吉林大学学报(医学版) 2021, 47(2) 275-283 DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210204    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R

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基础研究
利拉鲁肽对高糖诱导足细胞损伤后相关蛋白mRNA和蛋白表达的影响及其机制
祁冰雪1,马彦1,张艺献2,孙亚东1(),苗里宁2
1.吉林省人民医院内分泌科,吉林 长春 130021
2.吉林大学第二医院肾内科,吉林 长春 130041
摘要目的

观察胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂利拉鲁肽对高糖诱导足细胞损伤后相关蛋白mRNA及蛋白表达的影响,并探讨其作用机制。

方法

将分化成熟的足细胞随机分为对照组、高糖组、甘露醇对照组、利拉鲁肽组和高糖+利拉鲁肽组。提取各组细胞RNA,应用Real-time PCR(RT-PCR)法检测各组足细胞中Nephrin、Podocin和ZO-1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中Nephrin、Podocin、ZO-1、Bcl-2和caspase-3蛋白表达水平,免疫荧光法观察足细胞中骨架蛋白Synaptopodin表达情况,流式细胞术检测细胞凋亡率。将分化成熟的足细胞随机分为对照组、高糖组、高糖+利拉鲁肽组、高糖+利拉鲁肽+LY294002组。采用Western blotting法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路转导蛋白、Bcl-2和caspase-3表达水平。

结果

与对照组比较,高糖组足细胞中标志蛋白Nephrin、Podocin和ZO-1 mRNA及蛋白表达水平降低(P <0.05),Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05),caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05),足细胞特异性骨架蛋白Synaptopodin荧光强度明显降低(P<0.05),足细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与高糖组比较,高糖+利拉鲁肽组足细胞中Nephrin、Podocin和ZO-1 mRNA及蛋白表达水平升高(P <0.05),Bcl-2蛋白表达水平升高(P <0.05),caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.05),足细胞特异性骨架蛋白Synaptopodin荧光强度明显升高(P<0.05),足细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。与对照组比较,高糖组足细胞中PI3K和pAkt蛋白表达水平明显降低(P <0.05),Bcl-2蛋白表达水平降低( P<0.05),caspase-3蛋白表达水平升高(P <0.05);与高糖组比较,高糖+利拉鲁肽组足细胞内PI3K和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平明显升高(P <0.05),凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达水平升高(P <0.05),caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.05),与高糖+利拉鲁肽组比较,高糖+利拉鲁肽+LY294002组足细胞中PI3K和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平降低(P <0.05),caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05)。

结论

利拉鲁肽通过激活PI3K/Akt信号通路抑制足细胞凋亡,减轻高糖诱导的足细胞损伤。

关键词: 糖尿病肾病 足细胞 细胞凋亡 胰高血糖素样肽1 利拉鲁肽 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B
收稿日期  2020-09-08   修回日期    网络版发布日期  2021-03-25  
DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210204
基金项目: 吉林省卫计委科研项目(2016Q006);吉林省科技厅科技发展计划项目(20180520106JH)
通讯作者: 孙亚东
作者简介: 祁冰雪(1985-),女,吉林省长春市人,副主任医师,医学博士,主要从事糖尿病肾病诊治方面的研究。

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