吉林大学学报(医学版) 2014, 40(03) 504-507 DOI: 0.13481/j.1671-587x.20140308    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R
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基础研究
UCA1a(CUDR) 基因真核表达载体的构建及其在膀胱癌UM-UC-2 细胞中的表达
王宇1，陈葳2，李旭2，张红1，张晓芹1，史迎莉1
（1. 陕西中医学院医学科研实验中心，陕西 咸阳 712046；2. 西安交通大学医学院第一附属医院转化医学中心，陕西 西安710061）
摘要：

目的：构建 UCA1a(CUDR) 基因真核表达载体 pcDNA-UCA1a(CUDR)，观察其在膀胱癌 UM-UC-2 细胞中的表达，为研究 UCA1a(CUDR) 基因与膀胱癌的关系提供实验依据。方法：以膀胱癌 BLZ-211 细胞的 5′-RACE-Ready cDNA 为模板，采用 PCR 法克隆 UCA1a(CUDR) 全基因，经EcoRⅠ和 BamHⅠ双酶切后与真核表达载体 pcDNA3.1(＋) 连接，构建 pcDNA-UCA1a(CUDR) 重组质粒。双酶切及测序鉴定后，稳定转染至体外培养的人膀胱癌 UM-UC-2 细胞系，利用 RT-PCR法检测转染 pcDNA-UCA1a(CUDR) 的 UM-UC-2 细胞和转染空质粒 pcDNA3.1(＋) 的 UM-UC-2 细胞中 UCA1a(CUDR) 基因的表达。结果：克隆的目的基因片段约为 2 200 bp，与预期结果相符，表明成功扩增 UCA1a(CUDR) 基因；经双酶切及测序鉴定，成功构建真核表达载体pcDNA-UCA1a(CUDR)。半定量 RT-PCR 法检测，与转染空质粒的细胞比较，转染表达载体 pcDNA-UCA1a(CUDR) 的UM-UC-2 细胞中 UCA1a(CUDR) 基因表达量升高。结论：成功构建pcDNA-UCA1a(CUDR)真核表达载体，且UCA1a(CUDR) 基因在转染表达载体的 UM-UC-2 细胞中高表达。
关键词：   UCA1a(CUDR)基因 真核表达载体 转染 UM-UC-2 细胞系
收稿日期  2013-08-30   修回日期    网络版发布日期  2014-05-28  
DOI: 0.13481/j.1671-587x.20140308
基金项目:

国家自然科学基金资助课题（81372151）；陕西省教育厅科学研究计划(自然科学专项)项目资助课题 (2013JK0765)
通讯作者: 李 旭
作者简介: 王 宇（1982-），男，陕西省宝鸡市人，讲师，医学博士，主要从事肿瘤分子遗传学研究。 
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