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期刊信息

吉林大学学报(医学版)
双月刊
ISSN 1671-587X
CN 22-1342/R
主 任:李欣欣
编 辑:姜瑾秋 韩宏志 官 鑫
陈思含 李昕蔚
电 话:0431-85619279
E-mail:xuebao@jlu.edu.cn
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2021年, 第47卷, 第3期 刊出日期:2021-05-28
上一期   
基础研究
红景天苷对哮喘模型小鼠气道炎症的抑制作用及其机制
栾雪, 延光海, 李海波, 张波, 张巍, 黄园园
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  537-544.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210301
摘要 ( 591 )   [HTML]( ) PDF(1380KB) ( 261 )  
目的

探讨红景天苷(SAL)对小鼠急性哮喘气道炎症的干预作用,并阐明其作用机制。

方法

将50只清洁级 BALB/c 雌性小鼠随机分为对照组、卵清蛋白(OVA)组、低剂量SAL组、高剂量SAL组和地塞米松组,每组10只。于实验第1、7和14天,腹腔注射混合液200 μL(由生理盐水、10 mg OVA和1 mg氢氧化铝组成)建立小鼠哮喘模型,第21天时,将致敏小鼠置于实验玻璃箱内,以0.1 g OVA+10 mL生理盐水雾化形式激发30 min,每日1次,共7 d。低和高剂量SAL组小鼠在每次激发免疫前1 h分别腹腔注射30和60 mg·kg-1 SAL治疗液,地塞米松组小鼠腹腔注射2 mg·kg-1地塞米松治疗液,而对照组小鼠以同剂量生理盐水代替。检测各组小鼠增强呼吸间歇(Penh)值并评估小鼠气道反应性,HE染色法观察各组小鼠肺组织形态表现,直接计数法计算各组小鼠肺泡灌洗液(BALF)中中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞数,ELISA法检测各组小鼠BALF中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素13(IL-13)、白细胞介素17A(IL-17A)、白细胞介素18(IL-18)和白细胞介素33(IL-33)水平,Western blotting法测定各组小鼠肺组织中NOD样受体家族蛋白3(NLPR3)、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、Caspase-1、白细胞介素1β前体(pro-IL-1β)和IL-1β蛋白表达水平。

结果

与对照组比较,OVA组小鼠Penh值明显升高(P<0.05);与OVA组比较,高剂量SAL组小鼠Penh值升高(P<0.05)。与对照组比较,OVA组小鼠气道平滑肌增厚并可见大量炎性细胞浸润;与OVA组比较,高剂量SAL组小鼠气道周围炎性细胞数减少(P<0.05)。与对照组比较,OVA组小鼠BALF中中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞数增加(P<0.05),IL-1β、IL-4、IL-13、IL-17A、IL-18和IL-33表达水平明显升高(P<0.05);与OVA组比较,高剂量SAL组小鼠BALF中中性粒细胞、嗜酸性粒细胞以和淋巴细胞数减少(P<0.05),IL-1β、IL-4、IL-13、IL-17A、IL-18和IL-33水平降低(P<0.05)。与对照组比较,OVA组小鼠肺组织中NLPR3、ASC、Caspase-1、pro-IL-1β和IL-1β蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与OVA组比较,高剂量SAL组小鼠肺组织中NLPR3、ASC、Caspase-1、pro-IL-1β和IL-1β蛋白表达水平降低(P<0.05)。

结论

SAL可以减轻急性哮喘小鼠气道炎症,其机制可能与下调NLRP3炎性小体的表达有关。

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标
三焦针法通过激活SDF-1α/CXCR4通路对快速老化模型小鼠学习和记忆能力的改善作用
王煜, 赵岚, 阚伯红, 史慧妍
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  545-550.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210302
摘要 ( 462 )   [HTML]( ) PDF(733KB) ( 129 )  
目的

探讨三焦针法对快速老化模型(SAMP8)小鼠神经功能和基质细胞衍生因子1α/趋化因子受体4(SDF-1α/CXCR4)通路的改善作用,探讨三焦针法在SAMP8小鼠中的作用机制。

方法

实验分为模型组(SAMP8小鼠)、非穴位针刺组(SAMP8小鼠+非穴位针刺)、穴位针刺组(SAMP8小鼠+穴位针刺)、穴位针刺+AMD3100组(SAMP8小鼠+穴位针刺+AMD3100处理)和对照组(SAMR1小鼠),每组10只小鼠。Morris水迷宫实验检测各组小鼠学习和记忆功能指标,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组小鼠海马组织中β淀粉样蛋白(Aβ)1-42水平,胆碱乙酰基转移酶(chAT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)试剂盒检测各组小鼠海马组织中chAT和AchE活性,Western blotting法检测各组小鼠海马组织中SDF-1α和CXCR4蛋白表达水平。

