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吉林大学学报(医学版)
ISSN 1671-587X
CN 22-1342/R
主 任:王 丽
编 辑:姜瑾秋 李欣欣 韩宏志
    官 鑫
电 话:0431-85619279
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2020年, 第46卷, 第04期 刊出日期:2020-07-28
上一期   
基础研究
下调ADAR1表达对人肺癌细胞增殖、迁移和上皮间质转化的影响
周宁, 武睿, 马振凯, 陈微微, 李雪琳, 宫凯凯, 杨丽娟, 代娟娟, 武艳
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  669-674.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200401
摘要 ( 40 )   [HTML]( ) PDF(662KB) ( 36 )  
目的:探讨下调作用于RNA的腺苷酸脱氢酶1(ADAR1)对肺癌H1299和H520细胞增殖、迁移和上皮间质转化(EMT)的影响,并阐明其作用机制。方法:H1299和H520细胞系分为对照组(转染negative shRNA)和shADAR1组(转染shADAR1)。实时荧光定量PCR法和Western blotting法检测各组细胞中ADAR1 mRNA和蛋白表达水平,CCK-8法和克隆形成实验检测各组细胞增殖活性和克隆形成数,细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,Western blotting法检测各组细胞中E钙黏附蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,shADAR1组的H1299和H520细胞中ADAR1 mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,shADAR1组H1299和H520细胞增殖活性、克隆形成数量和细胞划痕愈合率均明显降低(P<0.05或P<0.01),H1299和H520细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01),vimentin蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:下调ADAR1表达能够抑制肺癌细胞的增殖、迁移及EMT。
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CDC14B在小鼠1-细胞期受精卵各细胞周期的动态表达及其定位
刘岚清, 李瑞林, 周晓敏, 孟峻
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  675-679.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200402
摘要 ( 11 )   [HTML]( ) PDF(484KB) ( 12 )  
目的:检测小鼠1-细胞期受精卵各细胞周期中细胞分裂周期蛋白14B(CDC14B)的表达水平及其定位,初步阐明CDC14B对哺乳动物受精卵早期发育调控的机制。方法:通过超排卵技术分别收集小鼠1-细胞期受精卵,采用RT-PCR和Western blotting法检测小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中CDC14B mRNA和蛋白表达水平;采用细胞免疫荧光法观察小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中CDC14B和β微管蛋白(β-tubulin)的共定位情况。结果:与G1期比较,小鼠S、G2和M期1-细胞期受精卵中CDC14B mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。间接免疫荧光实验,CDC14B(红色荧光)和β-tubulin(绿色荧光)在G1期和S期共定位于小鼠受精卵皮质;在G2早期,CDC14B和β-tubulin共定位于皮质和细胞质;在G2晚期,部分CDC14B入核;在M期,CDC14B和β-tubulin共定位于纺锤体。结论:CDC14B在小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中动态表达,CDC14B存在核浆纺锤体转位,CDC14B的定位变化可能调控纺锤体的功能。
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鼠李糖乳杆菌对斑马鱼脊髓损伤后肠道炎症的抑制作用及其机制
赵丽萍, 黄术兵, 张博枰, 周芝兰, 贾雪冰, 孙孟菲, 乔晨萌, 陈雪, 申延琴, 崔春
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  680-686.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200403
摘要 ( 8 )   [HTML]( ) PDF(875KB) ( 6 )  
目的:探讨斑马鱼脊髓损伤(SCI)对肠道炎症发生发展的影响,阐明鼠李糖乳杆菌GG株(LGG)减轻肠道炎症的作用及机制。方法:14条正常斑马鱼随机分为正常饮食组(n=7)和LGG饮食组(LGG组,n=7),喂养21 d后取肠道组织,采用RT-qPCR法检测斑马鱼肠道组织中肠屏障相关分子β防御素样肽-1(DEFBL1)、紧密连接蛋白2a(TJP2a)、黏液素2.1(MUC2.1)和黏液素5.3(MUC5.3) mRNA表达水平。48条手术斑马鱼随机分为假手术+正常饮食组、假手术+LGG组、SCI+正常饮食组和SCI+LGG组,每组12条,术后喂养25 d(每组n=6)取肠道组织,采用RT-qPCR法检测肠道炎症相关分子肿瘤坏死因子(TNF-α)、Toll样受体2(TLR-2)和白细胞介素6(IL-6) mRNA表达水平,术后分别喂养7 d(每组n=3)和28d(每组n=3)取斑马鱼肠道组织,用肠道菌群高通量16S rRNA测序检测肠道菌群变化。结果:与正常饮食组比较,LGG组正常斑马鱼肠道组织中DEFBL1和TJP2a mRNA表达水平明显升高(t=-2.387,P<0.05;t=-12.482,P<0.01),MUC2.1和MUC5.3 mRNA表达水平明显降低(t=2.497,P<0.05;t=3.173,P<0.05)。与假手术+正常饮食组比较,SCI+正常饮食组斑马鱼肠道组织中TNF-α、TLR-2和IL-6 mRNA表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01);与SCI+正常饮食组比较,SCI+LGG组斑马鱼肠道组织中TNF-α、TLR-2和IL-6mRNA表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。与正常饮食组(假手术+正常饮食组和SCI+正常饮食组)比较,假手术+LGG组和SCI+LGG组斑马鱼肠道内致病菌属(气单胞菌属、弧菌属)和条件致病菌属(脱硫弧菌属、短波单胞菌属)的丰度明显降低。结论:LGG能抑制斑马鱼SCI引起的肠道炎症,其机制可能与肠屏障相关分子表达水平增加和肠道致病菌丰度降低有关。
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人参活性糖肽的荧光标记鉴定及其在小鼠主要脏器组织中的分布
房晓雪, 徐伟, 周婷婷, 唐燕, 王春驰, 姜瑞芝, 邱智东, 罗浩铭
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  687-692.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200404
摘要 ( 6 )   [HTML]( ) PDF(910KB) ( 7 )  
目的:对人参活性糖肽(PGG)进行荧光标记,观察其在小鼠主要脏器组织中的分布情况及其靶向趋势。方法:以异硫氰酸荧光素(FITC)为探针对PGG进行荧光标记,采用紫外分光光度法和红外分光光度法对PGG荧光标记物(PGG-FITC)进行结构分析,采用荧光分光光度法测定其荧光取代度。将78只小鼠随机分为13组,每组6只,其中6组小鼠注射PGG-FITC,6组小鼠注射FITC,1组小鼠作为空白对照组。给药后0.5、1.0、2.0、4.0、8.0和24.0 h,采集各组小鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、肠和胃组织,采用荧光分光光度法测定小鼠主要脏器组织中PGG-FITC和FITC水平,并计算药时曲线下面积(AUC)和靶向效率(Te)。结果:PGG与FITC通过共价键连接,其荧光取代度为1.435%;与FITC组比较,PGG-FITC组小鼠主要脏器组织中的药物水平均明显升高(P<0.01),脑组织中药物水平升高更为明显;FITC组小鼠主要脏器组织中AUC值从高到低依次为肝、脑、胃、肾、肠、心、脾和肺组织,PGG-FITC组小鼠主要脏器组织中AUC值从高到低依次为脑、心、肝、肾、脾、胃、肺和肠组织。结论:利用FITC对PGG进行荧光标记,PGG经过尾静脉注射后主要富集在小鼠脑部,具有明显的脑靶向趋势。
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线粒体靶向KillerRed增强辐射诱导HeLa细胞自噬作用及其机制
于雷, 王策, 韩冰, 李鑫, 韩雨辰, 孙宇莹, 郭湘舒, 刘威武, 王志成
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  693-698.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200405
摘要 ( 7 )   [HTML]( ) PDF(869KB) ( 7 )  
目的:探讨线粒体靶向KillerRed(mtKR)增强辐射诱导HeLa细胞线粒体失能及细胞自噬作用,并阐明其相关分子机制。方法:线粒体靶向质粒PTEN诱导激酶1(Pink1)-mtKR转染HeLa细胞后,进行可见光和4 Gy X射线照射,实验分为对照组、空载体组、Pink1-mtKR组、对照+4 Gy X射线照射组、空载体+4 GyX射线照射组和Pink1-mtKR+4 GyX射线照射组。X线照射后24 h,采用流式细胞术检测线粒体膜电位(MMP)和细胞自噬率,采用生化试剂盒检测线粒体呼吸链复合物Ⅰ和Ⅲ水平,采用Western blotting法检测自噬分子P62、Pink1、帕金蛋白(parkin)和线粒体外膜转换酶20(Tom20)的表达量。结果:Pink1-mtKR瞬时转染HeLa细胞后,给予可见光联合4 Gy X射线照射,与对照组比较,Pink1-mtKR组细胞MMP、线粒体呼吸链复合物Ⅰ和Ⅲ水平均明显降低(P<0.05),细胞自噬率明显升高(P<0.05),Pink1-mtKR+4 GyX射线照射组细胞MMP、线粒体呼吸链复合物Ⅰ和Ⅲ水平进一步降低(P<0.05),自噬率进一步升高(P<0.05)。与对照组比较,Pink1-mtKR组和Pink1-mtKR+4 Gy X射线照射组细胞总蛋白中Pink1和parkin蛋白表达量无明显变化,而P62蛋白表达量增加,Pink1-mtKR组和Pink1-mtKR+4 Gy X射线照射组细胞线粒体蛋白中Pink1、parkin和Tom 20蛋白表达量均明显增加。结论:mtKR可增强辐射诱导的线粒体失能和自噬,其机制可能涉及到Pink1/parkin自噬通路的调控。
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抑瘤素M对人脐带间充质干细胞增殖和成骨分化的影响
孔宁, 周余来, 张璐, 石毅, 石艳, 孙忠平, 邹颖刚
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  699-706.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200406
