目的 探讨黄芪甲苷（AS-Ⅳ）对脂多糖（LPS）诱导的成骨细胞前体细胞MC3T3-E1氧化损伤的保护作用，阐明其相关机制。 方法 将对数生长期MC3T3-E1细胞分为对照组、LPS组和不同浓度（10、25、50及100 mg·L^－1） AS-Ⅳ组，采用CCK-8法检测各组细胞活性。将对数生长期MC3T3-E1细胞分为对照组、LPS组、AS-Ⅳ组和AS-Ⅳ+LY294002［磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路抑制剂］组，采用流式细胞术检测各组细胞中活性氧（ROS）水平，采用相关试剂盒检测各组细胞中丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）水平及超氧化物歧化酶（SOD）活性，采用实时荧光定量 PCR（RT-qPCR）法检测各组细胞中血红素加氧酶1（HO-1）mRNA表达水平，采用Western blotting法检测各组细胞中HO-1、PI3K、磷酸化Akt（p-Akt）、核因E2相关因子2（Nrf2）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平。 结果 CCK-8法检测，与对照组比较，LPS组细胞活性明显降低（P<0.01）；与LPS组比较，50和100 mg?L^－1AS-Ⅳ组细胞活性明显升高（P<0.01）。与对照组比较，LPS组细胞中ROS和MDA水平明显升高（P<0.01），GSH水平和SOD活性明显降低（P<0.01）；与LPS组比较，AS-Ⅳ组细胞中ROS和MDA水平明显降低（P<0.01），GSH水平和SOD活性明显升高（P<0.01）；与AS-Ⅳ组比较，AS-Ⅳ+LY294002组细胞中ROS和MDA水平明显升高（P<0.01），GSH水平和SOD活性明显降低（P<0.01）。与对照组比较，LPS组细胞中HO-1 mRNA表达水平和HO-1、p-Akt、Nrf2及Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01），Bax蛋白表达水平明显升高（P<0.01）；与LPS组比较，AS-Ⅳ组细胞中HO-1 mRNA表达水平和HO-1、p-Akt、Nrf2及Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.01），Bax蛋白表达水平明显降低（P<0.01）；与AS-Ⅳ组比较，AS-Ⅳ+LY294002组细胞中和HO-1 mRNA表达水平和HO-1、p-Akt、Nrf2及Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01），Bax蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。 结论 AS-Ⅳ可以通过介导PI3K/Akt/Nrf2信号通路对LPS诱导的成骨细胞氧化损伤起到保护作用。

目的 探讨二氧化硫（SO₂）对链脲佐菌素（STZ）和高糖高脂饮食诱导的2型糖尿病（T2DM）大鼠心肌纤维化的改善作用及对细胞凋亡和转化生长因子β1（TGF-β1）/Smad同源物2/3（Smad2/3）通路的影响，阐明SO₂改善糖尿病心肌纤维化可能的分子机制。 方法 40只雄性SD大鼠随机分为对照组、T2DM组、T2DM+SO₂组和SO₂组。除对照组和SO₂组外，T2DM组和T2DM+SO₂组大鼠采用腹腔注射STZ（35 mg·kg^－1）和高糖高脂饮食建立T2DM大鼠模型，T2DM+SO₂组和SO₂组大鼠腹腔注射外源性SO₂供体［亚硫酸钠（Na₂SO₃）/亚硫酸氢钠（NaHSO₃），85 mg·kg^－1·d^－1］，共8周，采用Masson染色观察各组大鼠心肌组织纤维化病理形态表现，并计算各组大鼠心肌胶原容积分数，采用Western blotting法检测各组大鼠心肌组织中相关蛋白表达水平。 结果 与对照组比较，T2DM组大鼠心肌组织形态结构紊乱，心肌胶原纤维形成明显增加，心肌胶原容积分数明显升高（P<0.01），心肌组织中α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅲ型胶原（ColⅢ）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）、TGF-β1、Smad2和Smad3蛋白表达水平明显升高（P<0.01），Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01）；与T2DM组比较，T2DM+SO₂组大鼠心肌组织形态结构有所改善，心肌胶原纤维形成明显减少，心肌胶原容积分数明显降低（P<0.01），心肌组织中α-SMA、Col Ⅲ、Bax、TGF-β1、Smad2和Smad3蛋白表达水平明显降低（P<0.01），Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。与对照组比较，SO₂组大鼠上述各项指标差异均无统计学意义（P>0.05）。 结论 SO₂可通过抑制促凋亡相关蛋白和TGF-β1/Smad2/3通路蛋白表达，缓解T2DM大鼠心肌纤维化。

目的 探讨指环蛋白31（RNF31）对表皮生长因子受体（EGFR）表达的影响，并分析RNF31对EGFR的调控机制。 方法 采用免疫共沉淀（Co-IP）法验证RNF31蛋白与EGFR蛋白的相互作用。HEK293T细胞分为空载体组（转染pcDNA3.1空载体）和RNF31组（转染RNF31-Flag质粒），采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法和Western blotting法检测细胞中EGFR mRNA和蛋白表达水平。RNF31的泛素连接酶功能位点（RNF31^C699/702S）和去泛素化酶结合位点（RNF31^{N84A Y93A}）突变后，采用Western blotting法检测各组细胞中EGFR蛋白表达水平。HEK293细胞分为空载体组、RNF31组（转染RNF31-Flag质粒）、RNF31+EGFR抑制剂吉非替尼（Gefitinib）组和RNF31+EGFR抑制剂厄洛替尼（Erlotinib）组，采用Western blotting法检测各组细胞中EGFR及其下游信号通路蛋白表达水平。 结果 Co-IP 法检测，RNF31蛋白与EGFR蛋白存在相互作用。与空载体组比较，RNF31组细胞中EGFR mRNA表达水平明显降低（P<0.05）。与空载体组比较，转染RNF31^C699/702S组和野生型RNF31组细胞中EGFR蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与RNF31组比较，转染RNF31^{N84A Y93A}组细胞中EGFR蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与空载体组比较，RNF31组细胞中EGFR及其下游信号通路中核因子κB（NF-κB）、磷酸化信号传导与转录激活因子3（p-STAT3）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和磷酸化MAPK（p-MAPK）蛋白表达水平明显升高（P<0.05），RNF31+Gefitinib组和RNF31+Erlotinib组细胞中蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、STAT3和MAPK蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。 结论 RNF31通过去泛素化酶结合结构域发挥去泛素化的作用，降低EGFR蛋白分子表面的泛素化水平，使EGFR蛋白降解速率减慢，同时高表达的EGFR可以激活其下游与细胞增殖和分裂相关蛋白的表达。

目的 探讨迷迭香酸（RA）对β淀粉样蛋白1-42（Aβ_1-42）引起的星形胶质细胞损伤的保护作用及炎症因子释放的抑制作用，并阐明其相关机制。 方法 原代培养星形胶质细胞，将细胞分为对照组，Aβ_1-42组（5 μmol?L^－1），不同浓度（20，50和100 μmol?L^－1）RA+Aβ_1-42组，核因子E2相关因子2（Nrf2）抑制剂（ML385）组，ML385+RA+Aβ_1-42组。星形胶质细胞以不同浓度（20、50和100 μmol?L^－1）RA预处理24 h，再给予终浓度5 μmol?L^－1Aβ_1-42处理24 h，ML385组在加入RA前先加入终浓度10 μmol?L^－1 ML385预处理6 h。MTT法检测各组细胞活性，乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测各组细胞LDH释放率，酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测各组细胞中白细胞介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平，Griess法检测各组细胞培养液中一氧化氮（NO）水平，免疫荧光法检测各组细胞中胶质原纤维酸蛋白（GFAP）和Nrf2表达情况，Western blotting法检测各组细胞中GFAP、Nrf2、血红素加氧酶1（HO-1）蛋白表达水平。 结果 与对照组比较，Aβ_1-42组细胞活性明显降低（P<0.01），LDH释放率及细胞中IL-1β、TNF-α和NO水平明显升高（P<0.01），GFAP荧光强度明显增强， Nrf2荧光强度明显减弱，细胞中GFAP蛋白表达水平明显升高（P<0.01），Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显降低（P<0.01）；与Aβ_1-42组比较，不同浓度RA+Aβ_1-42组细胞活性明显升高（P<0.05或P<0.01），LDH释放率及细胞中IL-1β、TNF-α和NO水平明显降低（P<0.01），GFAP荧光强度明显减弱， Nrf2荧光强度明显增强，细胞中GFAP蛋白表达水平明显降低（P<0.01），Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显升高（P<0.01）；与RA（50 μmol?L^－1）+Aβ_1-42组比较，ML385+RA+Aβ_1-42组细胞活性明显降低（P<0.01），LDH释放率及细胞中IL-1β、TNF-α和NO水平明显升高（P<0.01），GFAP荧光强度明显增强， Nrf2荧光强度明显减弱，细胞中GFAP蛋白表达水平明显升高（P<0.01），Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。 结论 RA对Aβ_1-42诱导的星形胶质细胞炎症因子和NO释放有抑制作用，使星形胶质细胞免受损伤，该保护作用可能与激活Nrf2/HO-1通路有关。