结果

与对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.05),海马组织中Aβ1-42水平升高(P<0.05),穿越平台次数、原象限游泳距离与总距离比值、原象限游泳时间与总时间比值和海马组织中chAT及AchE活性、SDF-1α及CXCR4蛋白表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,穴位针刺组小鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),海马组织中Aβ1-42水平降低(P<0.05),穿越平台次数、原象限游泳距离与总距离比值、原象限游泳时间与总时间比值和海马组织中chAT活性、SDF-1α及CXCR4蛋白表达水平升高(P<0.05);与穴位针刺组比较,穴位针刺+AMD3100组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.05),海马组织中Aβ1-42水平升高(P<0.05),穿越平台次数、原象限游泳距离与总距离比值、原象限游泳时间与总时间比值和海马组织中chAT活性、SDF-1α及CXCR4蛋白表达水平降低(P<0.05)。

结论

三焦针法可能通过激活SDF-1α/CXCR4通路减少Aβ1-42的积累,改善SAMP8小鼠的神经功能。

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标
肿瘤坏死因子受体相关因子6泛素化位点突变载体的构建及其功能位泛素化位点的鉴定
王琴, 林春霖, 程志彬, 何若凡, 林鹏航, 陈辉, 叶建新, 朱广伟
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  551-558.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210303
摘要 ( 640 )   [HTML]( ) PDF(1495KB) ( 280 )  
目的

预测人肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)基因上的泛素化位点,并构建泛素化位点突变质粒,探讨突变质粒对人结直肠癌HCT116和SW480细胞中核因子κB(NF-κB)和激活蛋白1(AP-1)相对荧光素酶活性的影响。

方法

采用UbPred、UbiSite和BDM-PUB软件预测TRAF6基因的泛素化位点,采用CE Design V1.04 软件设计突变引物,采用突变试剂盒进行定点突变,采用PCR法扩增获得突变后的目的片段,扩增产物经Dpnl酶消化,去除甲基化模板质粒,消化产物在Exnase Ⅱ催化作用下发生同源重组获得重组质粒;将重组质粒转化至DH5α大肠杆菌感受态细胞,对重组质粒进行DNA测序。采用双荧光素酶报告基因系统检测转染突变质粒后HCT116和SW480细胞中NF-κB和AP-1相对荧光素酶活性。

结果

经过DNA测序,泛素化突变位点已经成功突变,泛素化突变质粒构建成功。与TRAF6野生型基因比较,转染第124、319和331位突变质粒后,结直肠癌HCT116和SW480细胞中NF-κB和AP-1相对荧光素酶活性降低(P<0.05或P<0.01),其中转染第124位突变质粒后,结直肠癌HCT116和SW480细胞中NF-κB和AP-1相对荧光素酶活性降低最明显(P<0.01)。

结论

成功构建人TRAF6基因的泛素化突变质粒,TRAF6的第124位氨基酸是其最重要的泛素化位点,可能影响下游信号通路中NF-κB和AP-1的活性。

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标
PRDX6过表达对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其分子机制
母润红, 刘馨竹, 林睿, 李雨澎, 王璐瑶, 王春雨, 郭笑
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  559-565.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210304
摘要 ( 987 )   [HTML]( ) PDF(1196KB) ( 308 )  
目的

探讨过表达过氧化物氧化还原蛋白6(PRDX6)基因对肝细胞癌增殖、侵袭和迁移的影响,并阐明其可能的作用机制。

方法

人肝癌HepG2和Hep3B细胞分为过表达PRDX6组(转染过表达质粒PIRES-EGFP-PRDX6)和空载体组(转染对照质粒PIRES)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测2组肝癌细胞中PRDX6 mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测2组肝癌细胞增殖活性,划痕实验检测2组肝癌细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测2组肝癌细胞的侵袭细胞数。Western blotting法检测2组细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达水平。

结果

RT-qPCR和Western blotting法检测,过表达PRDX6组肝癌细胞中PRDX6 mRNA和蛋白表达水平明显高于空载体组(P<0.05)。MTT法检测,过表达PRDX6组肝癌细胞的增殖活性明显高于空载体组(P<0.05)。划痕实验和Tanswell小室实验检测,与空载体组比较,过表达PRDX6组肝癌细胞划痕愈合率和侵袭细胞数升高(P<0.05)。Western blotting检测,与空载体组比较,过表达PRDX6组肝癌细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平升高(P<0.05)。