摘要 ( 11 )   [HTML]( ) PDF(1184KB) ( 7 )  
目的:探讨抑瘤素M(OSM)对体外培养的人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)增殖及成骨分化的影响,阐明OSM是一种有效的成骨诱导活性因子。方法:体外培养hUCMSCs,流式细胞术检测第3代hUCMSCs表面标志物;CCK-8法测定不同剂量(0.1、1.0和10.0 μg·L-1)重组人抑瘤素M(rhOSM)处理后hUCMSCs的增殖活性。将hUCMSCs分为对照组、经典成骨诱导剂组和不同剂量(0.1、1.0和10.0 μg·L-1) rhOSM组,于成骨诱导第4、7和14天,采用BCIP/NBT法进行碱性磷酸酶(ALP)染色并定量检测细胞中ALP活性,茜素红染色法检测钙结节的生成情况并半定量分析细胞矿化活性,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测hUCMSCs中Runt相关转录因子2(Runx2)和OCN mRNA表达水平。结果:hUCMSCs符合间充质干细胞(MSCs)鉴定标准。rhOSM处理hUCMSCs 72 h,与对照组比较,10.0 μg·L-1 rhOSM组细胞增殖活性明显降低(P<0.05);处理96 h,与对照组比较,各剂量rhOSM组细胞增殖活性均明显降低(P<0.05),且各剂量rhOSM组组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。成骨诱导第4、7和14天,与经典成骨诱导剂组比较,各剂量rhOSM组细胞中ALP活性和Runx2 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05);与0.1 μg·L-1 rhOSM组比较,1.0和10.0 μg·L-1 rhOSM组ALP活性和Runx2 mRNA表达水平明显升高(P<0.05);与成骨诱导第7天比较,诱导第14天各剂量rhOSM组细胞中ALP活性和Runx2 mRNA表达水平略降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。成骨诱导第7、14和21天,与经典成骨诱导剂组比较,各剂量rhOSM组细胞矿化活性均明显升高(P<0.01);与0.1 μg·L-1 rhOSM组比较,1.0和10.0 μg·L-1 rhOSM组细胞矿化活性明显升高(P<0.05)。与经典成骨诱导组比较,各剂量rhOSM组OCNmRNA表达水平均明显升高(P<0.05);成骨诱导第7、14和21天,与0.1μg·L-1rhOSM组比较,1.0和10.0μg·L-1rhOSM组细胞中OCNmRNA表达水平明显升高(P<0.05),具有时间-剂量依赖性。结论:rhOSM通过上调Runx2和OCN的表达及增加成骨细胞ALP的活性和钙盐沉积促进hUCMSCs体外成骨分化,是一种有效的成骨诱导活性因子。
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人参皂苷Rg1联合人参皂苷Rg3对雄性生殖功能损伤模型小鼠生殖功能的改善作用
李环, 曲振廷, 钱鸿昊, 徐晗, 曲莉, 张晶, 王洪艳, 徐小磊
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  707-713.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200407
摘要 ( 13 )   [HTML]( ) PDF(1222KB) ( 11 )  
目的:探讨人参皂苷Rg1联合人参皂苷Rg3对邻苯二甲酸二丁酯(DBP)诱导的雄性生殖功能损伤模型小鼠生殖功能的改善作用,阐明人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg3对生殖功能保护作用的相关机制,为其深入开发提供实验依据。方法:28只清洁级雄性C57BL/6小鼠随机分为模型组(400 mg·kg-1 DBP)、人参皂苷Rg1+DBP组(20 mg·kg-1人参皂苷Rg1,400 mg·kg-1 DBP)、人参皂苷Rg3+DBP组(20 mg·kg-1人参皂苷Rg3,400 mg·kg-1 DBP)和联合组(20 mg·kg-1人参皂苷Rg1,20 mg·kg-1人参皂苷Rg3,400 mg·kg-1DBP),每组7只。DBP溶于玉米油于每天上午灌胃给药,人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg3溶于生理盐水于每天下午皮下注射给药,每天各给药1次,连续给药35 d。采用WLJY-9000型精子质量检测系统检测各组小鼠的精子密度、精子活力和总畸形率,HE染色观察小鼠睾丸组织病理形态表现,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清中睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)水平,采用免疫荧光法检测睾丸组织缝隙连接蛋白43(Cx43)蛋白表达水平。结果:与模型组比较,联合组小鼠睾丸脏器系数明显升高(P<0.05),人参皂苷Rg1+DBP组、人参皂苷Rg3+DBP组和联合组小鼠精子密度和精子活力明显升高(P<0.01);与模型组比较,人参皂苷Rg1+DBP组、人参皂苷Rg3+DBP组和联合组小鼠血清中T和LH水平明显升高(P<0.01),FSH水平明显降低(P<0.01),小鼠睾丸组织中Cx43蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。HE染色,模型组小鼠睾丸组织生精上皮较薄,管腔中生精细胞严重脱落;与模型组比较,人参皂苷Rg1+DBP组和人参皂苷Rg3+DBP组小鼠睾丸组织生精上皮变厚,管腔中脱落细胞较少;联合组小鼠睾丸组织生精上皮结构完整,各级生精细胞排列规则,腔内精子丰富。析因分析,人参皂苷Rg1联合人参皂苷Rg3可致小鼠精子活力(F=6.704,P=0.016)、血清中T水平(F=4.912,P=0.036)和睾丸组织中Cx43蛋白表达水平(F=6.937,P=0.018)升高。结论:人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg3单独使用及人参皂苷Rg1与人参皂苷Rg3联合使用,可提高精子密度和精子活力,使小鼠血清中T和LH水平升高,FSH水平降低,减轻小鼠生殖功能损伤,其作用机制可能与上调Cx43表达水平发挥生精保护作用有关,可抑制DBP所致的生殖功能损伤,且人参皂苷Rg1与Rg3联合使用表现为协同作用。
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刺五加果水提物和醇提物对小鼠的镇静催眠作用及其机制
王晶瑶, 赵岩, 蔡恩博, 祝洪艳, 李平亚, 刘金平
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  714-721.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200408
摘要 ( 5 )   [HTML]( ) PDF(1411KB) ( 5 )  
目的:探讨刺五加果水提物(ASF-WE)和醇提物(ASF-AE)对小鼠的镇静催眠作用,并阐明其可能作用机制,为刺五加果的开发提供依据。方法:分别制备ASF-WE和ASF-AE。120只雄性ICR小鼠随机分为空白对照组、地西泮(DZP)阳性对照组(DZP组)、不同剂量(4、8、16、32和64 mg·kg-1) ASF-WE组和不同剂量(4、8、16、32和64 mg·kg-1) ASF-AE组,每组10只,连续给药5 d,记录各组小鼠自主活动次数,利用阈下催眠剂量戊巴比妥钠诱导睡眠实验记录小鼠入睡率,利用催眠剂量戊巴比妥钠诱导睡眠实验记录小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间,筛选出ASF-WE和ASF-AE的催眠剂量和亚催眠剂量。根据模型药的不同[模型药分别为5-羟色氨酸(5-HTP)、对氯苯丙氨酸(pCPA)和氟马西尼(FLU)],分别将雄性ICR小鼠40只随机分为空白对照组、模型对照组(5-HTP组和pCPA组)、ASF-WE+模型药组和ASF-AE+模型药组,每组10只;80只雄性ICR小鼠随机分为空白对照组、FLU组、DZP组、ASF-WE组、ASF-AE组、DZP+FLU组、ASF-WE+FLU组和ASF-AE+FLU组,每组10只;连续给药5 d,采用戊巴比妥钠诱导睡眠实验记录各组小鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间,采用ELISA法检测小鼠海马组织中5-羟色胺(5-HT)和γ-氨基丁酸(GABA)水平。结果:与空白对照组比较,32和64 mg·kg-1 ASF-WE组小鼠自主活动次数明显减少(P<0.05或P<0.01),16、32和64 mg·kg-1ASF-AE组小鼠自主活动次数明显减少(P<0.05或P<0.01),16、32和64 mg·kg-1ASF-WE组和ASF-AE组小鼠入睡潜伏期明显缩短(P<0.05或P<0.01),睡眠时间明显延长(P<0.05或P<0.01)。与5-HTP组比较,ASF-WE+5-HTP组和ASF-AE+5-HTP组小鼠睡眠潜伏期明显缩短(P<0.01),睡眠时间明显延长(P<0.01),小鼠海马组织中5-HT水平明显升高(P<0.05)。与空白对照组比较,pCPA组小鼠睡眠潜伏期明显延长(P<0.01),小鼠睡眠时间明显缩短(P<0.01),表明失眠模型成功建立;与pCPA组比较,ASF-WE+pCPA组和ASF-AE+pCPA组小鼠睡眠潜伏期明显缩短(P<0.05),睡眠时间明显延长(P<0.01),小鼠海马组织中GABA水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。与ASF-WE组比较,ASF-WE+FLU组小鼠睡眠潜伏期明显延长(P<0.05),睡眠时间明显缩短(P<0.01),小鼠海马组织中GABA水平明显降低(P<0.05);与ASF-AE组比较,ASF-AE+FLU组小鼠睡眠潜伏期差异无统计学意义(P>0.05),睡眠时间明显缩短(P<0.01),小鼠海马组织中GABA水平明显降低(P<0.05)。结论:ASF-WE和ASF-AE均具有较好的镇静催眠作用,其作用机制可能与5-HT能和GABA能中枢神经系统有关。
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维生素D受体激活对小鼠胆管结扎所致肝纤维化的影响及其机制
杨帆, 李丽华
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  722-727.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200409
摘要 ( 4 )   [HTML]( ) PDF(1188KB) ( 5 )  
目的:探讨维生素D受体(VDR)激活对胆总管结扎(BDL)诱导小鼠肝纤维化的保护作用,并阐明其作用机制。方法:将60只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、假手术后给药组、模型组和治疗组,每组15只。假手术组小鼠开腹但不结扎胆总管,模型组小鼠双线结扎胆总管并中间离断,假手术后给药组和治疗组小鼠手术前3 d腹腔注射VDR激动剂帕立骨化醇(200ng·kg-1,每周3次),术后继续给药5 d。术后第5天取小鼠肝脏,采用HE染色和天狼猩红染色观察小鼠肝组织病理形态表现和肝纤维化程度。二氢乙啶(DHE)染色检测小鼠肝组织活性氧(ROS)水平。Western blotting法检测小鼠肝组织中沉默交配型信息调节3(Sirt3)、8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1(OGG1)、α-平滑肌蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(Col Ⅰ)表达水平。结果:HE染色,假手术组和假手术后给药组小鼠肝细胞形态结构完整,无炎性细胞浸润;模型组小鼠组织中出现大量浸润的炎性细胞、点状样灶状坏死区,在肝小叶之间出现条索状的胶原沉积;与模型组比较,治疗组小鼠肝组织坏死灶面积明显缩小,炎症细胞浸润明显改善。天狼猩红染色,假手术组和假手术后给药组小鼠肝组织中仅大胆管周围存在少量的纤维化;模型组小鼠肝组织汇管区胶原沉积明显;与模型组比较,治疗组小鼠肝组织中胆管周围胶原沉积减少。DHE染色,假手术组和假手术后给药组小鼠肝组织中,仅在汇管区存在少量的红色荧光;模型组小鼠肝组织中,汇管区及大胆管周围呈现出明显增多的红色荧光;与模型组比较,治疗组小鼠红色荧光的强度降低。Western blotting法检测,与假手术组和假手术后给药组比较,模型组小鼠肝组织中Sirt3蛋白表达水平明显降低(P<0.05),OGG1、α-SMA和Col Ⅰ蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组小鼠肝组织中Sirt3蛋白表达水平明显升高(P<0.05),OGG1、α-SMA和Col Ⅰ蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:VDR激活通过上调Sirt3蛋白降低氧化应激导致的肝星状细胞(HSC)激活,缓解胆汁淤积性肝纤维化。