目的 探讨葡萄籽原花青素提取物（GSPE）对糖尿病牙周炎大鼠牙周炎症的改善作用，并阐明其作用机制。 方法 40只雄性SD大鼠随机分为对照组、糖尿病牙周炎模型组（模型组）、低剂量（100 mg·kg^－1）GSPE组和高剂量（200 mg·kg^－1）GSPE组，每组10只，除对照组外，其他各组大鼠采用牙周结扎法联合一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病牙周炎模型。模型建立成功后，低和高剂量GSPE组大鼠分别按100和200 mg·kg^－1GSPE灌胃给药，对照组和模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃，每天1次，连续8周。观察大鼠一般情况和血糖水平变化，采用HE染色观察各组大鼠牙周组织病理形态表现，测量各组大鼠牙槽骨吸收量，采用相关试剂盒检测各组大鼠牙周组织中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性和活性氧（ROS）及丙二醛（MDA）水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）水平， Western blotting法检测各组大鼠牙周组织中Toll样受体4（TLR4）和核因子κB（NF-κB）蛋白表达水平。 结果 与对照组比较，模型组大鼠出现明显“三多一少”症状，血糖水平明显升高（P<0.05），牙周结缔组织中炎性细胞浸润，牙周组织损伤，牙槽骨吸收量明显增加（P<0.05），牙周组织中SOD和CAT活性明显降低（P<0.05），ROS和MDA水平明显升高（P<0.05），血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显升高（P<0.05），牙周组织中TLR4和NF-κB蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与模型组比较，低和高剂量GSPE组大鼠一般情况均明显好转，血糖水平明显降低（P<0.05），牙周组织损伤明显减轻，牙槽骨吸收量减少（P<0.05），牙周组织中SOD和CAT活性明显升高（P<0.05），ROS和MDA水平明显降低（P<0.05），血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显降低（P<0.05），牙周组织中TLR4和NF-κB 蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与低剂量GSPE组比较，高剂量GSPE组大鼠牙周组织中SOD和CAT活性明显升高（P<0.05），ROS和MDA水平明显降低（P<0.05），血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显降低（P<0.05），牙周组织中TLR4和NF-κB 蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。 结论 GSPE可改善糖尿病牙周炎大鼠牙周组织炎症，其作用机制与调节牙周组织中TLR4/NF-κB信号通路有关。

目的 探讨上调Mg²⁺/Mn²⁺依赖性蛋白磷酸酶1F（PPM1F）对鼻咽癌HONE-1细胞增殖、迁移的影响，并阐明其作用机制。 方法 鼻咽癌HONE-1细胞分为pcDNA3.1组（转染pcDNA3.1质粒）和pcDNA3.1-Flag-PPM1F组（转染pcDNA3.1-Flag-PPM1F质粒）。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法和Western blotting法检测2组细胞中PPM1F和E-钙黏蛋白（E-cadherin）mRNA及蛋白表达水平，CCK-8法和克隆形成实验检测2组细胞增殖活性和克隆形成率，细胞划痕实验检测2组细胞划痕愈合率，Transwell实验检测2组细胞中迁移细胞数。 结果 与pcDNA3.1组比较，pcDNA3.1-Flag-PPM1F 组细胞中PPM1F mRNA表达水平明显升高（P<0.01），且PPM1F蛋白表达量明显增加，细胞中E-cadherin mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01），细胞增殖活性、克隆形成率和划痕愈合率明显降低（P<0.05或P<0.01），迁移细胞数明显减少（P<0.05）。 结论 上调PPM1F表达能够抑制鼻咽癌HONE-1 细胞增殖和迁移，其机制可能与细胞间的黏附作用有关。

目的 探讨丙泊酚后处理对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能的改善作用及其对脑线粒体损伤的保护作用，阐明其作用机制。 方法 24只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丙泊酚后处理组，每组8只。模型组和丙泊酚后处理组大鼠采用结扎颈动脉法建立大脑中动脉阻塞局灶性脑缺血再灌注模型，丙泊酚后处理组大鼠于再灌注即刻股静脉输注20 mg·kg^－1·h^－1丙泊酚2 h，假手术组和模型组大鼠给予等量生理盐水。各组大鼠于再灌注24 h后进行神经功能缺损评分，采用HE染色法观察各组大鼠海马组织病理形态表现，采用相关试剂盒检测各组大鼠海马组织中氧化应激相关因子活性和水平，采用活性氧（ROS）荧光探针检测各组大鼠脑海马组织中ROS水平，采用TUNEL法检测各组大鼠海马组织中TUNEL阳性细胞率，采用Western blotting法检测各组大鼠海马组织中线粒体裂变、融合和生物发生相关蛋白及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯氧化酶4（Nox4）和核因子E2相关因子2（Nrf2）蛋白表达水平，免疫荧光法检测各组大鼠海马组织中Nrf2蛋白表达水平。 结果 与假手术组比较，模型组大鼠神经功能缺损评分明显升高（P<0.05），大鼠海马组织病理损伤明显，海马组织中超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和总抗氧化力（T-AOC）水平明显降低（P<0.01），丙二醛（MDA）和ROS水平及TUNEL阳性细胞率明显升高（P<0.05），动力相关蛋白1（DRP1）、裂变蛋白1（Fis1）、Nox4和Nrf2蛋白表达水平明显升高（P<0.05），视神经萎缩症蛋白1（OPA1）、线粒体融合蛋白2（Mfn2）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α（PGC-1α）和线粒体转录因子 A（TFAM）蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与模型组比较，丙泊酚后处理组大鼠神经功能缺损评分明显降低（P<0.05），大鼠海马组织病理损伤明显改善，大鼠海马组织中SOD及GSH-Px活性和T-AOC水平明显升高（P<0.05），MDA 水平、ROS水平和TUNEL阳性细胞率明显降低（P<0.05），DRP1、Fis1和Nox4蛋白表达水平明显降低（P<0.05），OPA1、Mfn2、PGC-1α、TFAM和Nrf2蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。 结论 丙泊酚后处理可抑制脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织细胞凋亡和氧化应激，促进线粒体融合和生物发生并抑制线粒体裂变，改善大鼠神经功能损伤，其机制可能与调控Nox4/Nrf2信号通路有关。

