吉林大学学报(医学版) 2022, 48(6) 1490-1497 DOI: 10.13481/j.1671-587X.20220615 ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R | ||
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基础研究 | ||
Ghrelin对脂肪间充质干细胞神经分化的影响 | ||
杨贺然1,李兴江2,胡嘉航3,李彦伟1() | ||
1.牡丹江医学院附属红旗医院检验科,黑龙江 牡丹江 157000 2.牡丹江医学院解剖教研室,黑龙江 牡丹江 157000 3.牡丹江医学院附属红旗医院影像科,黑龙江 牡丹江 157000 |
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摘要: 目的 探讨Ghrelin联合LY294002对脂肪间充质干细胞(ADSCs)神经分化的影响,并阐明其作用机制。 方法 倒置相差显微镜下观察ADSCs形态表现,流式细胞术鉴定ADSCs表面抗体阳性表达率,将第4代ADSCs分为对照组(不进行干预)、LY294002组[给予40 μmol·L-1磷酸酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路特异抑制剂LY294002]、Ghrelin组(给予0.1 μmol·L-1 Ghrelin)、Ghrelin+LY294002组(给予40 μmol·L-1 LY294002+0.1 μmol·L-1 Ghrelin)。倒置相差显微镜下观察各组ADSCs神经分化后的形态表现,免疫荧光染色法检测各组ADSCs中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(Nestin)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞百分率,Western blotting法检测各组ADSCs中 PI3K/Akt通路蛋白表达水平,并计算磷酸化PI3K(p-PI3K)/PI3K和磷酸化Akt(p-Akt)/Akt比值。 结果 ADSCs表面抗体CD90和CD13高表达,CD34、CD45和CD106低表达。与对照组比较,LY294002组仅部分细胞由长梭形转变为类圆形胞体,突起较短、数量减少,而Ghrelin组细胞由长梭形转变为类圆形胞体速度增快;与LY294002组比较,Ghrelin+ LY294002组细胞由长梭形转变为类圆形胞体速度增快,且突起数量增加。与对照组比较,LY294002组ADSCs中NSE和Nestin阳性细胞百分率及p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值明显降低(P<0.05),Ghrelin组ADSCs中NSE和Nestin阳性细胞百分率及p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值升高(P<0.05);与LY294002组比较,Ghrelin+LY294002组ADSCs中NSE和Nestin阳性细胞百分率及p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值升高(P<0.05);各组ADSCs中GFAP阳性细胞百分率比较差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 Ghrelin通过激活PI3K/Akt通路促进ADSCs神经分化。 |
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关键词: Ghrelin LY294002 脂肪间充质干细胞 神经分化 磷酸酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路 | ||
收稿日期 2022-06-24 修回日期 网络版发布日期 2022-12-07 | ||
DOI: 10.13481/j.1671-587X.20220615 | ||
基金项目: 黑龙江省科技厅自然科学基金联合引导项目(LH2020H074) | ||
通讯作者: 李彦伟 | ||
作者简介: 杨贺然(1988-),女,黑龙江省牡丹江市人,主管技师,医学硕士,主要从事糖尿病微血管病变发病机制方面的研究。 | ||
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