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基于调控结肠组织中SCF和c-kit mRNA表达分析苍术燥性效应量效关系
谢颖, 周仲实, 刘艳菊, 肖锟钰, 雷林
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  728-732.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200410
摘要 ( 3 )   [HTML]( ) PDF(1536KB) ( 5 )  
目的:基于结肠组织中干细胞因子(SCF)及其受体c-kit mRNA表达分析苍术燥性效应的量效关系,确定引起小鼠燥性反应的苍术基础剂量,为临床用药提供参考。方法:75只C57BL/6小鼠分为对照组和185、370、555及740 mg·kg-1苍术挥发油组,每组15只,给药体积为0.015 mL·g-1,灌胃给药14 d,对照组给予同体积1%吐温-20溶液。测定小鼠日均饮水量和日均尿量,采用免疫组织化学法检测小鼠肾组织中水通道蛋白2(AQP2)蛋白表达水平,计算小鼠脾脏和肾脏系数,采用RT-PCR法检测小鼠结肠组织中SCF和c-kit mRNA表达水平,根据以上指标考察各组小鼠燥性效应。结果:与对照组比较,185和370 mg·kg-1苍术挥发油组小鼠日均饮水量、日均尿量、肾组织中AQP2蛋白表达水平、肾脏系数和脾脏系数差异均无统计学意义(P>0.05),小鼠结肠组织中SCF mRNA表达水平明显升高(t=4.859,P<0.01;t=6.651,P<0.05),185 mg·kg-1苍术挥发油组小鼠结肠组织中c-kit mRNA表达水平明显升高(t=2.946,P<0.05),而370 mg·kg-1苍术挥发油组差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,555 mg·kg-1苍术挥发油组小鼠日均尿量、结肠组织中c-kit mRNA表达水平明显降低(t=7.708,P<0.01;t=8.465,P<0.01),其他指标差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,740 mg·kg-1苍术挥发油组小鼠饮水量、肾组织中AQP2蛋白表达水平明显升高(t=3.554,P<0.01;t=4.636,P<0.01),日均尿量、脾脏系数、结肠组织中SCF和c-kit mRNA表达水平明显降低(t=7.708,P<0.01;t=4.985,P<0.01;t=7.314,P<0.01;t=28.45,P<0.01)。结论:低剂量(185和370 mg·kg-1)苍术挥发油对健康小鼠无明显燥性作用,而高剂量(555 mg·kg-1以上剂量)苍术挥发油可能通过影响SCF/c-kit信号通路对小鼠产生明显的燥性作用。
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益生菌对卵巢摘除致雌激素缺乏小鼠牙周组织中IL-17表达的影响及其意义
黄江勇, 李婵秀, 郑志超, 王洪娟, 郭吕华, 吴哲, 罗涛
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  733-738.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200411
摘要 ( 5 )   [HTML]( ) PDF(1403KB) ( 4 )  
目的:探讨益生菌干预对雌激素缺乏小鼠牙周组织中白细胞介素17(IL-17)表达的影响,阐明雌激素缺乏与牙周炎关联性的可能机制。方法:选取8周龄健康雌性C57BL/6J小鼠15只,随机分为假手术组、卵巢摘除组和益生菌干预组(卵巢摘除术后行益生菌灌服),每组5只。采用平均骨密度测量技术检测实验前后小鼠骨矿物质密度(BMD),实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测小鼠骨髓细胞和牙龈组织中IL-17mRNA表达水平,流式细胞术检测小鼠骨髓中辅助性T细胞17(Th17)占CD4+ TCRβ+细胞的百分率。结果:与假手术组比较,卵巢摘除组小鼠BMD明显降低(P<0.05),骨髓细胞和牙龈组织中IL-17 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05),Th17细胞占骨髓CD4+TCRβ+细胞百分率明显升高(P<0.05);与卵巢摘除组比较,益生菌干预组小鼠BMD明显增加(P<0.05),骨髓细胞和牙龈组织中IL-17 mRNA表达水平均明显降低(P<0.05),Th17细胞占骨髓CD4+TCRβ+细胞百分率明显降低(P<0.05);与假手术组比较,益生菌干预组小鼠股骨BMD、骨髓细胞和牙龈组织中IL-17 mRNA表达水平及Th17细胞占骨髓CD4+TCRβ+细胞百分率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:益生菌干预能阻止雌激素缺乏导致的小鼠牙周组织中IL-17水平升高,对雌激素缺乏引起的牙周炎具有预防作用。
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巨噬细胞刺激1受体抑制剂BMS777607对肺癌细胞增殖和凋亡的影响
贾答淇, 孔雯聪, 苏荣健, 杜晓媛, 贺武斌
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  739-744.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200412
摘要 ( 7 )   [HTML]( ) PDF(1274KB) ( 7 )  
目的:探讨巨噬细胞刺激1受体(MST1R)抑制剂BMS777607对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能的机制。方法:选择人肺癌A549细胞,不同浓度(1、5、10、15和20μmol·L-1) BMS777607处理细胞48 h,同时设对照组,采用MTT法检测各组细胞增殖率;不同浓度(1、5、10、15和20μmol·L-1) BMS777607处理A549细胞14 d,同时设对照组,采用克隆形成实验观察各组细胞克隆形成情况并检测各组细胞增殖率;不同浓度(10和20μmol·L-1) BMS777607处理A549细胞24h,同时设对照组,采用EdU掺入法检测各组细胞中EdU阳性细胞率;不同浓度(1、5、10、15和20μmol·L-1) BMS777607处理A549细胞48h,同时设对照组,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;应用Western blotting法检测各组细胞中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、聚酰苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、活化型PARP(Cleaved-PARP)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase 9)和活化型Caspase9(Cleaved-Caspase9)蛋白表达水平。结果:MTT实验,与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01),且呈浓度和时间依赖性。克隆形成实验,与对照组比较,10μmol·L-1BMS777607组细胞克隆形成数量明显减少,20μmol·L-1BMS777607组细胞几乎无克隆形成;与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01)。EdU掺入法实验,与对照组比较,10和20μmol·L-1BMS777607组细胞中EdU阳性细胞率均明显降低(P<0.05或P<0.01)。双染流式细胞术检测,与对照组比较,10、15和20μmol·L-1 BMS777607组A549细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞中p-AKT和p-ERK蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Cleaved-PARP和Cleaved-Caspase9蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:MST1R抑制剂BMS777607能够抑制肺癌A549细胞的增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与其抑制p-AKT、p-ERK表达和促进PARP、Caspase9表达有关。
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人COX1蛋白真核表达载体的构建及其生物信息学分析
董媛, 李建华, 贾俊臻, 冯文卓, 孟晨阳, 贺佳美, 唐一鑫, 王会岩
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  745-750.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200413
摘要 ( 3 )   [HTML]( ) PDF(1534KB) ( 10 )  
目的:构建表达重组环氧合酶1(COX1)真核表达载体,验证其体外能够催化底物合成前列腺素E1(PGE1),以寻找高效获得PGE1的方法。方法:提取人微血管内皮细胞(HMECs)总RNA,逆转录成cDNA,以cDNA为模板,PCR扩增人COX1基因,经双酶切后与真核表达载体pCMV6连接,构建重组pCMV6-COX1真核表达质粒。通过生物信息学在线工具分析COX1蛋白的疏水性、跨膜区域、信号肽、二级结构和三级结构。采用脂质体将重组质粒转染至HEK-293F细胞中,将细胞随机分为对照组(未转染重组质粒的HEK-293F细胞)、转染重组质粒2 d组和转染重组质粒5 d组,分别收集细胞和细胞培养上清,Western blotting法检测COX1蛋白表达水平。比较真核表达的COX1蛋白与羊精囊提取法制备的粗酶混合物催化底物二高-γ-亚麻酸合成PGE1的酶活性。结果:经PCR、双酶切和测序鉴定,成功构建pCMV6-COX1重组载体,目的基因长度约为1800 bp。生物信息学分析,COX1蛋白为水溶性蛋白,1~53位氨基酸为信号肽,34~53位氨基酸处于跨膜区域,有36个丝氨酸磷酸化位点、14个苏氨酸磷酸化位点和9个酪氨酸磷酸化位点。二级结构预测,不规则卷曲所占比例为46.20%,其次为α螺旋占41.03%。延伸链和β-转角分别占10.18%和2.58%。Western blotting法检测,重组质粒成功转染至HEK-293F细胞中,与转染重组质粒2 d组比较,转染重组质粒5 d组细胞培养上清中COX1蛋白表达水平明显升高(P<0.05),蛋白相对分子质量为70000。当底物浓度为1%时,COX1蛋白催化底物合成PGE1的含量为(50.01±1.37) ng·L-1,其活性相当于5个羊精囊制备的粗酶活性的(90.30±0.06)%。结论:通过基因工程技术构建和表达的COX1蛋白能够催化底物合成PGE1并满足临床要求。