结论

PRDX6过表达可增强肝癌HepG2和Hep3B细胞体外增殖、侵袭及迁移能力,其作用机制可能与PRDX6过表达调控MMP- 2和MMP-9蛋白表达水平有关。

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尿石素B对人神经胶质瘤U118 MG细胞生物学行为的影响及其机制
刘翠兰, 李建军, 姜贺, 刘晶, 王丹, 李晨, 赵娣
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  566-574.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210305
摘要 ( 561 )   [HTML]( ) PDF(1932KB) ( 175 )  
目的

观察尿石素B(UB)对人神经胶质瘤(GBM)的U118 MG细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,并探讨其作用机制。

方法

体外培养U118 MG细胞,将细胞分为对照组(0 μmol·L-1 UB)和不同浓度(20、40、80、120、160和200 μmol·L-1)UB组,培养24、48和72 h后,采用CCK-8法检测各组细胞增殖率。将U118 MG细胞分为对照组(0 μmol·L-1 UB)和不同浓度(40、80和120 μmol·L-1)UB组,采用细胞克隆形成实验检测各组U118 MG细胞克隆形成率,划痕愈合实验检测各组U118 MG细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测各组U118 MG细胞侵袭百分率,流式细胞术检测各组U118 MG细胞凋亡率和不同细胞周期U228 MG细胞百分率,Western blotting法检测各组U118 MG细胞中波形蛋白(Vimentin)、上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平。

结果

CCK-8法检测,作用24、48和72 h后,与对照组比较,不同浓度UB组U118 MG细胞增殖率明显降低(P<0.01),且呈浓度和时间依赖性。细胞克隆形成实验,与对照组比较,40、80和120 μmol·L-1 UB组U118 MG细胞克隆形成率降低(P<0.01),且呈浓度依赖性;划痕愈合实验,作用24和48 h后,与对照组比较,40、80和120 μmol·L-1 UB组U118 MG细胞划痕愈合率明显降低(P<0.05或P<0.01),且呈浓度依赖性;Transwell小室实验,与对照组比较,40、80和120 μmol·L-1 UB组侵袭U118 MG细胞百分率明显降低(P<0.05或P<0.01),且呈浓度依赖性;流式细胞术,与对照组比较,80和120 μmol·L-1 UB组U118 MG细胞凋亡率升高(P<0.05或P<0.01),且呈浓度依赖性,G2/M期细胞百分率升高(P<0.05或P<0.01);Western blotting法检测,与对照组比较,不同浓度UB组U118 MG细胞中Vimentin和Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01),E-cadherin和Bax蛋白表达水平升高(P<0.01)。

结论

UB能够抑制人GBM的U118 MG细胞增殖、迁移和侵袭,抑制U118 MG细胞中Bcl-2蛋白表达并上调Bax蛋白表达,诱导细胞凋亡,并引起细胞周期G2/M期阻滞。

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mTOR磷酸化水平对成骨MC3T3E1细胞增殖、自噬和分化的作用及其机制
李希宁, 翁伟, 沈哲源, 豆晓杰, 赵宇, 闵继康
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  575-586.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210306
摘要 ( 1349 )   [HTML]( ) PDF(3213KB) ( 261 )  
目的

通过雷帕霉素(RAPA)和MHY1485抑制和激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的磷酸化,探讨磷酸化mTOR(p-mTOR)水平变化对成骨细胞增殖、自噬和分化的作用及其机制。

方法

小鼠成骨MC3T3-E1细胞分为对照组、20 nmol·L-1 RAPA组、60 nmol·L-1RAPA组、160 nmol·L-1 RAPA 组和2.0 μmol·L-1 MHY1485组。流式细胞术检测各组不同细胞周期MC3T3-E1细胞百分率,Western blotting和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中mTOR及下游真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)和核糖体S6激酶1(S6K1)、B淋巴细胞瘤 2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和Caspase-3、碱性磷酸酶(ALP)、Runt 相关转录因子2(Runx2)和成骨相关转录因子Osterix的表达水平,茜素红染色观察各组成骨MC3T3-E1细胞矿化能力。

