吉林大学学报(医学版) 2021, 47(4) 951-957 DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210418    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R

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基础研究
氧化苦参碱对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响及其机制
张冬丽(),付瑞芳,孙桂霞
河南大学淮河医院妇科,河南 开封 475200
摘要目的

探讨氧化苦参碱(OMT)对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其作用机制。

方法

SiHa细胞分为对照组、低剂量OMT组、中剂量OMT组和高剂量OMT组,分别以含二甲基亚砜(DMSO)及含0.4、0.8和1.6 g·L-1 OMT的RPMI 1640培养基培养。培养24 h后,Hoechst33258染色法观察细胞形态表现;分别培养24、48和72 h后,MTT法检测各组细胞增殖活性;培养48 h后,流式细胞术检测各组不同细胞周期细胞百分率和凋亡率;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法分别检测各组细胞中β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA和蛋白表达水平。

结果

荧光显微镜下观察,对照组细胞生长良好,蓝色荧光较弱;低剂量OMT组细胞可见少量凋亡小体;中剂量OMT组细胞数量减少,凋亡小体数量增多;高剂量OMT组蓝色荧光增多,细胞解体,核皱缩,凋亡小体数量明显增加。与对照组比较,培养24、48和72 h后,低、中和高剂量OMT组细胞增殖活性明显降低(P<0.05),G0/G1期细胞百分率明显升高(P<0.05),S期和G2/M期细胞百分率明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中β-catenin、cyclinD1及Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bax mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。

结论

OMT可将SiHa细胞阻滞在G1期,抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

关键词: 宫颈肿瘤 氧化苦参碱 细胞增殖 细胞凋亡 β-连环蛋白
收稿日期  2020-10-26   修回日期    网络版发布日期  2021-07-22  
DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210418
基金项目: 河南省科技厅科技攻关项目(182102311175);河南省教育厅重点科研项目(17A320023);河南省开封市科技局科技攻关项目(2003015)
通讯作者: 张冬丽
作者简介: 张冬丽(1983-),女,河南省开封市人,副主任医师,医学硕士,主要从事妇科肿瘤临床方面的研究。

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