吉林大学学报(医学版) 2019, 45(04) 759-765 DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190403    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R

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基础研究
LncRNA-BLACAT1调节CyclinD1/CDKN2B轴对非小细胞肺癌细胞增殖的影响及其机制
霍小蕾1, 裴振2, 杨浩3, 张毅强4, 贾建桃5, 韩玲娜2
1. 长治医学院组织胚胎学教研室, 山西 长治 046000;
2. 长治医学院生理学教研室, 山西 长治 046000;
3. 长治医学院附属和平医院肿瘤科, 山西 长治 046000;
4. 长治医学院生物化学教研室, 山西 长治 046000;
5. 长治医学院病理生理学教研室, 山西 长治 046000
摘要目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织和癌细胞中长链非编码RNA(LncRNAs)BLACAT1的表达特征及其调控机制,阐明BLACAT1在NSCLC发生发展中的作用和临床意义。方法:高通量基因表达数据库(GEO数据库)分析BLACAT1在NSCLC组织的表达特征,Kmplot网站分析BLACAT1表达与NSCLC患者生存预后的联系。qRT-PCR法检测BLACAT1在25例NSCLC患者癌组织和癌旁组织及NSCLC细胞系中的表达情况。将si-NC(阴性对照)和si-BLACAT1(抑制物)转染入NSCLC A549细胞作为si-NC组和si-BLACAT1组,qRT-PCR法分别检测各组A549细胞中BLACAT1 mRNA表达水平,流式细胞术检测各组细胞不同细胞周期细胞百分率,细胞集落生成实验检测各组细胞克隆形成能力,CCK8实验检测各组细胞增殖活性,qRT-PCR和Western blotting法检测各组A549细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B(CDKN2B)mRNA和蛋白表达水平。结果:GEO数据库的NSCLC数据集GSE18842和GSE19804、qRT-PCR法检测以及Kmplot分析,与癌旁组织比较,NSCLC患者癌组织中BLACAT1表达水平明显升高(P< 0.01);NSCLC患者癌组织中BLACAT1低表达患者的存活时间明显高于BLACAT1高表达患者(P=0.011)。与si-NC组比较,si-BLACAT1组A549细胞中BLACAT1 mRNA表达水平明显降低(P< 0.05);与si-NC组比较,si-BLACAT1组A549细胞周期G1期细胞百分率增加(P< 0.05),S期细胞百分率降低(P< 0.05),细胞克隆形成能力和细胞增殖活性均降低(P< 0.05或P<0.01);与si-NC组比较,si-BLACAT1组A549细胞中CyclinD1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P< 0.05),而CDKN2B mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P< 0.05或P<0.01)。结论:LncRNA-BLACAT1在NSCLC患者癌组织和癌细胞中表达升高,下调BLACAT1表达可通过调节CyclinD1/CDKN2B轴从而抑制NSCLC A549细胞增殖,BLACAT1可作为NSCLC患者的潜在治疗靶点。
关键词: 癌,非小细胞肺 长链非编码RNA 细胞增殖 预后
收稿日期  2018-10-26   修回日期    网络版发布日期  2019-08-02  
DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190403
基金项目: 国家自然科学基金资助课题(81600951);长治医学院科研启动基金资助课题(普及QDZ201601)
通讯作者: 韩玲娜,副教授(Tel:0355-3012487,E-mail:hanlingna124@163.com)
作者简介: 霍小蕾(1981-),女,山西省阳泉市人,副教授,医学硕士,主要从事组织胚胎学及肿瘤学相关方面的研究。

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