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沉默重组蛋白2对NCI-H1688细胞的抑制作用及其Wnt/β连环蛋白信号通路机制
陈艳, 潘殿柱, 刘忠, 马艳梅, 张岚
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  751-758.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200414
摘要 ( 6 )   [HTML]( ) PDF(1947KB) ( 6 )  
目的:探讨T细胞淋巴瘤常见重排蛋白2(Frat2)通过Wnt/β连环蛋白(β-catenin)信号通路对小细胞肺癌NCI-H1688细胞增殖的影响,阐明其可能机制。方法:选取生长状态良好的人小细胞肺癌NCI-H1688细胞和正常支气管上皮样细胞HBE细胞,采用Western blotting法和逆转录实时荧光定量-聚合酶链反应(Real-Time RT-qPCR)法分别检测NCI-H1688细胞和HBE细胞中Frat2蛋白及mRNA表达水平。NCI-H1688细胞随机分为空白对照组、阴性对照组、Frat2-siRNA组和Frat2-siRNA+XAV组。空白对照组细胞不转染,阴性对照组细胞转染阴性对照慢病毒,Frat2-siRNA组转染Frat2-siRNA慢病毒,Frat2-siRNA+XAV组转染Frat2-siRNA慢病毒并同时加入4 μmol·L-1Wnt信号通路抑制剂XAV939。采用Western blotting法和Real-Time RT-qPCR法分别检测转染后各组细胞中Frat2蛋白和mRNA表达水平,采用MTT法检测各组细胞增殖活性,采用流式细胞术检测不同细胞周期细胞百分率,采用Western blotting法检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、c-myc、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、β-catenin和磷酸化糖原合成酶激酶3(pGSK-3β)蛋白表达水平。结果:与HBE细胞比较,NCI-H1688细胞中Frat2蛋白和mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。与空白对照组和阴性对照组比较,Frat2-siRNA组NCI-H1688细胞中Frat2蛋白和mRNA表达水平明显升高(P<0.05);空白对照组与阴性对照组NCI-H1688细胞中Frat2蛋白和mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组和阴性对照组比较,Frat2-siRNA组细胞增殖活性降低(P<0.05),G0/G1期细胞百分率升高(P<0.05),S期和G2/M期细胞百分率降低(P<0.05),PCNA、c-myc、Cyclin D1、β-catenin和pGSK-3β蛋白表达水平降低(P<0.05);与Frat2-siRNA组比较,Frat2-siRNA+XAV组细胞增殖活性降低(P<0.05),G0/G1期细胞百分率升高(P<0.05),S期和G2/M期细胞百分率降低(P<0.05),PCNA、c-myc、Cyclin D1、β-catenin和pGSK-3β蛋白表达水平降低(P<0.05);空白对照组与阴性对照组上述各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:沉默Frat2可抑制小细胞肺癌细胞增殖,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。
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脑梗死模型大鼠缺血脑组织中胰岛素样生长因子结合蛋白3表达水平及其与血管新生的关系
卜一, 张硕, 钱旭东, 王红梅, 窦志杰
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  759-764.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200415
摘要 ( 2 )   [HTML]( ) PDF(1527KB) ( 3 )  
目的:探讨脑梗死大鼠缺血脑组织中胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)表达水平及其与血管新生的关系,阐明IGFBP-3在脑梗死血管新生中的作用。方法:将SD大鼠随机分为对照组和模型组,模型组大鼠又分为模型1d组、模型3d组和模型7d组3个亚组。采用线栓法建立大脑中动脉栓塞缺血大鼠模型。采用神经行为学评分评估大鼠神经行为,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑梗死情况,HE染色观察脑组织病理形态表现,免疫组织化学染色检测大鼠脑组织中IGFBP-3和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠脑组织中IGFBP-3和VEGF mRNA表达水平,免疫荧光染色检测大鼠脑组织中缺血半暗区微血管密度。结果:对照组大鼠无神经功能缺损和脑梗死灶;模型组大鼠24h神经行为学评分为(1.86±0.73)分,脑梗死体积为(28.34±3.57)%。HE染色,对照组大鼠脑组织正常,模型1d组大鼠脑组织出现水肿,模型3d组大鼠脑组织水肿和坏死明显,模型7d组大鼠脑组织水肿和坏死减轻。与对照组比较,各模型组大鼠脑组织中IGFBP-3和VEGF蛋白及mRNA表达水平和缺血半暗区微血管密度均明显升高(P<0.01),模型3d组大鼠脑组织上述各指标最高,模型7d组大鼠脑组织中IGFBP-3和VEGF蛋白及mRNA表达水平和缺血半暗区微血管密度降低。大鼠脑组织中IGFBP-3 mRNA表达水平与VEGF mRNA表达水平和微血管密度均呈正相关关系(r=0.563,P<0.05;r=0.612,P<0.05)。结论:脑梗死大鼠缺血脑组织中IGFBP-3表达水平升高可能促进脑梗死缺血后血管新生。
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丹皮酚对心力衰竭大鼠心肌损伤的保护作用及其机制
高瑞敏, 康玲玲, 侯防震
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  765-770.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200416
摘要 ( 8 )   [HTML]( ) PDF(2265KB) ( 7 )  
目的:探讨丹皮酚对心力衰竭大鼠心肌损伤的保护作用,初步阐明其药理学机制。方法:以腹腔注射阿霉素的方法复制心力衰竭大鼠模型,造模成功后大鼠随机分为模型组(n=10)、卡托普利组(n=11)、低剂量丹皮酚组(n=11)和高剂量丹皮酚组(n=11),并以正常大鼠作为对照组(n=10)。大鼠造模成功后开始给药,连续给药5周,记录大鼠体质量。末次给药后麻醉大鼠,观察大鼠心功能指标[平均动脉压(MAP)、心率(HR)、左室舒张末压(LVEDP)、左室收缩压(LVSP)、左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)和左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)]的变化。取大鼠眼眶外周血分离血清,采用ELISA法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平。随机选取5只大鼠麻醉后,在无菌操作下取出心脏,采用Western blotting法检测各组大鼠心肌组织中Bax、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8(Caspase-8)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)和细胞色素C(Cyt-C)蛋白表达水平。采用HE染色法观察大鼠心肌组织病理形态表现。结果:与对照组比较,模型组大鼠体质量明显降低(P<0.05),MAP和LVEDP明显升高(P<0.05),而HR、LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax明显降低(P<0.05),血清中TNF-α和IL-6水平明显升高(P<0.05),心肌组织中Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和Cyto-C蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,卡托普利组和低、高剂量丹皮酚组大鼠体质量明显升高(P<0.05),心功能指标明显改善(P<0.05),血清中TNF-α和IL-6水平不同程度降低(P<0.05),心肌组织中Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和Cyt-C蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。HE染色,与对照组比较,模型组大鼠心肌组织受损明显,心肌细胞广泛水肿;与模型组比较,卡托普利组和低、高剂量丹皮酚组大鼠心肌纤维排列和心肌间质水肿等现象明显好转。结论:丹皮酚对心力衰竭大鼠心肌具有保护作用,其机制可能与其改善血流动力学、抗炎、抗凋亡及保护心肌细胞等有关,高剂量丹皮酚在心功能保护及抗凋亡方面效果较好。
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刺五加苷B对疲劳小鼠学习记忆能力的改善作用及其激活Keap1/Nrf2/ARE信号通路的机制
张倩, 冯晴霞, 周正乙, 李睿祺, 方雷, 杨秋楠, 盛瑜, 卢学春, 杜培革, 安丽萍
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  771-778.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200417
摘要 ( 7 )   [HTML]( ) PDF(1540KB) ( 10 )  
