林蛙输卵管总RNA提取方法的优化及RT-PCR验证

吉林大学学报(理学版)

林蛙输卵管总RNA提取方法的优化及RT-PCR验证

李稼晖, 刘回民, 陈文超, 刘景圣

吉林农业大学食品科学与工程学院, 长春 130118

收稿日期:2013-11-26 出版日期:2014-05-26 发布日期:2014-08-27
通讯作者: 刘景圣 E-mail:aylifnsy@swu.edu.cn

Optimization of Total RNA Isolation from Rana chensinensisOviduct and Validate the Method by RT-PCR

LI Jiahui, LIU Huimin, CHEN Wenchao, LIU Jingsheng

College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China

Received:2013-11-26 Online:2014-05-26 Published:2014-08-27
Contact: LIU Jingsheng E-mail:aylifnsy@swu.edu.cn

摘要/Abstract

摘要：

分别使用改良的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、 TRIzol法和RNAiso Plus法对林蛙的输卵管组织进行总RNA提取, 考察不同方法对总RNA提取量的影响. 结果表明: 利用改良的RNAiso Plus法并经进一步纯化, 获得总RNA的A₂₆₀/A_280平均值为1.96, 平均得率为56.1 μg/g; 通过反式多聚酶链式反应（RT-PCR）获得了林蛙-GAPDH基因和EF-1-α-基因的部分序列.

关键词: 林蛙输卵管, RNA提取, 优化, RT-PCR, 验证

Abstract:

We compared the extraction effects of improved CTAB, TRIzol and RNAiso Plus, and investigated the extraction yield with different methods. It presents the advantages of high quality total RNA extracted by the optimized method, A₂₆₀/A₂₈₀ ratio was 196 and yield was more than 561 μg/g. Through reverse transcription\|polymerase chain reaction (RT-PCR), we got GAPDH and EF-1-α- sequences.

Key words: Rana chensinensis oviduct, RNA extraction, optimization, RT-PCR, validation

中图分类号:

Q752

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