人参3-O-UGT1基因RNAi表达载体工程菌的构建

doi:10.13229/j.cnki.jdxbgxb20161203

吉林大学学报(工学版) ›› 2018, Vol. 48 ›› Issue (1): 344-348.doi: 10.13229/j.cnki.jdxbgxb20161203

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人参3-O-UGT1基因RNAi表达载体工程菌的构建

卢超¹, 赵寿经^{1, 2}, 张晓佳², 杜芃川², 王雪松^{1, 2}

1.吉林大学生物与农业工程学院,长春 130022;
2.吉林大学生命科学学院,长春 130012

收稿日期:2016-11-05 出版日期:2018-02-26 发布日期:2018-02-26
通讯作者: 赵寿经(1961-),男,教授,博士生导师. 研究方向:生物工程.E-mail:swgc@jlu.edu.cn
作者简介:卢超(1989-),男,博士研究生. 研究方向:农业生物资源保护与利用.E-mail:279303654@qq.com
基金资助:
“863”国家高技术研究发展计划项目(2013AA102604); 国家自然科学基金项目(31270337); 教育部博士学科点专项科研基金项目(20120061110038); 吉林省科技发展计划项目(20130102041JC)

Construction of engineering bacteria containing Panax ginseng 3-O-UGT1 gene RNA interference plant expression vector

LU Chao¹, ZHAO Shou-jing^{1, 2}, ZHANG Xiao-jia², DU Peng-chuan², WANG Xue-song^{1, 2}

1.College of Biological and Agricultural Engineering, Jilin University, Changchun 130022,China;
2.College of Life Sciences, Jilin University, Changchun 130012,China

Received:2016-11-05 Online:2018-02-26 Published:2018-02-26

摘要/Abstract

摘要： 人参3-O-UGT1基因(Pg3-O-UGT1)是控制人参中二醇型单体皂苷合成的关键酶基因,而二醇型皂苷和三醇型皂苷具有相反的药理活性。本文利用RT-PCR技术和酶切连接技术成功构建人参3-O-UGT1基因RNAi(RNA interference)植物表达载体,通过热转化法将重组表达载体转化进发根农杆菌A4中,得到含有人参3-O-UGT1基因RNAi植物表达载体的工程菌,为诱导人参外植体转化和人参皂苷合成机理奠定了基础。

关键词: 生物工程, 人参皂苷, RNAi植物表达载体, 糖基转移酶, 工程菌

Abstract: The ginseng 3-O-UGT1 gene (pg3-O-UGT1) is a key enzyme for controlling the synthesis of protopanaxadiol-group in Panax ginseng. In general, the protopanaxadiol-group ginsenosides have pharmaceutical activities that are opposite those of the protopanaxatriol-group. In this study, the ginseng 3-O-UGT1 gene RNA interference plant expression vector was constructed using Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (TR-PCR) and restriction enzyme digestion connection techniques. Then, a 3-O-UGT1 gene RNAi plant expression vector engineered bacteria was harvested after being transformed into the recombinant expression vectors. This work provides the foundation for the induction of ginseng explants and the mechanism of ginsenosides synthesis.

Key words: bioengineering, ginsenosides, RNAi plant expression vector, glycosyltransferase, engineering bacteria

中图分类号:

卢超, 赵寿经, 张晓佳, 杜芃川, 王雪松. 人参3-O-UGT1基因RNAi表达载体工程菌的构建[J]. 吉林大学学报(工学版), 2018, 48(1): 344-348.

LU Chao, ZHAO Shou-jing, ZHANG Xiao-jia, DU Peng-chuan, WANG Xue-song. Construction of engineering bacteria containing Panax ginseng 3-O-UGT1 gene RNA interference plant expression vector[J]. 吉林大学学报(工学版), 2018, 48(1): 344-348.

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