吉林大学学报(医学版) 2018, 44(04) 845-848 DOI: 10.13481/j.1671-587x.20180429    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R
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	方法学
	人羊膜成纤维细胞的分离和鉴定
	张啸环1, 段明华1, 闫玉礼1, 潘新2, 李海清2, 周长龙2, 赵天倚1
	1. 长春中医药大学药学院中药炮制教研室, 吉林 长春 130107; 2. 空军航空大学, 吉林 长春 130022
	摘要：目的：建立人羊膜成纤维细胞的体外培养方法，通过细胞的形态特征和免疫组织化学进行鉴定，从而获得人羊膜成纤维细胞，为后续的干细胞研究奠定基础。方法：从足月分娩人胎盘剥离羊膜，胰蛋白酶和胶原酶消化后分离人羊膜成纤维细胞，采用含表皮生长因子（EGF）的DMEM培养基进行培养。显微镜下观察细胞形态表现，采用HE染色和免疫组织化学染色分析细胞特征，采用流式细胞术（FCM）分析人羊膜成纤维细胞的纯度。结果：采用胰蛋白酶和胶原酶先后消化获得人羊膜成纤维细胞，显微镜下观察，细胞呈放射状或旋涡状生长。免疫组织化学染色，人羊膜成纤维细胞明显表达成纤维细胞标志物波形蛋白（Vimentin），不同程度地表达S100钙结合蛋白A4（S100A4），不表达上皮细胞标志物角蛋白19（CK19）。流式细胞术分析，人羊膜成纤维细胞的纯度为86.1%。结论：成功建立了人羊膜成纤维细胞分离和鉴定方法，获得的细胞具有成纤维细胞的特异标志和表型特征。
	关键词： 流式细胞术 人羊膜成纤维细胞 HE染色 免疫组织化学
	收稿日期  2017-12-09   修回日期    网络版发布日期  2018-07-27
	DOI: 10.13481/j.1671-587x.20180429
	基金项目: 吉林省中医药管理局科研基金资助课题（2014-wt07）
	通讯作者: 赵天倚,讲师(Tel:0431-86172201,E-mail:619787310@qq.com)
	作者简介: 张啸环(1969-),女,吉林省长春市人,副教授,药学硕士,主要从事中药炮制和中药制剂方面的研究。
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