早识别尤为重要，疑诊患者早期停用硼替佐米并加用糖皮质激素治疗能够有效降低病死率，改善预后。

分析胃肝样腺癌（HAS）患者的临床表现、诊断和治疗方法，提高临床医生对该病的认识。

收集1例HAS患者的临床资料，并结合相关文献，总结HAS的临床特点、诊断和治疗方法。

患者，男性，54岁，因上腹部不适6个月门诊以“胃癌”收入院，胃增强CT检查提示浸润溃疡型胃癌，肝脏多发转移瘤。给予3个疗程新辅助化疗后行胃全切术，胃病理提示“胃腺癌”。后因“肝脏多发转移瘤”转入本科，并行微波射频消融术，术后病理诊断为肝样腺癌，后对胃病理进行免疫组织化学检测确诊为HAS。经治疗后患者生存期仅为9个月。

HAS无特异的临床表现，极易误诊为胃腺癌，病理检查和免疫组织化学检测是诊断该病的金标准，手术切除及术后辅助化疗是首选的治疗方式。HAS恶性度高，进展快，应做到早发现和早治疗，以延长患者的生存期。

探讨1例伴口腔扁平苔藓（OLP）患者行种植修复的联合治疗方法，阐述多学科联合治疗对患者口腔功能恢复的重要意义。

收集１例伴OLP行种植修复联合治疗患者的5年随访结果，结合相关文献复习，分析应用多学科联合治疗对伴OLP行种植修复患者口腔功能恢复重建的作用。

该例患者临床表现为双侧后牙松动，咀嚼无力，OLP病史2年。患者口腔卫生状况差，牙龈质地松软，呈暗红色，全口牙齿探诊深度（PD）5~6 mm，附着丧失（AL）8~9 mm，探诊出血（BOP）（+），双侧后牙Ⅲ°松动，牙槽骨吸收至根长2/3，两侧颊黏膜和牙龈边缘处可见白色病灶，病损处黏膜呈暗红色，龈乳头处见糜烂及溃疡。对患者定期进行抗感染联合治疗（牙周基础治疗结合牙龈部醋酸曲安奈德注射）。在炎症得到控制后，依次拔除Ⅲ°松动的患牙，术后3个月行失牙区域种植修复。通过联合治疗患者OLP病情得到控制，疼痛和粗糙不适感明显减轻，牙周炎症得到有效改善，种植体与周围骨组织结合良好，双侧后牙咀嚼功能得到恢复。

通过多学科的综合治疗有效缓解了OLP患者的临床症状，并在病情控制后成功实现了OLP患者的种植修复。

建立一种简便高效的原代SD大鼠主动脉内皮细胞（AECs）培养方法，为探索AECs的分子生物学特性及开展心脑血管疾病研究提供重要的载体和工具细胞。

取SD大鼠1只，无菌打开胸腹腔，分离出主动脉，剔除血管外结缔组织和脂肪，将主动脉内膜外翻，切成长为1.0~1.5 mm的血管段后接种于培养瓶中，7 d后去除血管段继续培养。通过细胞形态表现观察和第Ⅷ因子（FⅧ）相关抗原免疫细胞化学染色鉴定目的细胞。

接种3 d后，有少量细胞从血管段周围迁移出，形成岛屿状细胞团；10~12 d后，细胞集落逐渐融合成片，铺满瓶底，呈典型的“铺路石样”镶嵌式排列。FⅧ相关抗原免疫细胞化学染色检测，细胞的胞核和胞质淡染成棕红色，表达为阳性，阳性细胞率达98%以上。

主动脉内膜外翻切段贴壁培养法能够成功分离培养出原代大鼠AECs。