鼠白细胞介素15真核表达质粒的构建及活性鉴定

鼠白细胞介素15真核表达质粒的构建及活性鉴定

姜春来，马红霞，于湘晖，吴永革，李惟，孔维

吉林大学生命科学学院疫苗研究中心，长春 130023

收稿日期:2004-08-05 修回日期:1900-01-01 出版日期:2005-03-26 发布日期:2005-03-26
通讯作者: 孔维

Cloning and Expression of Recombinant mIL-15 and Bioactivity Assay

JIANG Chun-lai， MA Hong-xia, YU Xiang-hui， WU Yong-ge， LI Wei， KONG Wei

Vaccine Research Center, College of Life Science, Jilin University, Changchun 130023, China

Received:2004-08-05 Revised:1900-01-01 Online:2005-03-26 Published:2005-03-26
Contact: KONG Wei

摘要/Abstract

摘要： 从经PMA刺激的小鼠脾细胞中提取总RNA，采用RT-PCR技术获得鼠白细胞介素15(mIL-15)基因，将其克隆至真核表达质粒VR1012中，转染COS-7细胞，将转染细胞裂解， Western blot检测. 表明获得了mIL-15真核表达载体，其具有完整的带有信号肽的mIL-15序列，重组结果正确， Western blot检测阳性. 并获得有生物活性的mIL-15蛋白.

关键词: 鼠白细胞介素15, 克隆, 活性鉴定

Abstract: Murine splenocyte was harvested after the mouse was stimulated by PMA, the cells were extracted for total RNA and RT-PCR, and IL-15 eukaryotic express plasmid was then constructed. COS-7 cell line was transfected by this plasmid, supernatant and the cells were harvested. The supernatant was serially by diluted to detect the bioactivity and express level by western blot. This recombinant murine IL-15 eukaryotic plasmid can increase immune response as DNA vaccine adjuvant potentially.

Key words: mIL-15, clone, biological activity assay

中图分类号:

R392.11

姜春来，马红霞，于湘晖，吴永革，李惟，孔维. 鼠白细胞介素15真核表达质粒的构建及活性鉴定[J]. J4, 2005, 43(02): 238-240.

JIANG Chun-lai， MA Hong-xia, YU Xiang-hui， WU Yong-ge， LI Wei， KONG Wei. Cloning and Expression of Recombinant mIL-15 and Bioactivity Assay[J]. J4, 2005, 43(02): 238-240.

[1]	陈文龙, 张阳阳, 张生英, 邢小勇, 胡永浩. 牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的克隆、表达及多克隆抗体制备[J]. 吉林大学学报(理学版), 2020, 58(3): 711-717.
[2]	董雪, 徐雨昕, 郭晶, 龚忠阔, 夏霖亚, 殷玉和, 吴丛梅. 重组人源抗血管内皮生长因子单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 吉林大学学报(理学版), 2019, 57(06): 1538-1543.
[3]	王海珠, 海一娜, 徐莹, 杜泊船, 张思玉, 范杰. 基于量子化学理论研究氯代阻燃剂得克隆的降解路径[J]. 吉林大学学报(理学版), 2016, 54(04): 909-913.
[4]	李敬涛, 孙新华, 余刚, 贾承国, 杜茜, 李启云, 潘洪玉. 几种基于pCAMBIA系列多用途新型植物表达载体的改建及优化[J]. 吉林大学学报(理学版), 2014, 52(02): 371-375.
[5]	邵洪泽, 程荣华, 石春军, 呼延含蓉, 黄海楠, 许尧, 毛文智, 胡桂学. 羊传染性脓疱病毒吉林分离株F1L基因的克隆与同源性分析[J]. J4, 2013, 51(03): 518-522.
[6]	王继, 高瑞娟, 袁大巍, 王丽. 人野生型p53基因的克隆及原核表达[J]. J4, 2009, 47(05): 1077-1080.
[7]	吴永革，黄昌益，李惟， Ronald Dugglby. 原核表达载体pHsaE1αβ的构建和人丙酮酸脱氢酶的表达与纯化[J]. J4, 2005, 43(04): 533-537.
[8]	王群 ,马军，何巍，王晖. 定点突变内皮抑素Zn²⁺的结合位点及突变基因的克隆表达[J]. J4, 2005, 43(01): 106-111.