目的 阐明果蝇zeste基因增强子的人类同源物2（EZH2）抑制剂抗胰腺癌疗效不理想的可能机制，为探索新的胰腺癌治疗方案提供依据。 方法 采用不同浓度（0~50 μmol·L^－1）EZH2抑制剂GSK126分别处理胰腺癌PANC-1细胞、CFPAC-1细胞和胰腺转移癌SW1990细胞，CCK-8法检测各组细胞存活率。将3种细胞各分为对照组和GSK126组，GSK126孵育48 h后采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率，油红O染色观察各组细胞中脂滴形成情况，检测各组细胞中甘油三酯（TG）水平，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组细胞中凋亡基因含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1、3、7、9（Caspase-1、Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9）和血管内皮生长因子A（VEGFA）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）及干性标志基因CD133、CD24和CD44 mRNA表达水平，以及脂代谢相关基因脂肪酸合成酶（FASN）、乙酰辅酶A羧化酶a （ACACA）、柠檬酸合成酶（CS）、ATP柠檬酸裂解酶（ACLY）、硬脂酰辅酶A去饱和酶（SCD）和酰基辅酶A合成酶短链家族成员2 （ACSS2）mRNA表达水平。将3种细胞各分为对照组、GSK126组、FASN抑制剂奥利司他（Orlistat）组和GSK126+Orlistat组，细胞孵育48 h后，CCK-8法检测各组细胞存活率，计算两药联合指数（CI），油红O染色观察各组细胞中脂滴形成情况，检测各组细胞中TG水平，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，RT-qPCR法检测各组细胞中凋亡基因Caspase-1、Caspase-3、Caspase-7和Caspase-9及干性基因CD133、CD24和CD44 mRNA表达水平。 结果 GSK126呈浓度依赖性抑制胰腺癌细胞增殖。与对照组比较，GSK126组3种细胞凋亡率和凋亡基因mRNA表达水平差异无统计学意义（P>0.05），GSK126组SW1990细胞中VEGFA和PANC-1细胞中E-cadherin mRNA表达水平明显降低（P<0.05），3种细胞中CD133及CFPAC-1和SW1990细胞中CD24 mRNA表达水平均明显升高（P<0.01）。与对照组比较，GSK126组3种细胞中脂滴数量明显增加，TG水平和FASN mRNA表达水平均明显升高（P<0.05或 P<0.01），其他脂代谢相关基因也有不同程度升高。与对照组、GSK126组和Orlistat组比较，GSK126 +Orlistat组细胞存活率明显降低（P<0.05或P<0.01），经计算两药CI均<1，具有协同作用。与对照组、GSK126组和Orlistat组比较，GSK126+Orlistat组细胞中脂滴数量明显减少；与对照组和GSK126组比较，GSK126+Orlistat组细胞中TG水平明显降低（P<0.01），凋亡基因和干性基因mRNA表达水平明显升高（P<0.05或 P<0.01）；与对照组、GSK126组和Orlistat组比较，GSK126+ Orlistat组细胞凋亡率明显升高（P<0.01）。 结论 GSK126在抑制胰腺癌细胞增殖的同时可诱发细胞内脂代谢重编程，削弱了其抗癌效果，联合使用FASN抑制剂Orlistat可部分逆转该效应，协同抑制细胞增殖，明显增强细胞凋亡并降低干性基因表达。

目的 探讨川芎嗪（TMP）对肾结石模型大鼠肾组织氧化损伤的改善作用，阐明其可能的作用机制。 方法 健康雄性SD大鼠40只，随机分为对照组、模型组、TMP组和阳性对照组，经预实验后，除对照组外其余各组大鼠采用乙醛酸盐原液80 mg·kg^－1腹腔注射构建肾结石大鼠模型，同时TMP组大鼠采用盐酸TMP注射液100 mg·kg^－1腹腔注射，阳性对照组大鼠采用肾石通颗粒3.12 g·kg^－1灌胃，对照组大鼠采用0.9%氯化钠注射液2.5 mL·kg^－1腹腔注射，连续用药10 d。取各组大鼠肾组织切片，Von Kossa染色和HE染色观察各组大鼠肾组织中钙盐沉积情况和病理形态表现，检测各组大鼠肾组织中丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。Western blotting法检测各组大鼠肾组织中核因子E2相关因子2（Nrf2）和血红素氧合酶1（HO-1）及NAD（P）H醌：氧化还原酶1（NQO1）蛋白表达水平。 结果 与对照组比较，模型组大鼠肾组织Von Kossa染色可见明显的钙盐沉积，结晶量化分级评分明显升高（P<0.01），HE染色可见肾组织细胞出现明显的病理损伤，肾组织中MDA水平明显升高（P<0.01），SOD和GSH-Px活性明显降低（P<0.01），肾组织中Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。与模型组比较，TMP组和阳性对照组大鼠肾组织Von Kossa染色可见钙盐沉积，结晶量化分级评分明显降低（P<0.05），HE染色可见肾组织细胞病理损伤减轻，肾组织中MDA水平明显降低（P<0.01），SOD和GSH-Px活性明显升高（P<0.05），肾组织中Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。 结论 肾结石可引起大鼠肾组织氧化应激损伤，导致肾组织中氧化应激指标改变和Nrf2/抗氧化反应原件（ARE）信号通路蛋白表达水平变化，TMP干预处理后可激活该信号通路，从而发挥对肾组织氧化应激损伤的改善作用。

目的 基于网络药理学探讨锦灯笼（PCF）在白血病发生发展过程的作用，阐明其生物活性成分主要作用靶点和信号通路相关机制。 方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）数据库以“锦灯笼”为关键词检索其生物活性成分及对应的潜在靶点，并采用蛋白质数据库（PDB）和小分子药物靶点预测在线平台（Swiss Target Prediction）网站对其潜在靶点进行评估预测。采用GeneCards、OMIM和DrugBank数据库以“Leukemia”为关键词对相关靶点进行检索。利用Draw Veen Diagram在线软件将PCF生物活性成分靶点与白血病靶点交集，得到的交集靶点即为PCF作用于白血病的靶点；利用基因/蛋白相互作用检索搜查工具（STRING）数据库获取交集靶点蛋白的蛋白-蛋白互作（PPI）网络信息并进行可视化处理；采用注释可视化和集成发现数据库（DAVID）对交集基因进行基因本体（GO）生物功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析，并利用Cytoscape 3.7.2软件对PPI网络进行拓扑分析筛选核心靶点和核心活性成分，采用 AutoDock 和PyMol软件进行分子对接验证。 结果 对TCMSP数据库检索结果进行筛选后得到6个PCF活性成分，收集PCF与白血病的共同靶点29个。GO富集分析主要涉及造血或淋巴器官的发育、蛋白代谢调控和细胞凋亡等生物进程；KEGG信号通路富集分析主要包括癌症通路、肿瘤坏死因子 （TNF）和T细胞受体 （TCR） 等信号通路。拓扑网络分析得到蛋白激酶B1 （AKT1）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 （Caspase-3） 等10个核心靶点，结合KEGG信号通路筛选出核心活性成分谷甾醇和禾本甾醇。分子对接，PCF活性成分谷甾醇与原癌基因 JUN及禾本甾醇与AKT1和Caspase-3对接能均<－6.0 kcal·mol^－1，表明对接较好。 结论 PCF的主要活性成分谷甾醇和禾本甾醇可能通过调控JUN、AKT1和Caspase-3等基因参与癌症通路和TCR等信号通路，进而影响白血病的发生发展。

目的 通过3D打印技术打印多孔钛合金支架，研究其表面微弧氧化（MAO）/碱处理并加载精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）肽涂层对前成骨细胞生物学行为的影响。 方法 设计并打印3D多孔钛合金支架，对其进行不同表面处理后分为MAO组、MAO/碱处理（MN）组、MAO/碱处理加载RGD肽（MNR）组，另设空白对照组。检测各组多孔钛合金支架的弹性模量，扫描电子显微镜（SEM）观察各组多孔钛合金支架表面微观结构，能谱分析仪（EDS）检测各组多孔钛合金支架表面元素构成，接触角测量仪检测各组多孔钛合金支架表面水滴接触角大小。将小鼠胚胎成骨细胞前体细胞（MC3T3-E1细胞）与各组支架共培养，CCK-8法检测各组多孔钛合金支架表面细胞增殖活性，Live/Dead细胞染色法检测各组多孔钛合金支架的生物相容性，细胞黏附实验观察各组细胞在多孔钛合金支架表面黏附情况，采用碱性磷酸酶（ALP）试剂盒检测各组细胞ALP活性，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组细胞中Runt相关转录因子2（Runx2）、骨桥素（OPN）和骨钙素（OCN）mRNA表达水平。 结果 3D打印多孔钛合金支架的弹性模量为（1.17±0.62） GPa。SEM观察，MAO处理后的多孔钛合金支架表面呈现火山口样形貌，碱处理后出现细小裂纹并呈现纳米级鱼鳞结构，加载RGD肽涂层的多孔钛合金支架表面观察到散在的RGD颗粒。EDS检测，MNR组支架表面RGD涂层成功加载。接触角测量仪检测，多孔钛合金支架表面接触角MAO组>MN组>MNR组。CCK-8法，培养第1、3和5 天时3组细胞增殖活性均呈增长趋势，培养第3和5 天时各组细胞增殖活性组间比较差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。Live/Dead细胞染色，3组支架均具备良好的体外相容性。细胞黏附实验，共培养48 h后，MNR组细胞数量和形态伸展均优于MAO组和MN组。培养第7天时，与MAO组比较，MNR组细胞ALP活性明显升高（P<0.01），培养第14天时3组细胞ALP活性组间两两比较差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。RT-qPCR法检测，培养第7天时，与空白对照组和MAO组比较，MN组和MNR组细胞中Runx2和OPN mRNA表达水平均明显升高（P<0.01），MNR组细胞中OCN mRNA表达水平明显升高（P<0.05）；培养第14天时，MAO组、MN组和MNR组细胞中Runx2和OPN mRNA表达水平组间两两比较差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01），与空白对照组比较，MAO组、MN组和MNR组细胞中OCN mRNA表达水平均明显升高（P<0.01）。 结论 3D打印多孔钛合金支架具有与人体骨组织匹配的弹性模量，支架表面MAO/碱处理并加载RGD肽涂层对MC3T3-E1细胞无毒性且对其成骨分化有促进作用。

