嗜热菌Thermaerobacter subterraneus DSM13965磷酸三酯酶的原核表达、 ]纯化及性质表征

吉林大学学报(理学版)

嗜热菌Thermaerobacter subterraneus DSM13965磷酸三酯酶的原核表达、 ]纯化及性质表征

林禹欣¹, 刘惠麟¹, 韩葳葳², 詹冬玲¹, 刘景圣¹

1. 吉林农业大学食品科学与工程学院, 长春 130118；2. 吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室, 长春 130012

收稿日期:2013-02-18 出版日期:2013-11-26 发布日期:2013-11-21
通讯作者: 刘景圣,詹冬玲 E-mail:liujs1007@vip.sina.com.cn; zdlgale@126.com

Prokaryotic Expression, Purification and Properties of Phosphotriesterase from Thermophilic Archaeon Thermaerobacter subterraneus DSM13965

LIN Yuxin¹, LIU Huilin¹, HAN Weiwei², ZHAN Dongling^1, LIU Jingsheng¹

1. College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China; 2. Key Laboratoryfor Molecular Enzymology and Engineering of the Ministry of Education, Jilin University, Changchun 130012, China

Received:2013-02-18 Online:2013-11-26 Published:2013-11-21
Contact: LIU Jingsheng,ZHAN Dongling E-mail:liujs1007@vip.sina.com.cn; zdlgale@126.com

摘要/Abstract

摘要：

将来源于嗜热菌Thermaerobacter subterraneus DSM13965的磷酸三酯酶基因在大肠杆菌BL21中高效表达, 并采用超声、热失活和组氨酸标签
镍柱对产物进行分离纯化, 通过SDSPAGE和Westernblot对表达产物进行鉴定. 结果表明: 该重组酶以二聚体的寡聚体形式存在; 其最适温度为70 ℃, 最适pH=10.0, 具有良好的热稳定性.

关键词: 嗜热菌Thermaerobacter subterraneus DSM13965, 磷酸三酯酶, 原核表达, 性质

Abstract:

Gene phosphotriesterase from archeaon Thermaerobacter subterraneus DSM13965 was cloned and expressed at high levels in E.coli BL21. The recombinant enzyme was purified to homogeneity via ultrasonic, heating and histag in Nisepharose chromatography. With the help of SDSPAGE and Westernblotting, the phosphotriesterase was identified as a homooligomer existed in dimer form. The enzyme was characterized with ethylparaoxon, its optimum temperature and pH were 70 ℃ and 10.0, respectively. The enzyme has a favourable heat resistance.

Key words: Thermaerobacter subterraneus DSM13965, phosphotriesterase, prokaryotic expression, property

中图分类号:

Q786

林禹欣, 刘惠麟, 韩葳葳, 詹冬玲, 刘景圣. 嗜热菌Thermaerobacter subterraneus DSM13965磷酸三酯酶的原核表达、 ]纯化及性质表征[J]. 吉林大学学报(理学版), 2013, 51(06): 1182-1186.

LIN Yuxin, LIU Huilin, HAN Weiwei, ZHAN Dongling, LIU Jingsheng. Prokaryotic Expression, Purification and Properties of Phosphotriesterase from Thermophilic Archaeon Thermaerobacter subterraneus DSM13965[J]. Journal of Jilin University Science Edition, 2013, 51(06): 1182-1186.

[1]	张天宇, 赵瑞, 李雪飞, 刘霏凝. 基于Fe/Ni共掺杂CdS的电子结构和光学性质[J]. 吉林大学学报(理学版), 2020, 58(6): 1467-1472.
[2]	李春萍, 宫丽晶, 周志明, 张健. ZnO纳米线的三阶非线性光学性质[J]. 吉林大学学报(理学版), 2020, 58(5): 1254-1258.
[3]	史叶萍, 王尧, 任艳丽. 斜逆Laurent级数环的弱Armendariz性质[J]. 吉林大学学报(理学版), 2020, 58(4): 808-814.
[4]	石莹岩, 张畅, 许风辉, 李迪. 基于羟基苯基卟啉骨架的二聚卟啉合成及性能[J]. 吉林大学学报(理学版), 2020, 58(4): 1010-1014.
[5]	陈文龙, 张阳阳, 张生英, 邢小勇, 胡永浩. 牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的克隆、表达及多克隆抗体制备[J]. 吉林大学学报(理学版), 2020, 58(3): 711-717.
[6]	戴磊. CFI算子与(ω)性质[J]. 吉林大学学报(理学版), 2019, 57(5): 1007-1013.
[7]	高云娜, 韩彩静, 詹冬玲, 方丽, 闵伟红. 北京棒杆菌天冬氨酸激酶M372I-T379S双突变体的构建及其酶学性质[J]. 吉林大学学报(理学版), 2019, 57(5): 1267-1274.
[8]	杨晓翠, 李伟, 马宏源, 于卓, 肖俊平. Si_8-xGe_x合金的电子、力学和光学性质第一性原理计算#br#[J]. 吉林大学学报(理学版), 2019, 57(3): 658-663.
[9]	郭奇, 曹小红, 戴磊. 有界线性算子(ω)性质的判定[J]. 吉林大学学报(理学版), 2019, 57(2): 199-205.
[10]	高嵩, 罗川, 王越. Brookite-TiO₂晶体光学、弹性和晶格热力学性质的第一性原理计算[J]. 吉林大学学报(理学版), 2019, 57(06): 1509-1512.
[11]	戴磊. (z)性质的一个注记[J]. 吉林大学学报(理学版), 2018, 56(6): 1354-1358.
[12]	鲍捷, 欧仁侠. 丙酮分子在非对称外场作用下的光谱性质[J]. 吉林大学学报(理学版), 2018, 56(3): 713-717.
[13]	方丽, 王锐楠, 詹冬玲, 张芷睿, 闵伟红. 北京棒杆菌天冬氨酸激酶突变体P184Q的酶学性质表征[J]. 吉林大学学报(理学版), 2017, 55(06): 1614-1620.
[14]	陈红, 张鑫, 周晓明, 梁磊, 洪源泽. 新型材料Na₄MnV(PO₄)₃的电化学性质及其改性[J]. 吉林大学学报(理学版), 2017, 55(06): 1591-1596.
[15]	陈志杰, 王鹏, 詹冬玲, 方丽, 闵伟红. 北京棒杆菌天冬氨酸激酶突变体A380H的酶学性质[J]. 吉林大学学报(理学版), 2017, 55(05): 1336-1344.