吉林大学学报(工学版) ›› 2016, Vol. 46 ›› Issue (4): 1368-1372.doi: 10.13229/j.cnki.jdxbgxb201604050

• 论文 • 上一篇    下一篇

人参DS和D12H基因的异源共表达

王雪松1, 2, 李躬军2, 赵寿经1, 2, 安岩1, 曲庆玲1, 卢超1   

  1. 1.吉林大学 生物与农业工程学院,长春 130022;
    2.吉林大学 生命科学学院,长春 130012
  • 收稿日期:2015-04-10 出版日期:2016-07-20 发布日期:2016-07-20
  • 通讯作者: 赵寿经( 1961-) ,男,教授,博士生导师.研究方向:农业生物资源保护与利用.E-mail:swgc@jlu.edu.cn
  • 作者简介:王雪松( 1978-) ,女,讲师,博士研究生.研究方向:次生代谢产物调控.E-mail:xuesong@jlu.edu.cn
  • 基金资助:
    “863”国家高技术研究发展计划项目(2013AA102604); 国家自然科学基金项目(30970259,31270337); 教育部博士学科点专项科研基金项目(20120061110038); 吉林省科技发展计划项目(201201056)

Heterologous coexpression of Panax ginseng DS and D12H genes

WANG Xue-song1, 2, LI Gong-jun2, ZHAO Shou-jing1, 2, AN Yan1, QU Qing-ling1, LU Chao1   

  1. 1.College of Biological and Agricultural Engineering, Jilin University,Changchun 130022,China;
    2.College of Life Scineces, Jilin University,Changchun 130012,China
  • Received:2015-04-10 Online:2016-07-20 Published:2016-07-20

RICH HTML

0   

PDF (PC)

108

摘要： 利用RT-PCR技术和酶切连接技术克隆得到人参皂苷生物合成关键酶DS和D12H基因,并构建出两种基因的表达载体DS-pAUR123和D12H-pAUR123。通过热转化法将两个表达载体转化到酿酒酵母中,得到重组工程菌。两种基因在重组工程菌中能够表达出具有催化功能的活性蛋白质,实现了人参DS和D12H基因的异源共表达。

关键词: 生物工程, 人参皂苷, 异源共表达, 原人参二醇, 酵母表达系统

Abstract: DS and D12H genes, which are involved in ginsenoside biosynthesis were obtained by Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) and Enzyme Digestion Connection (EDC) techniques. Expression vectors of both genes were constructed, namely DS-pAUR123 and D12H-pAUR123. Then, both expression vectors were transformed into Saccharomyces cerevisiae. Results show that both genes can be heterologously expressed into functional enzymes.

Key words: biological engineering, ginsenosides, heterogeneous coexpression, protopanaxadiol, yeast expression system

中图分类号: 