目的 制备担载奥沙利铂（OXA）的类弹性蛋白多肽（ELPs）水凝胶，研究其体外药物释放情况及对小鼠结肠癌CT26细胞的杀伤作用。 方法 利用大肠杆菌（E.coli）系统表达ELPs原核蛋白，利用可逆相变循环法（ITC）进行蛋白纯化，将ELPs蛋白溶液与交联剂四羟甲基氯化磷（THPC）混匀制备水凝胶，扫描电子显微镜（SEM）观察水凝胶的超微结构，CCK-8法检测不同浓度ELPs水凝胶处理后CT26细胞和小鼠成纤维NIH3T3细胞存活率，活/死细胞染色法观察30和40 g?L^－1 ELPs水凝胶作用48 h后CT26细胞存活情况。制备载OXA的ELPs水凝胶，检测其在不同pH值（6.5和7.4）缓冲液中的药物释放情况，CCK-8法检测加入载不同浓度（0.25、1.00、4.00、16.00和64.00 mg?L^－1）OXA的ELPs水凝胶浸泡液后各组CT26细胞存活率和处理不同时间各组CT26细胞存活率。 结果 凝胶电泳分析，E.coli诱导后在预计相对分子质量38 000附近出现明显加粗的蛋白条带，ITC纯化后泳道中无明显杂蛋白存在。ELPs蛋白溶液中加入THPC后由透明液体状态转变为不透明的白色水凝胶，SEM观察显示出排列整齐的孔隙和三维结构；CCK-8法检测，经不同浓度ELPs蛋白处理后CT26细胞和NIH3T3细胞存活率仍接近100%；活/死细胞染色，ELPs水凝胶处理后的CT26细胞在荧光显微镜下呈现明亮的绿色荧光。载OXA的ELPs水凝胶能在体外持续释放OXA，在pH值6.5条件下OXA的释放速度较pH值7.4条件下稍快；CCK-8法检测，载不同浓度OXA的ELPs水凝胶浸泡液呈剂量依赖性抑制CT26细胞增殖，且随孵育时间的延长CT26细胞存活率逐渐降低。 结论 载OXA的ELPs水凝胶具有持续释放OXA的特性，能够高效且持续地杀伤小鼠结肠癌CT26细胞，可作为一种安全有效的药物递送载体用于抗肿瘤研究。

目的 探讨人环状RNA_0114428（circ_0114428）对脂多糖（LPS）诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤的作用，阐明circ_0114428通过调节微小RNA-139-5p（miR-139-5p）/转化生长因子β受体2（TGFBR2）轴改善HK-2细胞损伤的可能分子机制。 方法 体外培养HK-2细胞，双荧光素酶报告基因实验验证miR-139-5p与circ_0114428和TGFBR2的靶向调控关系，CCK-8法筛选合适的LPS干预浓度和时间。给予10 mg·L^－1 LPS干预12 h构建HK-2细胞损伤模型，HK-2细胞分为对照组、LPS组、LPS+circ_0114428沉默对照（LPS+si-NC）组、LPS+circ_0114428沉默（LPS+si-circ_0114428）组、LPS+circ_0114428沉默+miR-139-5p抑制剂对照（LPS+si-circ_0114428+in-NC）组和LPS+circ_0114428沉默+miR-139-5p抑制剂（LPS+si-circ_0114428 +in-miR-139-5p）组，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组细胞中circ_0114428、miR-139-5p和TGFBR2 mRNA表达水平，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，Western blotting法检测各组细胞中TGFBR2、B细胞淋巴瘤2 （Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细胞上清液中白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素1β（IL-1β）水平。 结果 双荧光素酶报告基因实验，miR-139-5p与circ_0114428和TGFBR2存在靶向调控关系（t=10.171，P<0.05；t=7.682，P<0.05）。CCK-8法检测LPS干预的最佳浓度为10 mg·L^－1，最佳干预时间为12 h。与对照组比较，LPS组HK-2细胞中circ_0114428表达水平、TGFBR2 mRNA和蛋白表达水平、Bax蛋白表达水平、细胞凋亡率及细胞上清液中IL-6、TNF-α和IL-1β水平均明显升高（P<0.05），miR-139-5p表达水平和Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与LPS+si-NC组比较，LPS+si-circ_0114428组HK-2细胞中circ_0114428表达水平、TGFBR2 mRNA和蛋白表达水平、Bax蛋白表达水平、细胞凋亡率及细胞上清液中IL-6、TNF-α和IL-1β水平均明显降低（P<0.05），miR-139-5p表达水平和Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与LPS+si-circ_0114428+in-NC组比较，LPS+si-circ_0114428+in-miR-139-5p组HK-2细胞中circ_0114428表达水平、TGFBR2 mRNA和蛋白表达水平、Bax蛋白表达水平、细胞凋亡率及细胞上清液中IL-6、TNF-α和IL-1β水平均明显升高（P<0.05），miR-139-5p表达水平和Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。 结论 circ_0114428能减轻LPS诱导的HK-2细胞损伤，其作用机制可能与调节miR-139-5p/TGFBR2轴有关。

目的 探讨霍山石斛多糖（DHP）对1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP）诱导的帕金森病（PD）小鼠大脑纹状体中多巴胺（DA）水平、黑质中相关炎症因子水平和抗氧化酶活力的影响，阐明DHP对PD的改善作用。 方法 C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组和不同剂量（25、50及100 mg·kg^－1）DHP组，除对照组外，其余各组小鼠采用腹腔注射MPTP的方法建立PD小鼠模型，不同剂量DHP组小鼠建模后分别灌胃给予不同剂量DHP，对照组和模型组小鼠灌胃给予等量生理盐水。采用转棍法检测各组小鼠行为表现，高效液相色谱（HPLC）法检测各组小鼠脑纹状体中DA水平，化学比色法检测各组小鼠脑黑质中丙二醛（MDA）水平及超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测各组小鼠脑黑质中白细胞介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。 结果 与对照组比较，模型组小鼠转棍实验中掉落潜伏期明显缩短（P<0.05）；与模型组比较，50和100 mg·kg^－1 DHP组小鼠转棍实验中掉落潜伏期明显延长（P<0.05）。与对照组比较，模型组小鼠脑纹状体中DA水平明显降低（P<0.05）；与模型组比较， 50和100 mg·kg^－1 DHP组小鼠脑纹状体中DA水平明显升高（P<0.05）。与对照组比较，模型组小鼠脑黑质中MDA水平明显升高（P<0.05），SOD和GSH-Px活性明显降低（P<0.05）；与模型组比较，50和100 mg·kg^－1 DHP组小鼠脑黑质中MDA水平明显降低（P<0.05），SOD和GSH-Px活性明显升高（P<0.05）。与对照组比较，模型组小鼠脑黑质中IL-1β和TNF-α水平明显升高（P<0.05）；与模型组比较，50和100 mg·kg^－1 DHP组小鼠脑黑质中IL-1β和TNF-α水平明显降低（P<0.05）。 结论 DHP对MPTP诱导的PD小鼠具有一定的神经功能保护作用，其作用机制可能与抑制氧化损伤和降低神经炎性反应有关。