目的:探讨刺五加苷B(ELB)对疲劳小鼠学习记忆能力的影响,阐明其可能的作用机制。方法:60只ICR小鼠随机分为对照组(灌胃给予蒸馏水,静坐实验)、模型组(灌胃给予蒸馏水,游泳实验)、ELB(C)组(灌胃给予80 mg·kg-1 ELB,静坐实验)及ELB(M)组(灌胃给予80 mg·kg-1 ELB,游泳实验),每组15只。持续给药4周后采用转棒实验观察小鼠的抗疲劳能力,采用Morris水迷宫实验和避暗实验检测疲劳小鼠的学习记忆能力,采用比色法检测小鼠血清中乳酸(LD)水平,微量酶标法检测小鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)活性,脲酶法检测小鼠血清中尿素氮(BUN)水平,羟胺法检测小鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法(TBA)检测小鼠脑组织中丙二醛(MDA)水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠脑组织中活性氧簇(ROS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、γ氨基丁酸(GABA)和谷氨酸(GLU)水平,分光光度法检测小鼠脑组织中三磷酸腺苷酶(ATPase,包括Na+K+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase和Ca2+Mg2+-ATPase)活性,Western blotting法检测小鼠脑组织中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达水平,HE染色法观察小鼠脑组织海马区神经元结构。结果:与对照组比较,模型组小鼠转棒时间明显缩短(P<0.05),水迷宫潜伏期明显延长(P<0.05),避暗潜伏期缩短(P<0.05),错误次数增加(P<0.05),血清中LDH活性和LD、BUN水平升高(P<0.05),脑组织中eNOS水平和SOD、Na+K+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase、Ca2+Mg2+-ATPase活性及GLU/GABA比值降低(P<0.05),MDA和ROS水平升高(P<0.05),脑组织中Keap1蛋白表达水平升高(P<0.05),Nrf2和HO-1蛋白表达水平降低(P<0.05);ELB(C)组小鼠转棒时间延长(P<0.05),但其余各检测指标差异均无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,ELB(M)组小鼠转棒时间延长(P<0.05),水迷宫潜伏期缩短(P<0.05),避暗潜伏期延长(P<0.05),错误次数减少(P<0.05),血清中LDH活性和LD、BUN水平降低(P<0.05),脑组织中eNOS水平和SOD、Na+K+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase、Ca2+Mg2+-ATPase活性及GLU/GABA比值升高(P<0.05),MDA和ROS水平降低(P<0.05),脑组织中Keap1蛋白表达水平降低(P<0.05),Nrf2和HO-1蛋白表达水平升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠海马区神经元排列松散,层次不清,部分海马区神经元形态有明显的病理学改变;与模型组比较,ELB(C)和ELB(M)组小鼠脑组织海马区结构层次清晰,神经元增多,排列较为紧密有序,海马区神经元形态和体积趋于正常。结论:ELB能够改善疲劳小鼠的学习记忆能力,其机制可能与调节Keap1/Nrf2/ARE信号通路的相关因子表达有关。
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盐酸小檗碱对宫颈癌HeLa细胞外泌体的影响及其机制
王景, 葛静, 王旭, 房桂英, 代丽丽, 刘晶
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  779-785.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200418
摘要 ( 14 )   [HTML]( ) PDF(1375KB) ( 5 )  
目的:观察盐酸小檗碱对宫颈癌HeLa细胞释放外泌体的干预作用,探讨其对癌细胞增殖和转移能力的影响。方法:将HeLa细胞分为对照组和低、中、高剂量盐酸小檗碱组,分别采用0、10、20和40 mg·L-1盐酸小檗碱干预HeLa细胞24 h,高速离心提取外泌体,Western blotting法检测外泌体标志物CD81和CD63及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路相关蛋白表达水平,MTT比色法检测细胞体外生长抑制率,划痕实验检测细胞迁移率,Transwell小室实验检测穿膜细胞数。结果:与对照组比较,低、中和高剂量盐酸小檗碱组细胞外泌体中外泌体标志物CD81和CD63蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞生长抑制率明显升高(P<0.05),细胞迁移率和穿膜细胞数明显降低(P<0.05),细胞中PI3K、Akt和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与低剂量盐酸小檗碱组比较,中和高剂量盐酸小檗碱组细胞外泌体中CD81和CD63蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞生长抑制率明显升高(P<0.05),细胞迁移率和穿膜细胞数明显降低(P<0.05),细胞中PI3K、Akt和p-Akt蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与中剂量盐酸小檗碱组比较,高剂量盐酸小檗碱组细胞外泌体中CD81和CD63蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞生长抑制率明显升高(P<0.05),细胞迁移率和穿膜细胞数明显降低(P<0.05),细胞中PI3K、Akt和p-Akt蛋白表达水平明显降低(P<0.05),具有浓度依赖性。结论:盐酸小檗碱能够抑制宫颈癌细胞外泌体分泌和癌细胞增殖,降低癌细胞的侵袭和转移能力,其作用机制可能与下调PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达有关。
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EZH2抑制剂GSK126对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响
张爽爽, 贺武斌, 苏荣健, 杜晓媛
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  786-791.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200419
摘要 ( 1 )   [HTML]( ) PDF(1293KB) ( 6 )  
目的:探讨zeste基因增强子同源物2(EZH2)特异性抑制剂GSK2816126(GSK126)对肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能机制。方法:常规体外培养A549细胞,将细胞分为对照组和不同浓度(1.0、2.5、5.0、10.0和15.0μmol·L-1) GSK126组。MTT比色法检测各组细胞存活率,克隆形成实验检测各组细胞集落形成数并计算克隆形成率,EdU细胞增殖成像法检测各组细胞增殖率,Hoechst-33342荧光染色法观察各组细胞凋亡形态表现,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、B细胞淋巴瘤-2原癌基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)和活化型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved-Caspase-3)蛋白表达水平。结果:MTT比色法,与对照组比较,随着GSK126浓度升高,不同浓度GSK126组细胞存活率明显降低(P<0.05);克隆形成实验,与对照组比较,随着GSK126浓度升高,不同浓度GSK126组克隆形成率逐渐降低(P<0.05);EdU成像,与对照组比较,随着GSK126浓度升高,不同浓度GSK126组增殖率明显降低(P<0.01);Hoechst-33342染色,与对照组比较,随着GSK126浓度的升高,5、10和15μmol·L-1GSK126组凋亡细胞数明显增加;流式细胞术检测,与对照组比较,随着GSK126浓度升高,不同浓度GSK126组细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。Western blotting法,与对照组比较,随着GSK126浓度升高,不同浓度GSK126组细胞中p-AKT和Bcl-2蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05),Bax和Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平逐渐升高(P<0.05)。结论:GSK126可能通过降低AKT磷酸化水平抑制细胞增殖,并且通过诱导Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路活化,激活凋亡途径,促进肺癌细胞凋亡。
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舒芬太尼后处理通过ERK1/2介导的p70S6K信号通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用
闻颖, 吴巧玲, 刘国利
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  792-797.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200420
摘要 ( 5 )   [HTML]( ) PDF(1011KB) ( 5 )  
目的:探讨舒芬太尼后处理通过细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)介导的p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)信号传导通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的影响,阐明舒芬太尼后处理对大鼠MIRI的保护作用。方法:72只SD雄性大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注(I/R)组、二甲基亚砜(DMSO)组、PD组(缺血末到再灌注开始后15min给予20 μmol·L-1ERK的抑制剂PD98059)、舒芬太尼后处理组(Sufen组)和Sufen+PD组。除假手术组外,其余各组大鼠均缺血30min后再灌注2 h。于缺血前即刻(T0)和再灌注30min(T1)、60min(T2)、90 min(T3)、2h(T4)时记录心率(HR)、平均动脉压(MAP),再灌注末测定大鼠心肌梗死面积,采用Western blotting法检测大鼠心肌组织中p-ERK1/2和p-p70S6K蛋白表达水平。结果:与T0时比较,T1~T4时I/R组、Sufen组、DMSO组、PD组和PD+Sufen组大鼠MAP和HR降低(P<0.05);与假手术组比较,其余各组大鼠HR降低(P<0.05),MAP升高(P<0.05);与I/R组比较,T3时Sufen组大鼠HR降低(P<0.05),MAP升高(P<0.05)。与I/R组比较,Sufen组大鼠心肌梗死面积明显减少(P<0.05);与Sufen组比较,PD+Sufen组大鼠心肌梗死面积明显增加(P<0.05)。与假手术组比较,I/R组、Sufen组和DMSO组大鼠心肌组织中p-ERK1/2和p-p70S6K蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与I/R组比较,Sufen组大鼠心肌组织中p-ERK1/2和p-p70S6K蛋白表达水平均进一步升高(P<0.05);与Sufen组比较,PD+Sufen组大鼠心肌组织中的p-ERK1/2和p-p70S6K蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。结论:舒芬太尼后处理通过ERK1/2介导的p70S6K信号通路对大鼠MIRI起保护作用,可改善MIRI大鼠的心功能指标,减少心肌梗死面积。
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宫颈癌HeLa细胞外泌体对细胞迁移和侵袭的影响及其Wnt/β-catenin信号通路机制
刘晶, 王景, 葛静, 冯艳萍, 房桂英, 王旭, 杨艳红, 李林
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  798-803.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200421
摘要 ( 7 )   [HTML]( ) PDF(2367KB) ( 6 )  
