重组人前列腺特异性抗原纯化与活性鉴定

doi:国家自然科学基金资助课题（39870313）

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重组人前列腺特异性抗原纯化与活性鉴定

邹冬辉¹，张家颖²，路英丽³，郭焱¹,王忠山¹

（1.吉林大学基础医学院细胞生物学教研室，吉林长春 130021；2. 吉林大学基础医学院生物化学与分子生物学实验中心，吉林长春 130021；3.吉林大学第二医院妇产科, 吉林长春130041）

收稿日期:2007-08-18 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-01-28 发布日期:2008-01-28
通讯作者: 王忠山

Primary purification and activity assay of recombinant prostate-specific antigen

ZOU Dong-hui¹,ZHANG Jia-ying²,LU Ying-li³,GUO Yan¹,WANG Zhong-shan¹

(1.Department of Cell Biology,School of Basic Medical Sciences,Jilin University,Changchun 130021,China;2.Experimental Center of Biochemistry and Molecular Biology,School of Basic Medical Sciences,Jilin University,Changchun 130021,China;3.Department of Obstetrics and Gynecology,Second Hospital,Jilin University,Changchun 130041,China)

Received:2007-08-18 Revised:1900-01-01 Online:2008-01-28 Published:2008-01-28
Contact: WANG Zhong-shan

摘要/Abstract

摘要： 目的：纯化和鉴定重组人前列腺特异性抗原（PSA），为PSA 的生物学特征研究、临床检测和治疗应用提供关键材料。方法：采用阳离子交换层析技术纯化重组PSA（rPSA），利用Western blotting 鉴定其特异性，利用PSA底物S-2586检测rPSA活性。结果：最适甲醇诱导浓度为1.5%，经鉴定纯化的rPSA为人PSA。在不同反应条件下，在3.5 h内酶活性与时间成正比，rPSA 活性显著高于正常精浆PSA酶活性（P<0.05），酶活性的最适温度为30℃。结论：成功纯化出具有酶活性的rPSA。

关键词: 酶活性检测, 分离纯化, 鉴定

Abstract: Abstract:Objective To purify and assay the recombinant prostate-specific antigen (rPSA) to provide key material for study of PSA biology character,clinic detection and therapeutic application. Methods The rPSA was purified by cation-exchange chromatography from the yeast cell culture supernatant,then rPSA specificity was analyzed by Western blotting,and enzyme activity was assayed using s-2586 substrate. Results The most suitable methanol concentration to induce expression was 1.5%.The rPSA was purified by cation-exchange chromatography.The rPSA had chymotrypsin-like activity of PSA.Under different conditions enzyme activity was directly related with time.The most suitable temperature of enzyme activity was 30℃ within 3.5 h.The chymotrypsin-like activity of rPSA was obviously higher than that of PSA in seminal vesicle fluid of normal male. Conclusion The active,mature rPSA has been successfully purified.

Key words: activity assay, purification, identification

中图分类号:

Q786

邹冬辉，张家颖，路英丽，郭焱,王忠山. 重组人前列腺特异性抗原纯化与活性鉴定[J]. J4, 2008, 34(1): 1-5.

ZOU Dong-hui,ZHANG Jia-ying,LU Ying-li,GUO Yan,WANG Zhong-shan. Primary purification and activity assay of recombinant prostate-specific antigen[J]. J4, 2008, 34(1): 1-5.

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重组人前列腺特异性抗原纯化与活性鉴定

Primary purification and activity assay of recombinant prostate-specific antigen

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