目的 探讨miR-216b-5p对喉鳞状细胞癌（LSCC）TU686细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响，分析其在喉癌细胞中的靶基因及其可能的作用机制。 方法 TU686细胞分为对照组和miR-216b-5p组，对照组细胞通过慢病毒感染无义序列，miR-216b-5p组细胞通过慢病毒感染过表达miR-216b-5p。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测2组细胞中miR-216b-5p表达水平，克隆形成实验检测2组细胞克隆形成率，细胞划痕实验检测2组细胞划痕愈合率，Transwell实验检测2组细胞中侵袭细胞数，流式细胞术检测2组细胞凋亡率。通过TargetScan网站预测miR-216b-5p的潜在靶基因，采用RT-qPCR法检测靶基因mRNA表达水平，双荧光素酶报告基因实验检测miR-216b-5p与靶基因间的靶向关系。 结果 慢病毒感染后，与对照组比较，miR-216b-5p组细胞中miR-216b-5p表达水平明显升高（P<0.01）。与对照组比较，miR-216b-5p组细胞克隆形成率和划痕愈合率明显降低（P<0.01），侵袭细胞数明显减少（P<0.01），细胞凋亡率明显升高（P<0.01）。TargetScan网站预测，自噬相关基因5（ATG5）为miR-216b-5p潜在的靶基因，与对照组比较，miR-216b-5p组细胞中ATG5 mRNA表达水平明显降低（P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验证实ATG5与miR-216b-5p之间存在靶向关系。 结论 miR-216b-5p通过抑制喉癌细胞的增殖、迁移、侵袭和诱导细胞凋亡进而发挥抑癌作用，其机制可能与靶向调节ATG5的表达水平有关。

目的 探究miR-150-5p与非SMC凝聚体Ⅰ复合物亚基G（NCAPG）的靶向关系及其对肝细胞肝癌（HCC）细胞生物学功能的影响，为HCC的临床诊断和治疗提供潜在靶点。 方法 通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-150-5p与NCAPG的靶向关系。将HCC Huh7细胞根据转染质粒不同分为模拟物阴性对照（mimic NC）组、miR-150-5p模拟物（miR-150-5p mimic）组、miR-150-5p模拟物+过表达阴性对照（miR-150-5p mimic+ovNC）组和miR-150-5p模拟物+过表达NCAPG（miR-150-5p mimic+ovNCAPG）组。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组细胞中NCAPG mRNA表达水平，Western blotting法检测各组细胞中NCAPG蛋白表达水平，5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷（EdU）实验检测各组细胞EdU阳性率，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，Transwell实验检测各组细胞中迁移和侵袭细胞数。将裸鼠分为agomiR-NC组、agomiR-150-5p组、agomiR-150-5p+过表达阴性对照（agomiR-150-5p+ovNC）组和agomiR-150-5p+过表达NCAPG（agomiR-150-5p+ovNCAPG）组，Huh7细胞皮下成瘤，检测各组裸鼠肿瘤体积和质量。 结果 双荧光素酶报告基因实验证实NCAPG是miR-150-5p的靶基因。与mimic NC组比较，miR-150-5p mimic组Huh7细胞中NCAPG mRNA和蛋白表达水平及EdU阳性率明显降低（P<0.05），细胞凋亡率明显升高（P<0.05），迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少（P<0.05）；与miR-150-5p mimic+ovNC组比较，miR-150-5p mimic+ovNCAPG组Huh7细胞中NCAPG mRNA和蛋白表达水平及EdU阳性率明显升高（P<0.05），细胞凋亡率明显降低（P<0.05），迁移细胞数和侵袭细胞数明显增加（P<0.05）。与agomiR-NC比较，agomiR-150-5p组裸鼠Huh7细胞移植瘤体积和质量明显减少（P<0.05）；与agomiR-150-5p+ovNC组比较，agomiR-150-5p+ovNCAPG组裸鼠Huh7细胞移植瘤体积和质量明显增加（P<0.05）。 结论 miR-150-5p通过靶向结合抑制NCAPG表达进而抑制HCC细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤生长，促进细胞凋亡。

目的 探讨加入粪肠球菌后轮状病毒SA11株在体内和体外的复制情况，为阐明粪肠球菌影响轮状病毒感染提供依据。 方法 体外实验，将10⁸~10¹² CFU·mL^－1粪肠球菌进行10倍浓度梯度稀释，与Caco-2细胞共培养12、18、24、30和48 h，同时设对照组（Caco-2细胞感染轮状病毒后不加入粪肠球菌），采用CCK-8法检测不同浓度粪肠球菌作用后各组Caco-2细胞存活率；感染复数（MIO）值为0.1的轮状病毒作用于Caco-2细胞1 h后加入10⁸~10¹² CFU·mL^－1粪肠球菌培养18 h，同时设对照组，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组Caco-2细胞中轮状病毒VP6基因拷贝数，免疫荧光灶法检测各组Caco-2细胞中轮状病毒滴度。体内实验，采用18窝4~5日龄SPF级昆明系乳鼠，相同窝数随机分为对照组、抗生素处理组和粪肠球菌移植组，抗生素处理组和粪肠球菌移植组乳鼠先用四联抗生素灌胃3 d耗竭其肠道菌群，然后3组乳鼠开始每日灌胃10⁷ FFU·mL^－1轮状病毒100 μL，持续8 d，粪肠球菌移植组乳鼠在灌胃病毒同时灌胃10¹⁰ CFU·mL^－1粪肠球菌100 μL，收取病毒感染第2、4、6和8天各组乳鼠粪便，RT-qPCR法检测各组乳鼠粪便中轮状病毒拷贝数。 结果 体外实验， CCK-8法检测，与对照组比较，不同浓度粪肠球菌作用48 h内各组Caco-2细胞存活率均有不同程度升高，表明粪肠球菌在该浓度范围内对Caco-2细胞无毒性；RT-qPCR法检测，与对照组比较，10¹⁰、10¹¹和10¹² CFU·mL^－1粪肠球菌组Caco-2细胞中轮状病毒VP6基因拷贝数分别降低了75.8%、99.9%和99.9%（P<0.05）；免疫荧光灶法检测，与对照组比较，10⁸、10¹⁰和10¹² CFU·mL^－1粪肠球菌组Caco-2细胞中轮状病毒滴度分别降低13%、77%和100%（P<0.05）。体内实验，与对照组比较，粪肠球菌移植组乳鼠粪便中病毒基因拷贝数明显减少（P<0.05）。 结论 在体外细胞模型和乳鼠感染轮状病毒模型中粪肠球菌对轮状病毒的复制均发挥抑制作用。

目的 利用生物信息学方法筛选与肺腺癌（LUAD）患者生存相关的可变剪接（AS）事件，构建剪接因子（SF）-AS调控网络，为LUAD患者的预后评价提供新思路。 方法 由癌症基因组图谱（TCGA）数据库中下载LUAD患者转录组数据和临床数据。从SF表达和RNA靶点（SpliceAid2）数据库中下载LUAD患者AS数据。对LUAD患者生存相关AS事件进行单因素Cox回归分析。采用LASSO回归分析和多因素Cox回归分析构建LUAD患者预后风险模型，基于该模型计算每种AS事件的风险评分，采用 Kaplan-Meier（K-M）生存分析和受试者工作特征曲线（ROC）评价模型的可靠性。通过Cox 回归分析风险模型、临床参数与LUAD患者独立预后的关系。采用Pearson检验对SF和与预后相关的AS事件进行相关性分析，并通过Cytoscape软件构建SF-AS互作网络。 结果 筛选获取与生存相关的AS事件43 948个，共7种类型，主要以外显子活跃（ES）事件和可变终止子（AT）事件为主。构建AS事件预后风险模型，基于该模型风险评分将LUAD患者分为高风险组和低风险组，K-M生存分析，高风险组LUAD患者总生存（OS）率较低风险组低（P<0.05）。ROC曲线分析，LUAD患者预后风险模型预测性良好，曲线下面积（AUC）为0.824。SF-AS调控网络，12个与预后相关SFs正向或负向调节AS事件，可预测LUAD患者的不良预后。 结论 筛选了与LUAD患者预后相关的AS事件和上游的调控因子SF，构建了SF-AS网络，为进一步研究AS事件与LUAD患者预后的相关性提供理论依据。