目的:探讨宫颈癌HeLa细胞外泌体对细胞迁移、侵袭及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响,阐明其外泌体在宫颈癌发生发展过程中的可能作用机制。方法:取对数生长期宫颈癌HeLa细胞,采用超速离心法分离宫颈癌HeLa细胞外泌体,透射电镜下观察外泌体形态表现,Western blotting法检测外泌体标志蛋白CD63和CD81的表达,鉴定分离出来的外泌体。将HeLa细胞分为外泌体组(Exo组)和对照组,2组细胞分别用含和不含HeLa细胞外泌体的培养基培养。共聚焦显微镜下观察HeLa细胞摄取外泌体情况,其中外泌体采用PKH26荧光标记,HeLa细胞用DAPI荧光进行核染色,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验测定细胞迁移能力,Western blotting法检测细胞中Wnt1、β-catenin和T细胞因子4(TCF4)蛋白表达水平。结果:透射电镜下观察,HeLa细胞中分离的外泌体为是圆形或椭圆形、直径为40~100 nm的囊泡状小体,且富含CD63和CD81蛋白。共聚焦显微镜下观察,Exo组HeLa细胞膜表面有外泌体附着,而对照组HeLa细胞膜表面无外泌体附着。Transwell小室实验,Exo组HeLa细胞中侵袭细胞数明显高于对照组(t=17.894,P<0.01)。细胞划痕实验,Exo组HeLa细胞迁移距离明显长于对照组(t=9.689,P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组比较,Exo组HeLa细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt1、β-catenin和TCF4蛋白表达水平均明显升高(t=13.159,P<0.01;t=15.478,P<0.01;t=7.734,P<0.01)。结论:宫颈癌HeLa细胞来源的外泌体可促进宫颈癌细胞的侵袭和迁移能力,其机制可能与HeLa细胞来源外泌体可促进Wnt/β-catenin信号通路的激活及下游TCF4基因的表达有关。
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临床研究
基于GEO数据库生物信息学方法分析子宫内膜癌相关基因和候选通路
王治, 洪莉, 李素廷, 曾婉玲
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  804-809.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200422
摘要 ( 4 )   [HTML]( ) PDF(1836KB) ( 7 )  
目的:通过生物信息学方法分析与子宫内膜癌(EC)发生发展相关的关键基因和候选通路,探讨EC的发病机制和治疗靶点。方法:自公共基因芯片数据库(GEO)下载EC芯片数据集GSE17025和GSE63678,使用GEO2R在线分析工具和R软件筛选EC癌组织与癌旁组织的差异表达基因(DEGs),并对DEGs进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析,采用String数据库进行蛋白质-蛋白质互作网络(PPI)分析,最后采用Cytoscape软件对PPI网络进行可视化并进行模块分析。结果:对芯片数据集GSE17025和GSE63678进行DEGs分析后共获取100个共同上调基因和106个共同下调基因。GO富集分析DEGs主要富集于有丝分裂染色体分离、核分裂和细胞器分裂等生物学过程;KEGG信号通路分析DEGs主要富集于细胞周期、miRNA、p53信号通路和2型糖尿病等信号通路。通过Cytoscape软件分析,PPI网络中细胞分裂周期基因20(CDC20)、极光激酶A(AURKA)、细胞周期蛋白B1(CCNB1)、泛素E3连接酶(DTL)、中心体相关蛋白55(CEP55)、细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、驱动蛋白家族成员11(KIF11)、母体胚胎亮氨酸拉链激酶(MELK)、细胞周期蛋白B2(CCNB2)和苯并咪唑出芽抑制解除同源物蛋白1(BUB1)被筛选为关键基因。结论:细胞周期相关基因与通路调控网络的失调可能是EC发病的主要机制。
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高龄不孕患者降调节后激素替代内膜准备方案对冻融胚胎移植周期妊娠结局的影响
王蕾, 颜晓红, 林莉, 李友筑
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  810-815.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200423
摘要 ( 5 )   [HTML]( ) PDF(1849KB) ( 8 )  
目的:探讨降调节后联合激素替代和单纯激素替代2种内膜准备方法对高龄不孕患者冻融胚胎移植(FET)妊娠结局的影响,分析降调节后激素替代FET周期临床妊娠结局的影响因素,为高龄不孕患者冻融胚胎移植周期内膜准备方案的选择提供依据。方法:选择年龄≥35岁首次行FET高龄不孕患者211例,按子宫内膜准备方案分为降调节后激素替代周期组(n=114)和激素替代周期组(n=97)。回顾性分析2组患者年龄、不孕年限、体质量指数(BMI)、抗苗勒管激素(AMH)水平、基础性激素、转化日内膜厚度、移植胚胎数、移植优质胚胎数、移植优质胚胎率、多胎妊娠率、临床妊娠率和流产率,并对高龄不孕患者降调节后激素替代周期的妊娠结局影响因素进行二项Logistic回归分析。结果:2组患者年龄、不孕年限、BMI、AMH、移植胚胎数、移植优质胚胎数、移植优质胚胎率、多胎妊娠率和流产率比较差异无统计学意义(P>0.05)。降调节后激素替代周期组患者临床妊娠率及胚胎着床率均明显高于激素替代周期组(χ2=9.964,P<0.05;χ2=9.964,P<0.05)。二项Logistic回归分析,患者年龄(OR=0.805,95% CI:0.697~0.930)和移植优质胚胎数(OR=4.098,95% CI:1.597~10.514)是影响高龄不孕患者降调节后激素替代周期妊娠结局的关键因素。结论:采用降调节后激素替代周期的高龄不孕患者在FET中能得到更好的临床结局,年龄和移植优质胚胎数是影响高龄不孕患者降调节后激素替代周期妊娠结局的关键因素。
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血液学相关指标在ICU肿瘤患者细菌感染早期诊断中的应用
李铤, 陈媛媛, 孙洪帅, 于秀艳, 吴雪峰
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  816-821.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200424
摘要 ( 6 )   [HTML]( ) PDF(1846KB) ( 5 )  
目的:测定重症加强护理病房(ICU)肿瘤患者血液学相关指标水平,探讨其在诊断ICU肿瘤患者早期细菌感染中的临床应用。方法:回顾性分析ICU中256例肿瘤患者完整临术资料,根据临床细菌感染标准分为感染组(67例)和非感染组(189例),根据死亡情况分为存活组(193例)和死亡组(63例),测定感染组和非感染组ICU肿瘤患者凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)和D-二聚体(DD)、降钙素原(PCT)水平及白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEU)、淋巴细胞(LYM)计数,并计算中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)。通过受试者工作特征曲线(ROC)和ROC曲线下面积(AUC)评价上述指标诊断ICU肿瘤患者早期细菌感染以及PCT预测ICU早期细菌感染肿瘤患者死亡风险的灵敏度和特异度。结果:与非感染组比较,感染组ICU肿瘤患者PT、APTT、DD、PCT和NLR均明显升高(P<0.05或P<0.01)。与PCT<0.25 μg·L-1组比较,0.25 μg·L-1≤PCT<2.00 μg·L-1、2.00 μg·L-1≤PCT<10.00 μg·L-1和PCT≥10.00 μg·L-1组ICU早期细菌感染肿瘤患者DD和NLR水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),2.00 μg·L-1≤PCT<10.00 μg·L-1和PCT≥10.00 μg·L-1组ICU早期细菌感染肿瘤患者PT和APTT均明显升高(P<0.05)。PT、APTT、DD、NLR和PCT诊断ICU肿瘤患者早期细菌感染的AUC、灵敏度和特异度分别为0.636、60.8%和59.1%,0.622、64.6%和58.1%,0.672、69.6%和58.1%,0.752、74.7%和65.6%以及0.855、70.9%和83.9%,差异均有统计学意义(P<0.01);死亡组ICU早期细菌感染肿瘤患者PCT水平明显高于生存组(P<0.05),PCT预测ICU早期细菌感染肿瘤患者死亡风险的AUC为0.803(95% CI:0.749~0.857),临界(Cut-off)值为6.72 μg·L-1,灵敏度和特异度分别为63.2%和79.1%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:PT、APTT、DD、PCT和NLR可作为ICU肿瘤患者早期细菌感染的诊断指标,NLR灵敏度最高,PCT特异度最高,PCT可作为ICU早期细菌感染肿瘤患者死亡风险的预测指标。
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微型CT检测随机负荷疲劳试验后不同根管充填材料对牙根抗折性的影响
张力, 全涛, 刘大勇, 贾智
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  822-827.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200425
摘要 ( 5 )   [HTML]( ) PDF(2609KB) ( 8 )  
目的:采用微型CT检测体外疲劳试验后牙根的裂纹,探讨2种不同根管充填材料对牙根抗折性的影响。方法:60颗新鲜拔除的人单根管前牙随机分为对照组、OrthoMTA组和Gutta-Percha+AH-plus组,每组20颗。全部样本去除牙冠后使用BLX镍钛系统预备根管,对照组不进行根管充填,OrthoMTA组采用OrthoMTA根管充填,Gutta-Percha+AH-plus组采用Gutta-Percha和AH-plus封闭剂充填。将所有样品置于机械循环机(500~1 500N,2Hz正弦交替,循环7 200次)进行体外疲劳试验。采用微型CT检测各组牙根内部裂纹并进行裂纹严重程度评分。结果:微型CT扫描,受力后对照组、OrthoMTA组和Gutta-Percha+AH-plus组大部分牙根出现了不同程度裂纹,包括不完全裂纹、完全裂纹以及2种裂纹并存,且绝大多数裂纹方向为近远中方向。OrthoMTA组牙根裂纹评分低于对照组,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05);Gutta-Percha+AH-plus组牙根的裂纹评分高于对照组,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05);OrthoMTA组牙根裂纹评分低于Gutta-Percha+AH-plus组,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:随机负荷疲劳试验证实体外牙体阻力模型制备成功。OrthoMTA完全根管充填和Gutta-Percha+AH-plus根管充填对牙根抗折性的影响无明显差异。
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桩核冠、髓腔固位冠和嵌体冠修复低矮磨牙残冠后产生的生物力学效应比较及其临床意义
李韦萱, 金巨楼, 赵楚翘, 刘定坤, 邹俊东, 王明霞, 刘志辉
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  828-833.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200426
