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)2.吉林省人民医院中心实验室，吉林 长春 130021
3.吉林释然司法鉴定中心法医组，吉林 长春 130022
4.吉林省人民医院神经外科，吉林 长春 130021
探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）来源外泌体（Exo）诱导自噬对１-甲基-４-苯基吡啶离子（MPP+）抑制人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞存活的影响，阐明其作用机制。
将人神经细胞肿瘤SH-SY5Y细胞分别给予不同浓度（0、0.25、0.50、1.00和2.00 mmol·L－1）MMP+作用24和48 h后检测各组细胞存活率。实验分为对照组［给予磷酸盐缓冲液（PBS）］、MPP+组（给予0.50 mmol·L－1 MPP+）、MPP++BMSCs的上清液（BMSCs-Sup）组（给予0.50 mmol·L－1 MPP+和BMSCs Sup）、MPP++BMSCs-Exo组（给予0.50 mmol·L－1 MPP+和100 mg·L－1 BMSCs Exo）、MPP++雷帕霉素（Rap）组（给予0.50 mmol·L－1 MPP+和2 mmol·L－1 Rap）和MPP++BMSCs-Exo+3-甲基腺嘌呤（3-MA）组（给予0.50 mmol·L－1 MPP+、100 mg·L－1 BMSCs-Exo和1 mmol·L－1 3-MA）。MTT法检测各组SH-SY5Y细胞存活率，共聚焦显微镜下观察吖啶橙染色后各组SH-SY5Y细胞中自噬酸性囊泡荧光强度，Western blotting法检测各组细胞中CD63、TGS101和Calnexin蛋白表达情况。
MTT检测，SH-SY5Y细胞存活率随着MPP+浓度的升高或处理时间的延长逐渐降低（P<0.05），且呈浓度和时间依赖性。与MPP+组比较，MPP++BMSCs-Sup组、MPP++BMSCs-Exo组和MPP++Rap组SH-SY5Y细胞存活率升高（P<0.05）；与MPP++BMSCs-Exo组比较，MPP++BMSCs-Exo+3-MA组SH-SY5Y细胞存活率降低（P<0.05）。细胞吖啶橙染色，与MPP+组比较，MPP++BMSCs-Sup组、MPP++BMSCs-Exo组和MPP++Rap组SH-SY5Y细胞中自噬酸性囊泡荧光强度增加（P<0.05）；与MPP++BMSCs-Exo组比较，MPP++BMSCs-Exo+3-MA组SH-SY5Y细胞中自噬酸性囊泡荧光强度降低（P<0.05）。Western blotting法检测，各组细胞中外泌体标志蛋白CD63和TGS101蛋白高表达，内质网标志蛋白Calnexin低表达。
BMSCs-Exo通过激活细胞自噬抵抗MPP+诱导的SH-SY5Y细胞存活率下降。