目的 分析微小RNA-223（miR-223）在卵巢癌组织中的表达情况，探讨miR-223对卵巢癌OVCAR3细胞增殖和侵袭的影响，并阐明其分子调控机制。 方法 采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测45例卵巢癌患者手术切除组织样本和不同卵巢癌细胞中miR-223表达水平，分析不同临床病理特征卵巢癌患者癌组织中miR-223表达水平。体外培养卵巢癌OVCAR3细胞，采用生物信息学、双荧光素酶报告基因实验和Western blotting法分析miR-223对N-myc下游调节基因1（NDRG1）的靶向调控关系。OVCAR3细胞分别转染阴性对照模拟物（NC组）、miR-223 抑制剂（MiR in组）和同时转染miR-223 抑制剂及siRNA-NDRG1质粒（MiR in+si-NDRG1组），克隆形成实验检测各组细胞克隆形成数，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，Transwell小室实验检测各组细胞中侵袭细胞数。 结果 与癌旁正常组织比较，卵巢癌组织中miR-223表达水平明显升高（P<0.01），miR-223表达水平与卵巢癌患者组织学分化程度、FIGO分期和淋巴结转移有密切关联（P<0.01）。不同卵巢癌细胞中miR-223表达水平均高于正常卵巢上皮细胞（P<0.01）。miR-223可靶向结合NDRG1并抑制NDRG1的表达，且在卵巢癌组织中NDRG1 mRNA表达水平与miR-223表达水平呈负相关关系（r=－0.291，P<0.01）。与NC组比较，MiR in组细胞中克隆形成数和侵袭细胞数均明显减少（P<0.05或P<0.01），细胞凋亡率明显升高（P<0.01）；与MiR in组比较，MiR in+si-NDRG1组细胞中克隆形成数和侵袭细胞数明显增加（P<0.05或P<0.01），细胞凋亡率明显降低（P<0.01）。 结论 MiR-223在卵巢癌组织中呈高表达，其表达水平与卵巢癌的严重程度有密切关联。miR-223可通过靶向抑制NDRG1表达促进卵巢癌细胞增殖和侵袭，并抑制细胞凋亡。

目的 分析体外受精-胚胎移植（IVF-ET）患者发生异位妊娠的影响因素，并建立列线图模型预测IVF-ET患者发生异位妊娠的风险。 方法 制定研究对象的纳入和排除标准，回顾性分析522例接受IVF-ET且成功妊娠患者的临床资料，用于建模和内部验证；参照上述纳入和排除标准，筛选非本院的1 126例IVF-ET且成功妊娠患者的临床资料，用于外部验证。记录患者的基线资料，依据IVF-ET患者是否发生异位妊娠情况分为异位妊娠发生组和异位妊娠未发生组，采用Logistic回归分析IVF-ET患者发生异位妊娠的影响因素，并基于上述影响因素建立预测IVF-ET患者发生异位妊娠的列线图模型；采用Bootstrap法进行模型验证，计算一致性指数（C-index），检验模型准确性；采用受试者工作特征曲线（ROC）下面积（AUC）和校准曲线评估列线图模型的区分度和校准度。 结果 内部验证组522例患者中，有45例患者发生异位妊娠，发生率为8.62%；对比异位妊娠发生组和异位妊娠未发生组患者基线资料后进行Logistic回归分析，宫腔操作史、吸烟史、盆腔炎性疾病史、既往异位妊娠史、注射人绒毛膜促性腺激素（hCG）当天血雌二醇（E2）水平升高是IVF-ET患者发生异位妊娠的影响因素（OR>1，P<0.05）。构建预测IVF-ET患者发生异位妊娠的列线图模型，采用Bootstrap内部验证法验证，模型校准度良好，C-index为0.702，表明模型具有良好的区分度。对列线图模型进行内部验证，绘制ROC曲线，列线图模型预测IVF-ET患者异位妊娠发生风险的AUC为0.735（>0.70），有一定预测价值；对列线图模型进行外部验证，绘制ROC曲线，列线图模型预测IVF-ET患者异位妊娠发生风险的AUC为0.862（>0.80），有较好的预测价值。 结论 IVF-ET患者发生异位妊娠受宫腔操作史、吸烟史、盆腔炎性疾病史、既往异位妊娠史和注射hCG当天血E2水平等多种因素影响，基于多个影响因素建立的列线图模型为临床合理预测IVF-ET患者异位妊娠发生风险提供了有效方法。

目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者妊娠期外周血中滤泡辅助性T淋巴细胞（Tfh）的变化，并阐明Tfh细胞在妊娠期SLE患者中的免疫作用。 方法 选取来自山东省青岛市市立医院和青岛市妇女儿童医院就诊的SLE患者，分为SLE妊娠组32例和SLE未妊娠组30例，以健康妊娠组（健康妊娠妇女）30例和健康未妊娠组（健康未妊娠妇女）25例为对照，SLE妊娠组32例患者（随访丢失2例）根据妊娠期间和终止妊娠后3个月内病情变化分为SLE妊娠预后不良组（8例）和SLE妊娠临床稳定组（22例），收集各组受试者临床资料和实验室检查指标。采用流式细胞术检测各组受试者外周血中CD4+诱导性T细胞共刺激因子（ICOS）+趋化因子C-X-C-基元受体5（CXCR5）+Tfh细胞占CD4+T淋巴细胞百分率（Tfh细胞百分率），采用Spearman相关分析检验SLE妊娠组患者外周血中Tfh细胞百分率与患者实验室检查指标的相关性，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组受试者外周血中白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素21（IL-21）和干扰素γ（IFN-γ）水平。 结果 与健康妊娠组比较，SLE妊娠组患者外周血中Tfh细胞百分率明显升高（P<0.01），健康未妊娠组受试者外周血中Tfh细胞百分率明显降低（P<0.05）；与SLE未妊娠组比较，SLE妊娠组患者外周血中Tfh细胞百分率明显升高（P<0.05）。随访中，与SLE妊娠临床稳定组比较，SLE妊娠预后不良组患者外周血中Tfh细胞百分率明显升高（P<0.05）。SLE妊娠组患者外周血中Tfh细胞百分率与抗心磷脂抗体（ACA）-IgG和抗β2糖蛋白Ⅰ（β2GPⅠ）抗体滴度均呈正相关关系（r=0.743 1，P<0.05；r=0.830 7，P<0.01）。与健康妊娠组比较，SLE妊娠组患者外周血中IL-6和IL-21水平明显升高（P<0.05）；与SLE未妊娠组比较，SLE妊娠组患者外周血中IL-21水平明显升高（P<0.05）。 结论 SLE患者妊娠早期外周血中Tfh细胞百分率升高可能与SLE患者妊娠预后不良有关。

目的 分析高龄住院共病患者衰弱状态的影响因素，为其早期干预提供参考。 方法 选取 2017年4月—2021年6月在山东大学第二医院南部院区（济南善德养老院）老年科住院治疗的高龄共病患者124例，收集其临床资料和实验室检查指标，包括年龄、性别、体质量指数（BMI）、文化程度、白蛋白（ALB）水平、白细胞（WBC）计数、C反应蛋白（CRP）水平、血红蛋白（Hb）水平、血肌酐（SCr）水平和血尿素氮（BUN）水平，并进行老年综合评估，采用 FRAIL量表评估患者的衰弱状态，根据FRAIL量表评分将患者分为衰弱组和非衰弱组。对高龄住院共病患者衰弱状态的影响因素进行单因素分析和二元多因素 Logistic 回归分析。 结果 本研究中高龄共病患者124例，其中衰弱组68例（54.84%），非衰弱组 56 例（45.16%）。2组患者BMI、简易营养评价精法（MNA-SF）评分、查尔森并发症指数（CCI）评分、睡眠状态、认知功能状态和Hb、SCr及BUN水平比较差异均有统计学意义（P<0.05）。二元多因素Logistic 回归分析， MNA-SF评分（OR=0.511，95%CI：0.373~0.700，P<0.01）是高龄住院共病患者衰弱的保护因素，而CCI评分（OR=2.612，95%CI：1.627~4.191，P<0.01）是高龄住院共病患者衰弱的独立危险因素。 结论 高龄住院共病患者衰弱发生率高，营养状态和共病程度是患者衰弱发生的独立影响因素。