摘要 ( 7 )   [HTML]( ) PDF(2256KB) ( 7 )  
目的:应用有限元分析对比桩核冠、髓腔固位冠和嵌体冠修复低矮磨牙残冠后的应力分布情况及固位效果,探讨低矮磨牙残冠的优选修复方案。方法:选择志愿者健康、完整的左侧下颌第一磨牙作为实验样本,应用锥形束CT(CBCT)扫描获得其影像学数据。利用Mimics、Geomagic和CATIA等逆向工程软件建立完整的下颌第一磨牙有限元模型。在此基础上构建3组低矮磨牙残冠模型(剩余临床牙冠的高度分别为1、2和3mm),并建立桩核冠、髓腔固位冠和嵌体冠3组修复体分别修复上述3组残冠的有限元模型,共9个实验组。在Abaqus软件中对模型施加垂直向及斜向静态载荷模拟咀嚼时牙齿受力,施加强制性旋转位移载荷模拟修复体旋转脱位。观察各组模型牙本质的von Mise应力峰值和分布云图,以及各组修复体为抵抗旋转脱位所产生的非轴向固位力和脱位时粘接剂的破坏情况。结果:von Mises应力峰值,垂直载荷下,嵌体冠 > 髓腔固位冠 > 桩核冠;斜向载荷下,髓腔固位冠 > 嵌体冠 > 桩核冠。应力分布云图,桩核冠的根尖1/3处、髓腔固位冠髓室底部和嵌体冠牙颈部及根部应力集中现象明显。非轴向固位力,1mm残冠组,桩核冠 > 嵌体冠 > 髓腔固位冠;2和3mm残冠组,嵌体冠 > 桩核冠 > 髓腔固位冠。刚度退化云图,旋转脱位时粘接剂开裂的面积由大到小依次为嵌体冠>髓腔固位冠>桩核冠。结论:从保护牙体组织及维持修复体长期稳定性的角度分析,桩核冠是修复低矮磨牙残冠较为理想的修复方式。
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浆细胞样树突状细胞和Foxp3+调节性T细胞在结直肠癌组织中的表达及其意义
王丹, 廖丹, 李红, 熊立秋, 武莹, 董营, 盖晓东
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  834-838.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200427
摘要 ( 5 )   [HTML]( ) PDF(276KB) ( 7 )  
目的:探讨CD123+浆细胞样树突状细胞(pDCs)和叉状头转录因子3(Foxp3+)调节性T细胞(Tregs)在结直肠癌(CRC)组织中的表达及其在肿瘤引流淋巴结(TDLN)中的浸润,阐明其对CRC生物学行为的影响。方法:收集63例CRC手术切除病理标本、癌旁正常组织及相应TDLN,采用免疫组织化学方法检测不同组织中CD123+pDCs和Foxp3+Tregs的阳性细胞数,采用Spearman秩相关分析法检测二者表达相关性。结果:CRC患者癌组织中Foxp3+Tregs阳性细胞数高于癌旁正常组织(P<0.01);淋巴结转移阳性患者癌组织中Foxp3+Tregs阳性细胞数高于癌旁正常组织(P<0.01);转移肿瘤引流淋巴结(mTDLN)组织中Foxp3+Tregs阳性细胞数高于非转移肿瘤引流淋巴结(mfTDLN)(P<0.01);TNM分期Ⅲ+Ⅳ期患者癌组织中Foxp3+Tregs阳性细胞数高于TNM分期Ⅰ+Ⅱ期患者(P<0.01)。CRC患者癌组织中CD123+pDCs阳性细胞数较低,但CD123阳性表达率明显高于癌旁正常组织(P<0.01);mTDLN与mfTDLN组织中CD123+pDCs阳性细胞数比较差异无统计学意义(P>0.05);mTDLN组织中pDCs与髓样树突状细胞(mDCs)的比值(pDCs/mDCs)明显高于mfTDLN组织(P<0.01);pDCs/mDCs比值与Foxp3+Tregs阳性细胞数呈正相关关系(r=0.421,P<0.01)。结论:CRC的发生发展与癌组织局部微环境中CD123+pDCs阳性细胞数无关,与Foxp3+Tregs浸润数量有关。肿瘤组织中DCs亚群的变化与Foxp3+Tregs相关,其表达促进了CRC的发生发展。
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五倍子穿心莲内酯提取液治疗牙周牙髓联合病变的临床疗效评价
赵竹兰, 仲杨, 黄玉, 许立硕, 刘晨光, 张莉, 马宁
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  839-843.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200428
摘要 ( 7 )   [HTML]( ) PDF(2243KB) ( 8 )  
目的:研究中药五倍子穿心莲内酯提取液联合超声荡洗和牙周内窥镜治疗牙周牙髓联合病变的临床疗效,为牙周牙髓联合病变的有效治疗提供理论依据。方法:108例牙周牙髓联合病变患者按就诊顺序分为对照组、过氧化氢(H2O2)组和实验组,每组36例,3组患牙均进行根管预备,术中分别使用蒸馏水、3% H2O2和五倍子穿心莲内酯提取液进行根管冲洗;根管预备完成后,使用超声荡洗并采用不同冲洗剂进行化学交替冲洗,封药,待炎症消除后封闭根管,且X线检查显示根管充填为恰填;3组患者均进行龈上洁治,在牙周内窥镜辅助下,进行龈下刮治,并分别使用不同的冲洗剂进行牙周袋内冲洗。各组患者均以3个月为1个疗程。观察各组患者治疗前后牙周指数,包括改良龈沟出血指数(mSBI)、改良菌斑指数(mPLI)、探诊深度(PD)和附着丧失(AL),检测治疗1个疗程后各组患者龈沟液(GCF)中白细胞介素1β(IL-1β)水平。结果:治疗前各组患者的牙周指数和GCF中IL-1β水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,与对照组比较,H2O2组患者PD、AL和GCF中IL-1β水平明显降低(P<0.05),实验组患者mSBI、mPLI、PD、AL和GCF中IL-1β水平明显降低(P<0.05);与H2O2组比较,实验组患者mSBI、mPLI、PD、AL和GCF中IL-1β水平明显降低(P<0.05)。结论:中药五倍子穿心莲内酯提取液联合超声荡洗和牙周内窥镜治疗牙周牙髓联合病变效果良好,可改善患者牙周指数并降低患者GCF中IL-1β水平。
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miR-216a-5p和WASL在子宫内膜癌组织中的表达及其调控子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制
秦巧红, 张楠, 赵书君, 李红雨
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  844-850.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200429
摘要 ( 1 )   [HTML]( ) PDF(2031KB) ( 10 )  
目的:探讨微小RNA-216a-5p(miR-216a-5p)靶向湿疹血小板减少伴免疫缺陷综合征样蛋白(WASL)对子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,阐明miR-216a-5p与WASL基因的靶向关系及其作用机制。方法:收集行手术切除的47例子宫内膜癌患者癌组织和癌旁组织;将miR-216a-5p模拟物(miR-216a-5p)、模拟物阴性对照(miR-con)、沉默对照(si-con)、沉默WASL的小干扰RNA(si-WASL)、抑制物阴性对照(anti-miR-con)、miR-216a-5p抑制物(anti-miR-216a-5p)、miR-216a-5p及空载质粒(pcDNA)和miR-216a-5p及WASL过表达质粒(pcDNA-WASL)分别转染子宫内膜癌HEC-1-B细胞作为miR-216a-5p组、miR-con组、si-con组、si-WASL组、anti-miR-con组、anti-miR-216a-5p组、miR-216a-5p+pcDNA组和miR-216a-5p+pcDNA-WASL组。采用逆转录实时荧光定量PCR(Real-time RT-qPCR)和Western blotting法分别检测子宫内膜癌组织、癌旁组织和各组HEC-1-B细胞中miR-216a-5p和WASL mRNA及蛋白表达水平。采用MTT法检测各组细胞增殖活性,Transwell法检测各组迁移和侵袭细胞数。采用双荧光素酶报告基因法检测各组细胞双荧光素酶活性,以此确定WASL是否为miR-216a-5p的靶基因。结果:与癌旁组织比较,子宫内膜癌组织中miR-216a-5p表达水平明显降低(P<0.05),WASL mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01),两者呈负相关关系(r=-0.317,P<0.01)。与miR-con组和si-con组比较,miR-216a-5p组和si-WASL组细胞中WASL蛋白表达水平(P<0.01)和细胞增殖活性均明显降低(P<0.05),迁移和侵袭细胞数明显降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因和Western blotting检测,WASL为miR-216a-5p的靶基因。与miR-216a-5p+pcDNA组比较,miR-216a-5p+pcDNA-WASL组细胞增殖活性、迁移细胞和侵袭细胞数均明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:miR-216a-5p在子宫内膜癌组织中呈低表达,其可能通过靶基因WASL抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,可能是子宫内膜癌治疗的潜在靶点。
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早期干预对食物过敏婴儿其他过敏性疾病发生的预防作用
陈昂, 王桂兰, 刘翔腾, 张泉山
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  851-857.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200430
摘要 ( 3 )   [HTML]( ) PDF(1184KB) ( 5 )  
目的:探讨早期干预对食物过敏婴儿其他过敏性疾病发生的预防作用,为探讨阻断食物过敏婴儿其他过敏疾病发生的措施提供参考。方法:采用前瞻性研究设计,以2017年1—10月广东省中山市博爱医院出生的新生儿5 712名作为研究对象,至2018年10月随访期间共确诊食物过敏患儿274例,根据是否进行规范干预以及规范干预同时是否添加益生菌分为规范干预组(n=134)、规范干预同时添加益生菌组(n=69)和不规范或无干预组(n=71),同时选取同期正常体检无食物过敏婴儿187名作为对照组。6和12个月后观察研究对象过敏性疾病的发生情况,并检测各组研究对象外周血嗜酸性粒细胞(EOS)百分率和转化生长因子β1(TGF-β1)水平。结果:4组研究对象年龄、性别和家庭环境比较差异无统计学意义(P>0.05)。随访6和12个月后,4组研究对象湿疹、喘息或持续咳嗽和哮喘发生率比较差异有统计学意义(P<0.01),其中不规范或无干预组患儿上述过敏性疾病发生率明显高于对照组(P<0.016 7)。随访6个月后,4组研究对象过敏性鼻炎发生率比较差异无统计学意义(P>0.05),而在随访12个月后不规范或无干预组患儿过敏性鼻炎发生率明显高于对照组(P<0.0167)。随访12个月后,4组研究对象外周血EOS百分率和TGF-β1水平比较差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,其余各组患儿外周血EOS百分率和TGF-β1水平明显升高(P<0.05);与不规范或无干预组比较,规范干预组和规范干预同时添加益生菌组患儿外周血EOS百分率和TGF-β1水平明显降低(P<0.05)。结论:对婴儿食物过敏进行早期干预可以减少其他过敏性疾病的发生,采取添加益生菌等在内的综合防治措施可阻断食物过敏婴儿其他过敏性疾病的发展进程。
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临床医学
小肠及回盲部滤泡树突状细胞肉瘤1例报告及文献复习
