大鼠睾丸AQP8和绿色荧光蛋白融合蛋白表达载体构建

doi:国家自然科学基金资助课题课题（30370572）

大鼠睾丸AQP8和绿色荧光蛋白融合蛋白表达载体构建

梁爽¹，于振香²，赵丹¹，杨柯¹，赵雪俭^1*, 杨宝学³

1. 吉林大学基础医学院生殖病理生理研究室，吉林长春130021；2. 吉林大学第一医院呼吸内科, 吉林长春130021; 3. 美国加利福尼亚大学医学院，美国旧金山 CA94122

收稿日期:2004-10-21 修回日期:1900-01-01 出版日期:2006-03-28 发布日期:2006-03-28
通讯作者: 赵雪俭^1*

Reconstruction of aquaporin 8 and green fluorescentprotein fusion recombinant vector

LIANG Shuang¹,YU Zhen-xiang², ZHAO Dan¹, YANG Ke¹, ZHAO Xue-jian^1*, YANG Bao-xue³

1. Department of Reproductive Pathophysiology， School of Medical Sciences， Jilin University, Changchun 130021，China；2. Department of Respiratory Medicine，First Hospital, Jilin University, Changchun 130021，China；3. College of Medical Sciences, University of California, San Francisco CA94122, USA

Received:2004-10-21 Revised:1900-01-01 Online:2006-03-28 Published:2006-03-28
Contact: ZHAO Xue-jian^1*

摘要/Abstract

摘要： 目的：克隆Wistar大鼠睾丸水通道蛋白(AQP8)cDNA，构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与大鼠AQP8的融合蛋白真核细胞表达载体。方法：用RT-PCR钓取AQP8 cDNA编码区全长序列，测序鉴定,将AQP8 cDNA亚克隆于pEGFP-C1基因的下游。结果：①AQP8 cDNA测序结果与登录在GenBank上的大鼠AQP8基因序列（GenBank登录号：NM_019158）高度同源，但PCR产物的序列分析结果中发现4个碱基序列与已发表的AQP8序列不同：NM_019158的第135~137位碱基分别是C、A和G，而测序结果缺乏这3个碱基，NM_019158的第311位为A，而测序结果为G；②酶切鉴定在表达载体pEGFP-C1中AQP8 cDNA融合于EGFP基因的下游。结论：pEGFP-C1-AQP8融合蛋白的表达载体构建成功。

关键词: 融合蛋白, 绿色荧光蛋白, 睾丸, 大鼠

Abstract: Objective To clone aquaporin 8 (AQP8) cDNA of testis in Wistar rats and construct the eucaryotic expression vector of enhance green fluorescent protein (EGFP) and AQP8 fusion protein.Methods The full sequence of AQP8 was fished by RT-PCR and sequenced, then it was recombined in the downstream of the pEGFP-C1 gene. Results The sequence of AQP8 cDNA of Wistar rat was homology with NM_019158（access number logged in GenBank），but there were 4 different bases：P135-137 of NM_019158 partly were C，A and G，but the sequencing result was absence；P311 of NM_019158 was A，but the sequencing result was G. The recombinant pEGFP-C1-AQP8 was identified by enzyme digestion. Conclusion The recombinant pEGFP-C1-AQP8 is constructed successfully.

Key words: fusion protein, green fluorescent protein, testes, rats

中图分类号:

梁爽，于振香，赵丹，杨柯，赵雪俭, 杨宝学. 大鼠睾丸AQP8和绿色荧光蛋白融合蛋白表达载体构建[J]. J4, 2006, 32(2): 218-220.

LIANG Shuang,YU Zhen-xiang, ZHAO Dan, YANG Ke, ZHAO Xue-jian, YANG Bao-xue. Reconstruction of aquaporin 8 and green fluorescentprotein fusion recombinant vector[J]. J4, 2006, 32(2): 218-220.

[1]	毛勇, 刘浩, 吴向阳, 高秉仁. 极低频电磁场暴露对SD大鼠肝、肾和脾脏功能及形态的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(06): 1120-1123.
[2]	朱旭蓉, 燕玉娥, 狄政莉, 王天仲, 何芳, 王新来, 高晓宇, 郑雪娇. miRNA-155在大鼠脑缺血/再灌注损伤早期大脑皮层组织中的表达及其意义[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(06): 1144-1149.
[3]	赵燕, 张新, 张剑, 田石琦, 常英霞. 杞菊地黄丸对青光眼模型大鼠视网膜结构的保护作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 994-998.
[4]	李军, 姚静, 王国芳, 辛勤, 崔立坤, 齐汝霞. IL-33对阿尔茨海默病模型大鼠脑组织内β-淀粉样蛋白的清除作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 908-913.
[5]	范东艳, 王苹, 任海龙, 周余来, 石艳. 西藏高原环境对移居大鼠子代主要脏器发育和形态的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 914-918.
[6]	于雷, 唐庚, 方芳, 李鑫, 龚守良, 王志成, 王剑锋. 低剂量辐射诱导小鼠睾丸细胞中IRE1α和XBP1 mRNA及其蛋白的表达[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 919-923.
[7]	阎慧, 娄石磊, 苗永迪, 岂蕊, 郭子硕, 邱悦, 孙聪. 大鼠结肠原代成纤维细胞的分离、培养和鉴定[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 849-852.
[8]	张书剑, 张有辰, 李慧文, 金正勇. 高氧对新生大鼠脑组织中NRP-cGMP信号通路的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(03): 477-482.
[9]	孙敏英, 周红月, 接晶, 谢飞, 翟瑞萍, 陈潭秀, 袁红艳, 台桂香. 胸腺肽α1诱导MUC1特异性Th2型免疫应答[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(02): 299-304.
[10]	王玮瑶, 陈玲, 岳学玲, 金清华. 慢性束缚应激对老龄大鼠空间学习和记忆能力及海马齿状回区兴奋性氨基酸水平的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(01): 8-12.
[11]	杨洁, 马英慧, 崔秀成, 王红梅, 董微丽, 谭小波. MMP-2在糖尿病模型大鼠视网膜组织中的表达[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(05): 923-927.
[12]	律东, 梁春梅, 李明颖, 殷静雯, 罗旭东, 林举达, 马国达. miR-137过表达慢病毒的包装和鉴定[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(04): 694-697.
[13]	赵春芳, 李美娟, 于维维, 谢湘林, 冯琳琳, 刘宏雁. 黄紫堇总生物碱对β-淀粉样蛋白致老年性痴呆大鼠的保护作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(03): 532-537.
[14]	陈晓娜, 王晓丹, 孙丽光, 方芳, 崔巍巍, 杨永广, 刘娅. 携带hTERT-P2A-EGFP基因真核表达质粒的构建和鉴定[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(02): 213-219.
[15]	宫睿, 谢湘林, 杜冰, 武毅, 刘宏雁. 桦褐孔菌对血管性痴呆模型大鼠的保护作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(01): 57-61.