目的 收集1例以癫痫和坏死性小肠结肠炎为主要表现的Sotos综合征患儿的临床资料，分析该病明确诊断、抗癫痫治疗和并发症随访的重要性。 方法 患儿，男，21个月。临床表现为发育迟缓和抽搐反复发作，查体发现过度生长，面容特殊。既往新生儿期有坏死性小肠结肠炎病史。结合患儿临床和遗传学资料进行诊断，分析诊疗过程，并结合相关文献进行总结。 结果 结合本例患儿临床表现、辅助检查和基因检测结果诊断为Sotos综合征和癫痫。予康复治疗1年3个月后发育迟缓有所改善，继续康复随访。予左乙拉西坦单药抗癫痫治疗1月后抽搐完全控制未再发作，复查脑电图正常。患儿新生儿期出现呕吐和血便，结合腹部彩超及X线检查诊断为坏死性小肠结肠炎和结肠穿孔，予非手术保守治疗20余天后症状逐渐改善并痊愈。 结论 对于临床疑似Sotos综合征的患儿，建议行基因检测明确诊断并对症治疗，积极进行康复治疗改善患儿发育迟缓，伴癫痫发作者应积极合理使用抗癫痫药物治疗。新生儿期坏死小肠结肠炎为Sotos综合征中首次发现的临床表现，可为该综合征基因型与表型关系的研究提供参考。

目的 分析非霍奇金淋巴瘤并发人类冠状病毒（HCoV）-HKU1肺炎患者的临床表现、诊断方法和治疗过程，以提高临床医务人员对于该病的认识，减少临床不良事件的发生。 方法 分析2021年1月于本院住院的1例以夜间潮热盗汗、干咳和咽干为主要临床表现的非霍奇金淋巴瘤并发HCoV-HKU1肺炎患者的临床资料，并对既往相关研究文献进行复习，分析其临床表现和诊断经过。 结果 患者，女性，因确诊非霍奇金淋巴瘤2月余入院。查体，卡氏评分90分，全身浅表淋巴结未扪及肿大，右下腹部轻压痛，无反跳痛，双肺呼吸音稍粗，双下肺可闻及少许湿啰音。胸部CT显示双肺弥漫性渗出灶，尿液分析中白细胞数158 μL^－1，采用第二代基因测序技术（NGS）检测肺泡灌洗液明确诊断为HCoV-HKU1肺炎。患者入院时有右下腹隐痛、夜间咳嗽和盗汗等症状，予奥司他韦抗病毒治疗无效，予复方磺胺甲恶唑片联合连花清瘟颗粒治疗后呼吸道症状消失，复查胸部CT提示渗出灶已吸收。 结论 非霍奇金淋巴瘤并发HCoV-HKU1肺炎患者临床症状无特异性，临床出现肺部弥漫性阴影改变而新型冠状病毒核酸检测阴性时，仍需重视其他HCoV感染的可能。通过NGS可以高效筛选感染病原体，有利于更加精准地指导肺部感染性疾病的诊断和治疗。

目的 探讨外阴血管肌纤维母细胞瘤（AMFB）复发患者的临床特征、诊断过程和治疗方法，旨在提高临床医生对该病的认识。 方法 收集1例复发性外阴AMFB患者的临床资料、影像学检查结果、病理检查结果和免疫组织化学检测结果，分析上述资料并进行相关文献复习。 结果 患者，女性，50岁，5年前因外阴肿物于当地医院行外阴肿物病灶切除术，术后病理提示AMFB。现因自觉外阴部肿物6个月，高度怀疑外阴AMFB复发入院。妇科检查，左侧大阴唇下方可见肿物凸起，表面皮肤完整，肿物深部凸向直肠，与肠管界限不清，大小约为5.0 cm×4.0 cm×4.0 cm，形态尚规则，界限尚清，活动性欠佳，无明显压痛，无溃破和皮损。浅表超声显示左侧大阴唇处可见范围约5.0 cm×4.0 cm×4.0 cm的稍低无回声光团，其内可见多处团状高回声；彩色多普勒血流显像（CDFI）示内部及周边可见血流信号。行外阴肿物切除术，结合术后病理和免疫组织化学诊断为外阴AMFB复发。 结论 AMFB虽较少见复发及恶变，但应高度重视AMFB的术后随访，以减少复发并提高治愈率。

目的 探讨关节镜在颞下颌关节滑膜软骨瘤病患者手术治疗中的应用，阐明其对提高该病的临床诊治效率和改善患者预后的价值。 方法 收集2例应用关节镜行颞下颌关节滑膜软骨瘤病手术治疗患者的临床资料，通过比较患者术前和术后半年的开口度、最大前伸及侧方运动和关节区疼痛的改善情况，对手术经过进行总结，结合文献复习分析关节镜用于该手术的意义。 结果 本组2例颞下颌关节滑膜软骨瘤病患者均选择开放性手术与关节镜结合的治疗方法，在关节镜的辅助下，开放手术彻底清除软骨瘤体，同时去除炎性滑膜组织，患者术后半年开口度分别达到33和35 mm，最大前伸及侧方运动均≥7 mm，关节功能逐渐恢复。 结论 关节镜在颞下颌关节滑膜软骨瘤病患者手术治疗中具有明显优势，但完全在关节镜下进行手术受关节复杂结构的限制，若瘤体过大或不局限于关节上腔时需结合关节镜进行开放性手术。

目的 探讨对无症状的绝经期肺良性转移性平滑肌瘤（PBML）患者不行任何治疗和仅定期随访的策略是否可行，为该病的诊断、治疗和预后提供参考。 方法 回顾性分析1例PBML患者的临床表现、检查结果和随访结果，并结合文献资料，探讨其发病机制和治疗措施。 结果 患者，女性，52岁。因体检发现双肺多发结节入院。既往因多发子宫平滑肌瘤行子宫全切术。入院后查体无明显肺部体征，影像学检查提示双肺多发类圆形结节状密度增高影。行左肺病灶电子计算机断层扫描（CT）引导下经皮穿刺肺内结节活检术，病理学检查诊断为PBML，且雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）阳性。患者性激素水平处于绝经期，遂未进行任何治疗，定期影像学检查随访。经皮肺穿刺术后5、11、20和34个月CT检查随访提示双肺结节未见明显增大，随访至41个月患者无不适症状。 结论 无症状且激素水平处于绝经期的女性PBML患者可不进行治疗，仅需进行定期影像学随访。

目的 分析中枢神经系统淋巴瘤（CNSL）并发干燥综合征（SS）患者的临床表现及诊疗过程，并探讨其发病机制，为该类罕见疾病的诊断提供参考。 方法 收集1例CNSL并发SS患者的临床资料，对其诊断经过进行总结，并结合相关文献进行归纳复习。 结果 患者，女性，51岁。因口干、眼干伴恶心和呕吐1月余入院。查体，舌面干，时有躁动，四肢肌力4级，左侧指鼻试验欠稳准，左侧跟膝胫试验欠稳准，昂白征阳性，双侧病理征阳性。实验室检查，抗干燥综合征抗体A（抗SSA抗体）和抗干燥综合征抗体B（抗SSB抗体）阳性。泪液分泌实验，左侧5 mm；角膜染色阳性，唾液腺同位素检查阳性。影像学检查，头颅增强磁共振成像（MRI）示双侧小脑半球内侧、视交叉、垂体柄和松果体可见多发异常强化信号；头颅磁共振波谱（MRS）提示N-乙酰天门冬氨酸（NAA）峰和肌酸（Cr）峰减低，胆碱（Cho）峰升高，NAA/Cr=1.74，Cho/Cr=3.52，Cho/NAA=2.02，并可见乳酸（Lac）峰和脂质（Lip）峰，双侧小脑半球病变单和多体素¹H-MRS改变。取活检病理检查提示高级别B细胞淋巴瘤伴出血，临床诊断为CNSL并发SS。出院后于当地医院进行放化疗。 结论 CNSL并发SS发病率低，易误诊为中枢神经系统脱髓鞘病变，临床上SS患者出现中枢神经系统症状和体征时应考虑CNSL的可能。