周东奎, 鲁明骞, 冯雪松, 刘宇飞, 宋浩, 徐亮
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  858-862.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200431
摘要 ( 11 )   [HTML]( ) PDF(2270KB) ( 6 )  
目的:分析小肠及回盲部滤泡树突状细胞肉瘤(FDCS)患者的临床表现和诊断,提高临床医师对该病的认识。方法:收集1例小肠和回盲部FDCS患者的临床资料,并结合相关文献,分析小肠及回盲部FDCS的临床特点、诊断和治疗方法。结果:患者,女性,61岁,因下腹隐痛9 d、发现盆腔肿物5 d入院。子宫及附件彩超,盆腔偏右侧低回声包块,考虑恶性肿瘤可能性大。腹部增强CT检查,右下腹部-盆腔新生物伴周围种植转移,淋巴结增大。子宫及附件增强MRI,右侧下腹部-盆腔肿块、回盲区结节,考虑恶性肿瘤。患者行手术治疗切除肿物,术后病理诊断为小肠及回盲部FDCS。患者术后未接受放、化疗,好转出院。结论:FDCS是一种临床上少见的恶性肿瘤,无特异的影像学表现,手术切除是首选的治疗方式,病理检查和免疫组织化学检测是诊断本病的金标准。FDCS患者术后应定期随访。
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鼻内镜下改良泪前隐窝入路术式治疗泪囊原发性恶性黑色素瘤1例报告及文献复习
裴颖, 邹莹, 巴秀敏, 李旭
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  863-866.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200432
摘要 ( 7 )   [HTML]( ) PDF(1844KB) ( 14 )  
目的:分析鼻内镜下改良泪前隐窝入路术式治疗泪囊原发性恶性黑色素瘤患者的临床效果,以提高临床医生对该病及术式的认识。方法:收集1例原发性恶性黑色素瘤患者的临床资料、影像学表现和病理资料,分析改良泪前隐窝入路术式治疗该病的优点,结合相关文献总结其临床诊断标准和治疗方法。结果:患者,女性,53岁,右眼流泪2年,内眦处肿物6个月,门诊以"泪囊肿物"收入院。患者右眼内眦部触及肿物,大小约1.7 cm×1.2 cm×1.0 cm,质韧,边界不清,压痛,与周围皮肤紧密黏连,挤压泪囊区,少许血性分泌物自泪点溢出。冲洗泪道,原泪点返流。眼眶CT检查显示右侧泪囊内高密度影、右侧泪囊区及鼻泪管内高密度影且右侧泪囊明显增大。初诊为右侧泪囊及鼻泪管占位性病变。采用鼻内镜下改良泪前隐窝入路术式完整切除肿瘤,术后病理显示为恶性黑色素瘤累及周围肌肉组织。结论:鼻内镜下改良泪前隐窝入路术式治疗泪囊原发性恶性黑色素瘤具有术野暴露好、微创、易于操作和低风险等优势。
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影像学
新型冠状病毒肺炎患者胸部MSCT影像表现与预后的关联性分析
郭飞, 朱林, 许红, 谢宗玉, 张莉, 邓雪飞
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  867-874.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200433
摘要 ( 12 )   [HTML]( ) PDF(2613KB) ( 8 )  
目的:探讨不同预后的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者多层螺旋计算机体层摄影术(MSCT)的影像表现,分析COVID-19患者预后的影响因素。方法:回顾性分析2020年1月22日—3月8日蚌埠医学院第一附属医院收治的79例COVID-19确诊患者的临床资料和胸部MSCT容积扫描资料,根据患者出院或死亡时MSCT影像有无广泛纤维化表现,分为预后不良组和预后较好组,比较不同预后患者入院时MSCT表现、一般资料和临床及实验室指标的差异。结果:79例患者中,治愈74例,死亡5例,病死率6.3%。患者出院或死亡时MSCT影像表现分为消散或磨玻璃影(27例,34.2%)、混合影(41例,51.9%)和广泛纤维化(11例,13.9%)。单因素分析,与预后较好组比较,预后不良组患者累及肺段数明显增加(P<0.05),体温明显升高(P<0.05),病灶弥漫分布患者比例、重型患者所占比例和白细胞升高患者所占比例明显升高(P<0.05)。其中累及肺段数的临界值为9.5个时,其评估患者预后不良的灵敏度和特异度分别为72.7%和80.9%;体温的临界值为39.1℃时,其评估患者预后不良的灵敏度和特异度分别为54.5%和92.6%。Logistic回归分析,累及肺段数和体温是COVID-19患者预后不良的独立危险因素。结论:COVID-19患者入院时MSCT影像中的病灶累及肺段数和体温与患者预后有密切关联,累及肺段数达9个、体温39.1℃以上提示COVID-19患者容易出现肺广泛纤维化,预后不良。
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3.0TMRIPDFF和IP-OP对脂肪肝定量评估的价值
杨逸铭, 刘玉品, 周懂晶, 陈志远, 萧焕明, 池晓玲
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  875-880.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200434
摘要 ( 9 )   [HTML]( ) PDF(1649KB) ( 9 )  
目的:探讨3.0T磁共振成像(MRI)质子密度脂肪分数(PDFF)和同反相位(IP-OP)定量评估肝脏脂肪含量的应用价值,为脂肪肝无创性定量分析提供参考依据。方法:本组研究对象包括轻度脂肪肝患者34例、中重度脂肪肝患者29例和非脂肪肝患者(对照组)20例,均经肝穿刺活检确诊。采用MRI-PDFF和MRI-IP-OP技术检测各组患者肝脏脂肪分数(HFF),采用Kruskal-Wallis检验进行多组间比较,采用Mann-Whitney检验进行组间两两比较,同时进行Bonferroni校正。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析2种技术定量评估脂肪肝的诊断效能。结果:各组患者MRI-PDFF和MRI-IP-OP的HFF比较差异有统计学意义(P<0.01)。中重度脂肪肝组患者MRI-PDFF的HFF较对照组和轻度脂肪肝组明显升高(P<0.01),轻度脂肪肝组患者MRI-PDFF的HFF较对照组明显升高(P<0.01)。中重度脂肪肝组患者MRI-IP-OP的HFF较对照组和轻度脂肪肝组患者明显升高(P<0.01),轻度脂肪肝组患者MRI-IP-OP的HFF较对照组明显升高(P<0.05)。ROC曲线显示,诊断轻度脂肪肝(对照组vs轻度脂肪肝组+中重度脂肪肝组),MRI-PDFF和MRI-IP-OP的HFF曲线下面积(AUC)分别为0.931和0.874;诊断中重度脂肪肝(对照组+轻度脂肪肝组vs中重度脂肪肝组),MRI-PDFF和MRI-IP-OP的HFFAUC分别为0.928和0.913。结论:对于轻度脂肪肝和中重度脂肪肝,MRI-PDFF具有更高的诊断效能,是一种精确而可靠的无创性肝脏脂肪变性定量分析方法。
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综述
中药调控3T3-L1脂肪细胞增殖、分化和糖脂代谢的研究进展
高海云, 徐闯, 崔一喆, 王秋菊
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  881-887.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200435
摘要 ( 6 )   [HTML]( ) PDF(2073KB) ( 13 )  
脂肪细胞的增殖、分化与肥胖和胰岛素抵抗等代谢性疾病有密切的关系,而传统中药在治疗各种疾病方面积累了丰富的实践经验。近年来许多研究以证明传统中药可通过调控脂肪细胞数量以及大小来改善某些代谢性疾病。脂肪细胞的形成是成纤维细胞样前脂肪细胞向成熟脂肪细胞转变的过程,脂肪的生成即是脂质的积累,需要依次激活众多转录因子。3T3-L1前脂肪细胞系是建立成熟脂肪细胞模型最为常用的细胞系之一,转变为成熟的脂肪细胞需要经历有丝分裂克隆扩增(MCE)阶段、终末分化阶段和分化为成熟脂肪细胞阶段。脂质代谢紊乱是引起肥胖和胰岛素抵抗等疾病的原因,许多中药通过抑制前脂肪细胞的增殖和分化,减少脂质的积累,改善或预防肥胖。胰岛素抵抗是2型糖尿病的早期症状、核心特征和主要发病机制之一。中药通过调控糖脂代谢,促进胰岛素信号转导,提高胰岛素敏感性,从而改善胰岛素抵抗。现总结近年来各种中药单体、单方或复方对3T3-L1细胞分化和代谢影响的研究,以及中药治疗肥胖和胰岛素抵抗等代谢性疾病机制的研究进展,旨在为传统中药治疗此类疾病提供参考。
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女性盆腔恶性肿瘤患者术中及术后淋巴囊肿预防和治疗的研究进展
许沙沙, 王玲, 靖丽娟, 张炜旸, 王博蔚
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  888-893.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200436
摘要 ( 18 )   [HTML]( ) PDF(1482KB) ( 17 )  
淋巴囊肿是女性盆腔恶性肿瘤术后最常见的并发症之一。选择术中局部应用生物制剂(如纤维蛋白封闭剂、明胶凝血酶基质和氨基丙烯酸正丁酯)、前哨淋巴结活检术、腹膜开放法、网膜成形术、术后应用奥曲肽及术后使用中药大黄、芒硝外敷联合内服等多种方法可降低术后淋巴囊肿的发生率;超声引导下穿刺引流术、中药大黄、芒硝外敷和超声介导下注入硬化剂(乙醇、聚桂醇和博来霉素等)是目前治疗淋巴囊肿的常用方法。此外,饮食调整和手术治疗也是治疗淋巴囊肿行之有效的方法。现总结近年来女性盆腔恶性肿瘤患者术中和术后预防及治疗盆腔淋巴囊肿的多种方法,对比分析其有效性及优缺点,从而总结出降低淋巴囊肿发生率及提高淋巴囊肿治愈率的有效方法,为临床促进淋巴漏口的愈合及预防淋巴囊肿的发生提供参考。
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GRIM-19与泌尿男生殖系肿瘤发生发展关系的研究进展
秦家轩, 邢金春
吉林大学学报(医学版). 2020 (04):  894-898.  DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200437
摘要 ( 12 )   [HTML]( ) PDF(1481KB) ( 10 )  
维甲酸和干扰素诱导的死亡相关基因19(GRIM-19)是线粒体膜呼吸链烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶复合物(Ⅰ)的亚基,参与细胞能量代谢,并能够通过负调控信号转导及转录活化因子3(STAT3)发挥抑癌作用。GRIM-19作为抑癌基因,其表达水平在前列腺癌(PCa)组织中明显降低,与存活素(Survivin)、STAT3及特定microRNA相互作用共同调控PCa细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭;在肾癌(RCC)组织中GRIM-19表达水平明显降低,与RCC的病理分级有关联,影响STAT3转录活性及表达水平,发挥抑制细胞增殖、迁移、侵袭和促进细胞凋亡的作用;在多数中国人膀胱癌(BC)组织中GRIM-19表达水平明显降低且与STAT3表达呈负相关关系,并可能与BC的病理分级、临床分期、转移情况和顺铂类化疗药物抵抗有关联。GRIM-19还可能与肾盂癌、肾血管平滑肌脂肪瘤和肾母细胞瘤等有关联。GRIM-19在多数泌尿男生殖系肿瘤组织中低表达,参与肿瘤的发生发展,但目前尚无相关综述,故本文作者针对GRIM-19在泌尿男生殖系肿瘤中的研究进展作一综述。
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