吉林大学学报(医学版) 2019, 45(06) 1346-1352 DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190626    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R
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	基础研究
	miR-302b-3p对食管癌EC-109细胞增殖和凋亡的影响及其机制
	刘翼1, 祝琳2, 康敏1
	1. 西南医科大学附属医院消化内科, 四川 泸州 646000; 2. 西南医科大学附属医院耳鼻咽喉头颈外科, 四川 泸州 646000
	摘要：目的：探讨miR-302b-3p对食管癌EC-109细胞增殖和凋亡的影响，阐明miR-302b-3p抑制食管癌细胞增殖和诱导细胞凋亡的相关机制。方法：选取体外培养的食管癌EC-109细胞和正常食管上皮HET-1A细胞，采用实时荧光定量PCR法检测EC-109细胞和HET-1A细胞中miR-302b-3p表达水平。对EC-109细胞进行瞬时转染，分为空白对照组（未转染）、miR-NC组（转染miR-302b-3p mimics阴性对照）、miR-302b-3p组（转染miR-302b-3p mimics）、anti-miR-NC组（转染miR-302b-3p inhibitor阴性对照）和anti-miR-302b-3p组（转染miR-302b-3p inhibitor）。MTT法检测各组EC-109细胞活性，流式细胞术检测各组不同周期EC-109细胞百分比和细胞凋亡率，Western blotting法检测各组EC-109细胞中CyclinD1、CDK2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平，双荧光素酶报告基因实验和Western blotting法检测各组EC-109细胞的荧光素酶活性和细胞中上皮细胞转化序列2（ECT2）蛋白的表达水平。结果：与HET-1A细胞比较，EC-109细胞中miR-302b-3p表达水平明显降低（P<0.05）。与空白对照组比较，miR-302b-3p组EC-109细胞活性、S期细胞百分比和EC-109细胞中CyclinD1及CDK2蛋白表达水平明显降低（P<0.05），而G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率和细胞中Bax及Cleaved caspase-3蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）；与anti-miR-NC组比较，anti-miR-302b-3p组细胞活性、S期细胞百分比和细胞中CyclinD1及CDK2蛋白表达水平均明显升高（P<0.05），而G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率和细胞中Bax及Cleaved caspase-3蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。与miR-NC+ECT2-WT组比较，miR-302b-3p+ECT2-WT组EC-109细胞的荧光素酶活性降低（P<0.05）；与anti-miR-NC+ECT2-WT组比较，anti-miR-302b-3p+ECT2-WT组EC-109细胞的荧光素酶活性明显升高（P<0.05）。结论：miR-302b-3p可抑制EC-109细胞增殖并诱导凋亡，其作用机制可能与靶向调控ECT2蛋白表达有关。
	关键词： miR-302b-3p 食管肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 上皮细胞转化序列2基因
	收稿日期  2018-11-23   修回日期    网络版发布日期  2019-12-05
	DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190626
	基金项目: 四川省卫计委科研项目资助课题（17PJ049）
	通讯作者:
	作者简介: 刘翼(1978-),男,四川省泸州市人,副教授,医学硕士,主要从事消化道肿瘤基础和临床方面的研究。
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