吉林大学学报(医学版) 2014, 40(03) 539-542 DOI: 10.13481/j.1671-587x.20140315    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R
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基础研究
超滤技术去除重组MUC1-MBP融合蛋白中内毒素的效果评价
王娟，谢飞，陈潭琇，孙霞霞，李琼书，台桂香
吉林大学基础医学院免疫学教研室，吉林 长春 130021
摘要：

目的：评价超滤技术去除纯化后重组MUC1-MBP融合蛋白（MUC1-MBP）溶液中内毒素的效果，阐明超滤技术对去除内毒素的作用。方法：选取表达MUC1-MBP大肠杆菌基因工程菌，分别通过CM Sepharose FF离子交换层析(CM)(CM组)、CM联合Phenyl Sepharose 6 FF疏水层析（C6）(CM+C6组)、CM加超滤(CM+超滤组)以及CM联合C6加超滤(CM+C6组+超滤)进行纯化，并去除内毒素；采用SDS-PAGE 分析蛋白纯度；鲎试剂显色基质法检测内毒素表达水平。结果：SDS-PAGE分析，在预期相对分子质量62 000处呈现单一条带，Quantity One 分析纯度>96%；CM组与CM+C6组内毒素表达水平均较高，但2组比较差异无统计学意义（P>0.05）；与CM组比较，CM+超滤组内毒素表达水平明显降低（P<0.01）；与CM+C6组比较，CM+C6超滤组内毒素表达水平明显降低（P<0.01）；CM+超滤组与CM+C6＋超滤组内毒素表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：CM或CM联合C6均不能有效去除内毒素，其中C6对去除内毒素几乎无作用；CM加超滤可有效去除内毒素，超滤技术在去除内毒素中发挥重要作用。
关键词： MUC1-MBP融合蛋白 离子交换层析 疏水层析 超滤技术 内毒素 显色基质法鲎试剂
收稿日期  2013-08-23   修回日期    网络版发布日期  2014-06-05  
DOI: 10.13481/j.1671-587x.20140315
基金项目:

科技部“十二五”重大新药创制专项资助课题（2011ZX09102001-36）
通讯作者: 台桂香（Tel:0431-85619471，E-mail:taiguixiang@163.com）
作者简介: 王 娟（1988-），女，山东省临沂市人，在读医学硕士，主要从事肿瘤免疫学研究。
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