结果

与对照组比较,20和60 nmol·L-1 RAPA组细胞增殖活性升高(P<0.05或P<0.01),G1期细胞百分率降低(P<0.05或P<0.01),S期细胞百分率升高(P<0.05或P<0.01),细胞中p-mTOR及其下游通路磷酸化4E-BP1(p-4E-BP1)、磷酸化S6K1(p-S6K1)水平和p62、Bax、Cleaved-Caspase-3表达水平降低(P<0.05或P<0.01)、LC3-Ⅱ、Bcl-2、ALP和Runx2表达水平升高(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,160 nmol·L-1 RAPA组细胞增殖活性降低(P<0.01)、细胞中p-mTOR、p-4E-BP1和p-S6K1水平明显降低(P<0.05或P<0.01),2.0 μmol·L-1 MHY1485组细胞增殖活性明显降低(P<0.01),细胞中p-mTOR、p-4E-BP1和p-S6K1水平明显升高(P<0.01),160 nmol·L-1 RAPA和2 μmol·L-1 MHY1485组细胞中Bax和Cleaved-Caspase-3表达水平升高(P<0.05或P<0.01),Bcl-2、ALP、Runx2和Osterix表达水平降低(P<0.05或P<0.01);作用12 d后,20和60 nmol·L-1 RAPA组细胞中可见明显矿化结节,160 nmol·L-1 RAPA和2.0 μmol·L-1 MHY1485组成骨细胞中见极少数钙盐结晶。

结论

轻中度抑制mTOR的磷酸化可促进成骨细胞增殖、自噬和分化,而过度抑制和增强mTOR磷酸化则具有相反作用。

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miR-146b对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺组织中ICAM-1表达的调控作用
龙光文, 张谦, 杨秀林, 吉春玲, 董裕康
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  587-594.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210307
摘要 ( 442 )   [HTML]( ) PDF(1259KB) ( 146 )  
目的

探讨miR-146b对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺组织中细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响,阐明miR-146b治疗ARDS的分子机制。

方法

采用尾静脉注射油酸法建立ARDS大鼠模型,并将建模成功的大鼠分为模型组(只给予油酸)、agomir阴性对照组和miR-146b agomir组,每组15只,另选15只大鼠作为假手术组(只给予生理盐水,不建模)。术前1 h,miR-146b agomir组大鼠给予miR-146b agomir进行干预,agomir阴性对照组大鼠给予miR-146b agomir阴性对照试剂进行干预。造模成功24 h后,采用血气分析仪检测各组大鼠血氧分压(PaO2)和氧合指数(OI),检测各组大鼠肺组织湿/干重(W/D)比值,ELISA法检测各组大鼠肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,HE染色观察各组大鼠肺组织病理形态表现,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠肺组织中miR-146b和ICAM-1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组大鼠肺组织中ICAM-1蛋白表达水平,双荧光素酶报告系统检测miR-146b和ICAM-1的靶向关系。

结果

与模型组和agomir阴性对照组比较,miR-146b agomir组大鼠动脉血PaO2和OI及肺组织W/D比值升高(P<0.01),BALF中IL-1β、IL-6和TNF-α水平升高(P<0.01)。HE染色,假手术组大鼠肺组织结构正常,无明显炎症病理改变;模型组和agomir阴性对照组大鼠肺组织呈现肺泡腔出血、肺泡壁增厚和红细胞渗出等病理变化;miR-146b agomir组大鼠肺组织上述病理形态变化减轻。与模型组和agomir阴性对照组比较,miR-146b agomir组大鼠肺组织中ICAM-1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),而miR-146b表达水平明显升高(P<0.01)。双荧光素酶报告系统实验证实miR-146b靶向调控ICAM-1基因。

结论

miR-146b通过靶向抑制ICAM-1表达水平,降低ARDS大鼠肺组织炎症水平,缓解肺组织功能损伤,对ARDS肺组织起到保护作用。

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异钩藤碱上调miR-192-5p对TNF-α诱导的人支气管上皮细胞凋亡和炎症因子释放的作用及其机制
侯从岭, 芦晓帆, 雷小婷, 李彬, 赵润杨
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  595-607.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210308
摘要 ( 327 )   [HTML]( ) PDF(1946KB) ( 88 )  
目的

探讨异钩藤碱(IRN)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人支气管上皮细胞(16HBE)凋亡和炎症因子释放的影响,并阐明其可能的作用机制。