  • Q81
[1] Liang Y L, Zhao S J. Progress in understanding of ginsenoside biosynthesis[J]. Plant Biol, 2008, 10(4): 415-421.
[2] Lee M H, Jeong J H, Seo J W, et al. Enhanced triterpene and phytosterol biosynthesis in Panax ginseng overexpressing squalene synthase gene[J]. Plant and Cell Physiology, 2004, 45(8): 976-984.
[3] 梁彦龙, 赵寿经, 徐立新, 等. 人参皂苷前体工程酵母的构建[J]. 吉林大学学报:工学版, 2014, 44(6): 1867-1870.
Liang Yan-long, Zhao Shou-jing, Xu Li-xin, et al. Construction of engineered yeast producing ginsenoside precursor[J]. Journal of Jilin University(Engineering and Technology Edition), 2014, 44(6): 1867-1870.
[4] Maczek J, Junne S, Nowak P, et al. Metabolic flux analysis of the sterol pathway in the yeast Saccharomyces cerevisiae [J]. Bioprocess Biosyst Eng, 2006, 29(4):241-252.
[5] Gietz R D, Schiestl R H. Transforming yeast with DNA[J]. Meth Mol Cell Biol, 1995, 5(5):255-269.
[6] 郭龙, 王欣欣, 黄建新. 啤酒废酵母蛋白的提取工艺研究[J]. 安徽农业科学, 2010,38(34): 19566-19567,19580.
Guo Long, Wang Xin-xin, Huang Jian-xin. Research on extraction technology of protein from waste beer yeast[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2010, 38 (34): 19566-19567, 19580.
[7] Tansakul P, Shibuya M, Kushiro T,et al. Dammarenediol-II synthase, the first dedicated enzyme for ginsenoside biosynthesis, in Panax ginseng [J].FEBS letters,2006,580(22):5143-5149.
[8] Han J Y, Kim H J, Kwon Y S,et al. The Cyt P450 enzyme CYP716A47 catalyzes the formation of protopanaxadiol from ammarenediol-II during ginsenoside biosynthesis in Panax ginseng [J].Plant and Cell Physiology,2011,52(12):2062-2073.
[1] 卢超, 赵寿经, 张晓佳, 杜芃川, 王雪松. 人参3-O-UGT1基因RNAi表达载体工程菌的构建[J]. 吉林大学学报(工学版), 2018, 48(1): 344-348.
[2] 梁彦龙, 赵寿经, 王倩, 李梦婷, 林曦, 窦博. Triton X-100对人参发根皂苷分泌和合成的影响[J]. 吉林大学学报(工学版), 2016, 46(3): 1013-1016.
[3] 赵寿经, 安岩, 孟洋, 何沐阳, 曲庆玲, 郝东云. 干扰环阿乔醇合成酶基因的表达对人参皂苷含量的影响[J]. 吉林大学学报(工学版), 2014, 44(6): 1867-1870.
[4] 王淑杰, 张伟, 何海兵, 王婉姝, 张淼, 户新宇. 典型植物叶片对农药润湿特性及持药量的影响[J]. 吉林大学学报(工学版), 2013, 43(增刊1): 564-568.
[5] 孙霁宇, 王悦明, 潘春祥, 丛宪玲. 牛角外壳静态及动态纳米力学特性[J]. 吉林大学学报(工学版), 2012, 42(增刊1): 475-478.
[6] 李秀娟, 梁云虹, 张志辉, 任露泉. 杨树叶片的微观结构及拉伸特性[J]. 吉林大学学报(工学版), 2012, 42(增刊1): 440-443.
[7] 马云海, 王悦明, 潘春祥, 张志君. 鲍鱼壳体纳米力学特性及有限元分析[J]. 吉林大学学报(工学版), 2012, 42(增刊1): 437-439.
[8] 贾洪雷, 王悦明, 张志君, 孙霁宇. 臭蜣螂鞘翅的一维本构方程及黏弹性模型的建立[J]. 吉林大学学报(工学版), 2012, 42(增刊1): 433-436.
[9] 赵寿经, 曹豪杰, 何沐阳, 王乐. 人参β-AS基因RNAi表达载体工程菌的构建[J]. , 2012, (06): 1608-1612.
[10] 张强1,Anders Thygesen2,Anne Belinda Thomsen2. 湿氧预处理玉米秸秆酶解与酒精发酵[J]. 吉林大学学报(工学版), 2011, 41(4): 1189-1192.
[11] 梁彦龙,赵寿经,徐立新,刘丽,何沐阳,孙尧. 人参皂苷前体工程酵母的构建[J]. 吉林大学学报(工学版), 2011, 41(05): 1513-1516.
[12] 赵寿经,侯春喜,徐立新,梁彦龙,钱延春,孙尧. 人参皂苷生产能力的影响[J]. 吉林大学学报(工学版), 2011, 41(03): 865-868.
[13] 徐立新, 赵寿经, 梁彦龙, 钱延春, 金士琨. 外源调节物质对人参毛状根生长及皂苷合成的影响[J]. 吉林大学学报(工学版), 2010, 40(06): 1619-1623.
[14] 赵寿经, 侯琨, 粱彦龙, 徐立新, 钱延春. 产木糖醇菌株的筛选及发酵条件优化[J]. 吉林大学学报(工学版), 2010, 40(03): 868-0872.
[15] 闫洪森，张守勤，侯丽丽，骆晓沛，梁清 .

提取工艺对白花蛇舌草提取液稳定性
和抗氧化活性的影响

[J]. 吉林大学学报(工学版), 2008, 38(增刊): 214-0218.
Viewed
Full text


Abstract

Cited
  Shared   
  Discussed   
[1] 刘松山, 王庆年, 王伟华, 林鑫. 惯性质量对馈能悬架阻尼特性和幅频特性的影响[J]. 吉林大学学报(工学版), 2013, 43(03): 557 -563 .
[2] 初亮, 王彦波, 祁富伟, 张永生. 用于制动压力精确控制的进液阀控制方法[J]. 吉林大学学报(工学版), 2013, 43(03): 564 -570 .
[3] 李静, 王子涵, 余春贤, 韩佐悦, 孙博华. 硬件在环试验台整车状态跟随控制系统设计[J]. 吉林大学学报(工学版), 2013, 43(03): 577 -583 .
[4] 胡兴军, 李腾飞, 王靖宇, 杨博, 郭鹏, 廖磊. 尾板对重型载货汽车尾部流场的影响[J]. 吉林大学学报(工学版), 2013, 43(03): 595 -601 .
[5] 王同建, 陈晋市, 赵锋, 赵庆波, 刘昕晖, 袁华山. 全液压转向系统机液联合仿真及试验[J]. 吉林大学学报(工学版), 2013, 43(03): 607 -612 .
[6] 张春勤, 姜桂艳, 吴正言. 机动车出行者出发时间选择的影响因素[J]. 吉林大学学报(工学版), 2013, 43(03): 626 -632 .
[7] 马万经, 谢涵洲. 双停车线进口道主、预信号配时协调控制模型[J]. 吉林大学学报(工学版), 2013, 43(03): 633 -639 .
[8] 于德新, 仝倩, 杨兆升, 高鹏. 重大灾害条件下应急交通疏散时间预测模型[J]. 吉林大学学报(工学版), 2013, 43(03): 654 -658 .
[9] 肖赟, 雷俊卿, 张坤, 李忠三. 多级变幅疲劳荷载下预应力混凝土梁刚度退化[J]. 吉林大学学报(工学版), 2013, 43(03): 665 -670 .
[10] 肖锐, 邓宗才, 兰明章, 申臣良. 不掺硅粉的活性粉末混凝土配合比试验[J]. 吉林大学学报(工学版), 2013, 43(03): 671 -676 .
版权所有 © 《吉林大学学报(工学版)》编辑部
地址：长春市人民大街5988号　电话：+86-431-85095297　传真：+86-431-85094074　E-mail: xbgxb@jlu.edu.cn
本系统由北京玛格泰克科技发展有限公司设计开发