目的 采用化学和热传导双重损伤法构建大鼠宫腔黏连（IUA）模型，阐明该方法作为化学损伤的改良方法构建接近 IUA 病理学变化动物模型的特点和优势。 方法 6 只 6~8 周龄雌性 SD 大鼠随机分为化学损伤组和化学及热传导双重损伤组（双重损伤组），每组3只。以大鼠左侧宫角为实验组，右侧宫角为自身对照组。化学损伤组大鼠左侧宫角作为化学损伤实验组采用95% 乙醇作用3 min，右侧宫角作为化学损伤自身对照组不进行任何处理；双重损伤组大鼠左侧宫角作为双重损伤实验组采用95% 乙醇作用 3 min 后100 ℃ 热水再处理1 min，右侧宫角作为双重损伤自身对照组不进行任何处理。造模术后第14天，采用 HE染色、Masson 染色和 Ki67 免疫组织化学染色法检测各组大鼠子宫内膜厚度、腺体数量、纤维化面积比及腺体上皮细胞和基质细胞的增殖指数（PI）。 结果 HE 染色，与相对应的自身对照组比较，化学损伤实验组和双重损伤实验组大鼠子宫内膜厚度和腺体数量明显减少（P<0.05）；与化学损伤实验组比较，双重损伤实验组大鼠子宫宫腔封闭，子宫内膜厚度和腺体数量均明显减少（P<0.05）。Masson 染色，与相对应的自身对照组比较，化学损伤实验组和双重损伤实验组大鼠子宫内膜层呈纤维化增生，子宫内膜组织中纤维化面积比明显升高（P<0.05）；与化学损伤实验组比较，双重损伤实验组大鼠子宫内膜层可见纤维化黏连带和完整肌层，子宫内膜组织中纤维化面积比明显升高（P<0.05）。Ki67 免疫组织化学染色，与相对应的自身对照组比较，化学损伤实验组和双重损伤实验组大鼠子宫内膜组织中腺体上皮细胞核形状和排列发生改变，基质细胞 PI 明显升高（P<0.05）。 结论 化学和热传导双重损伤法操作简便且可重复性好，可为 IUA 治疗的安全性评价、机制研究和临床转化提供具有纤维化黏连带和完整肌层的IUA模型，具有良好的应用前景。

目的 采用聚合酶链式反应（PCR）技术和胶体金技术建立一种呼吸道真菌感染核酸胶体金试纸条检测方法，并对其检测效果进行评价。 方法 根据GenBank数据库选择真菌内转录间隔区（ITS）基因片段作为靶基因，应用DNAMAN软件对真菌ITS基因片段进行分析，并分别在真菌通用引物5'端用生物素（Biotin）和异硫氰酸荧光素（FITC）进行修饰标记；建立PCR体系，进行体系的最佳条件优化；确定胶体金免疫层析试纸条标记链霉亲和素的最佳标记量和质控线及检测线最佳包被物浓度，组装核酸胶体金试纸条，对试纸条的特异度、灵敏度、重复性和稳定性进行验证。 结果 水煮法提取白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌DNA，浓度为180 μg·L^－1以上，纯度为1.60~2.10；在pH 7.0条件下，每100 μL胶体金溶液中制备胶体金标记链霉亲和素最佳标记量为 3.3 μg，质控线包被Biotin化牛血清白蛋白（BSA-Biotin）浓度为2.00 g·L^－1，检测线包被抗FITC抗体浓度为1.00 g·L^－1。核酸试纸条的特异度与电泳结果一致，仅白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌出现阳性结果，与金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、乙型溶血性链球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和大肠埃希菌等常见呼吸道感染细菌无交叉反应。灵敏度检测，白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌的DNA浓度分别为10^－4、10^－2和10^－3 mg·L^－1时核酸试纸条仍可准确检出，而普通PCR电泳结果显示白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌最低检测浓度分别为0.01、1.00和0.10 mg·L^－1；重复性检测，在不同实验室不同操作人员对核酸试纸条进行验证，结果一致，重复性良好；稳定性检测，核酸试纸条在第6、9和12个月进行检测，结果符合预期，稳定性良好。 结论 本研究建立的呼吸道真菌感染核酸胶体金试纸条可以检测白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌等真菌，特异度和灵敏度均较高，操作简便且快速。

线粒体内膜蛋白（IMMT）是由核基因编码的线粒体内膜蛋白，该核基因产生2种同种型蛋白质（相对分子质量分别为88 000和90 000 ），是一种关键的跨膜蛋白，在线粒体功能、蛋白质转运、线粒体DNA转录、三磷酸腺苷（ATP）生成和细胞凋亡中起关键作用，IMMT下调、修饰或破坏将导致线粒体功能障碍和细胞死亡，IMMT参与包括肿瘤等多种疾病的发生发展过程。现对IMMT的结构和功能及IMMT与疾病的关系进行简要概述，主要对IMMT在多个系统肿瘤中作用的相关研究进行较全面的综述，以寻找与线粒体和肿瘤相关的标志物和靶点。

我国卒中发病呈现年轻化趋势，恶性脑水肿是大血管闭塞（LVO）性急性缺血性卒中（AIS）的严重并发症，与不良预后高度相关。现有的主观和定性的脑水肿预测指征包括大脑中动脉高密度征、基线梗死体积较大和治疗不及时等。近年来，脑组织净水摄取率（NWU）及其衍生的与时间呈（非）线性关系参数的提出为临床提供了缺血脑组织吸水量的定量信息，作为病理生理学和影像标志物可反映脑组织水肿程度并用于区分AIS发病时间窗，反映病变区侧支循环状态，并可进一步预测血管内治疗后水肿进展、恶性脑水肿（MCE）的发生、量化治疗效果和预后。目前，国内外学者对于NWU的研究相对较少，且多聚焦于NWU在MCE中的应用，现就脑水肿的形成机制、现有脑水肿的预测方法、NWU在AIS诊断及治疗中的优势和研究进展进行综述，旨在为NWU在AIS中的应用提供参考。

白癜风是一种常见的获得性自身免疫性皮肤病，具有影响美观、病程呈慢性、顽固难治、容易反复、药物治疗效果差且部分治疗药物副作用较大等特点。越来越多的研究表明，系统性药物治疗无论是作为单一疗法或是联合疗法均对白癜风有明显改善作用。随着对白癜风研究的逐渐深入，涌现出多种系统治疗方案，包括甲氨蝶呤（MTX）、环孢素和米诺环素等传统药物的新应用及Janus激酶（JAK）抑制剂和阿法诺肽等新型药物的开发。现就白癜风各类系统药物的作用机制及既往临床研究进行简要综述，旨在为白癜风患者的治疗提供参考。

幽门螺旋杆菌（Hp）是一种定植于人类胃部并对机体造成一定损害的病原菌。多年来针对Hp的各类检测技术不断被研发改进并被应用于临床Hp感染的诊断中，以组织病理切片法为代表的侵入性检测方法因有创性而使其应用范围受限，以^13/14C呼气试验为代表的非侵入性检测方法因无创和简便等特点更易被患者接受，但不同检测方法均存在一定的局限性，因此需考虑患者年龄、既往史、当地医疗条件、检测方法的可靠性和检测成本等因素选择适合患者的Hp检测方法，可以帮助临床医生及时并准确地做出诊断。近年来对于Hp检测技术的研究已不仅局限于Hp的定性检测，定量检测、基因检测和分型检测方法也在不断探索和更新，家用检测试剂盒的开发也为Hp检测带来了更多的可能性。现从侵入性和非侵入性2个方面就近年来Hp检测方法的检测原理、检测灵敏度和特异度等进行综述，为Hp感染的临床诊疗和科学研究提供参考。