吉林大学学报(工学版) ›› 2016, Vol. 46 ›› Issue (4): 1368-1372.doi: 10.13229/j.cnki.jdxbgxb201604050

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人参DS和D12H基因的异源共表达

王雪松1, 2, 李躬军2, 赵寿经1, 2, 安岩1, 曲庆玲1, 卢超1   

  1. 1.吉林大学 生物与农业工程学院,长春 130022;
    2.吉林大学 生命科学学院,长春 130012
  • 收稿日期:2015-04-10 出版日期:2016-07-20 发布日期:2016-07-20
  • 通讯作者: 赵寿经( 1961-) ,男,教授,博士生导师.研究方向:农业生物资源保护与利用.E-mail:swgc@jlu.edu.cn
  • 作者简介:王雪松( 1978-) ,女,讲师,博士研究生.研究方向:次生代谢产物调控.E-mail:xuesong@jlu.edu.cn
  • 基金资助:
    “863”国家高技术研究发展计划项目(2013AA102604); 国家自然科学基金项目(30970259,31270337); 教育部博士学科点专项科研基金项目(20120061110038); 吉林省科技发展计划项目(201201056)

Heterologous coexpression of Panax ginseng DS and D12H genes

WANG Xue-song1, 2, LI Gong-jun2, ZHAO Shou-jing1, 2, AN Yan1, QU Qing-ling1, LU Chao1   

  1. 1.College of Biological and Agricultural Engineering, Jilin University,Changchun 130022,China;
    2.College of Life Scineces, Jilin University,Changchun 130012,China
  • Received:2015-04-10 Online:2016-07-20 Published:2016-07-20

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摘要： 利用RT-PCR技术和酶切连接技术克隆得到人参皂苷生物合成关键酶DS和D12H基因,并构建出两种基因的表达载体DS-pAUR123和D12H-pAUR123。通过热转化法将两个表达载体转化到酿酒酵母中,得到重组工程菌。两种基因在重组工程菌中能够表达出具有催化功能的活性蛋白质,实现了人参DS和D12H基因的异源共表达。

关键词: 生物工程, 人参皂苷, 异源共表达, 原人参二醇, 酵母表达系统

Abstract: DS and D12H genes, which are involved in ginsenoside biosynthesis were obtained by Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) and Enzyme Digestion Connection (EDC) techniques. Expression vectors of both genes were constructed, namely DS-pAUR123 and D12H-pAUR123. Then, both expression vectors were transformed into Saccharomyces cerevisiae. Results show that both genes can be heterologously expressed into functional enzymes.

Key words: biological engineering, ginsenosides, heterogeneous coexpression, protopanaxadiol, yeast expression system

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