方法

采用不同浓度[(0(对照组)、2.5、5.0、10.0、20.0、30.0和40.0 μmol·L-1]IRN处理16HBE细胞24 h后,采用20 mg·L-1 TNF-α处理细胞18 h。将16HBE细胞分为对照组、TNF-α组(20 mg·L-1)、IRN组(20 μmol·L-1)、TNF-α+IRN组(20 mg·L-1 TNF-α和20 μmol·L-1 IRN)、TNF-α+IRN+miR-192-5p inhibitor组(20 mg·L-1 TNF-α、20 μmol·L-1 IRN和50 nmol·L-1 miR-192-5p inhibitor)以及TNF-α+IRN+pcDNA3.1 CXCR5组[20 mg·L-1 TNF-α、20 μmol·L-1 IRN和2 μmol·L-1 pcDNA3.1-C-X-C趋化因子受体5(CXCR5)]。采用CCK-8法检测各组16HBE细胞活性,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组16HBE细胞中miR-192-5p和CXCR5 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组16HBE细胞中白细胞介素1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白 1(MCP-1)、Bcl-2、Cleaved-Caspase3、CXCR5以及磷酸化的p38、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、c-Jun和核因子-κB(NF-κB)p65蛋白表达水平,ELISA法检测各组16HBE细胞上清液中IL-1β和MCP-1水平,流式细胞术检测各组16HBE细胞凋亡率,TargetScan7.1网站预测靶基因并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-192-5p与CXCR5之间的靶向结合关系。

结果

与对照组比较,不同浓度TNF-α组细胞活性明显降低(P<0.05);与对照组组比较,5.0、10.0、20.0和30.0 μmol·L-1 IRN组细胞活性升高(P<0.05)。与对照组比较,TNF-α组16HBE细胞中miR-192-5p和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),IL-1β、MCP-1、Cleaved-Caspase-3、p-p38、p-JNK、p-c-Jun和p-NF-κBp65蛋白表达水平,细胞凋亡率以及上清液中IL-1β和MCP-1水平明显升高(P<0.05);与TNF-α组比较,TNF-α+IRN组16HBE细胞中miR-192-5p和Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),IL-1β、MCP-1、Cleaved-Caspase-3、p-p38、p-JNK、p-c-Jun和p-NF-κBp65蛋白表达水平,细胞凋亡率以及上清液中IL-1β和MCP-1水平明显降低(P<0.05);与TNF-α+IRN+NC inhibitor组比较,TNF-α+IRN+miR-192-5p inhibitor组16HBE细胞中miR-192-5p和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),IL-1β、MCP-1、Cleaved-Caspase-3、p-p38、p-JNK、p-c-Jun和p-NF-κBp65蛋白表达水平,细胞凋亡率以及上清液中IL-1β和MCP-1水平明显升高(P<0.05)。与NC mimic和NC inhibitor组比较,miR-192-5p mimic组16HBE细胞中CXCR5 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),miR-192-5p inhibitor组16HBE细胞中CXCR5 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较,TNF-α组16HBE细胞中CXCR5蛋白表达水平明显升高(P<0.05),细胞活性明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05),上清液中IL-1β和MCP-1水平明显升高(P<0.05);与TNF-α组比较,TNF-α+IRN组16HBE细胞中CXCR5蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞活性明显升高(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.05),上清液中IL-1β和MCP-1水平明显降低(P<0.05);与TNF-α+IRN+ pcDNA3.1组比较,TNF-α+IRN+ pcDNA3.1 CXCR5组16HBE细胞中CXCR5蛋白表达水平明显升高(P<0.05),细胞活性明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05),上清液中IL-1β和MCP-1水平明显升高(P<0.05)。

结论

IRN能减轻TNF-α诱导的人支气管上皮细胞凋亡和炎症因子释放,其作用机制可能与miR-192-5p/MAPKs/ NF-κB信号通路有关。

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标
敲低着丝粒蛋白U对顺铂耐药卵巢癌细胞自我更新、顺铂耐药和Wnt/β-catenin信号活性的抑制作用
任英俊, 张慧, 周颖
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  608-614.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210309
摘要 ( 554 )   [HTML]( ) PDF(955KB) ( 80 )  
目的

探讨下调着丝粒蛋白U(CENPU)对卵巢癌(OC)细胞顺铂耐药的影响,并分析其作用机制。

方法

采用Western blotting法检测OC细胞(OVCAR3和SKOV3细胞)和顺铂耐药OC细胞(OVCAR3/DDP和SKOV3/DDP细胞)中CENPU蛋白表达水平。将OVCAR3/DDP和SKOV3/DDP细胞分为shControl组(转染shControl质粒)和CENPU短发夹RNA质粒(shCENPU)组(转染shCENPU质粒)。CCK-8法检测0 ~ 100 μmol·L-1顺铂刺激24 h后 2组细胞活性,流式细胞术检测20 μmol·L-1顺铂刺激24 h后2组细胞凋亡率,肿瘤球形成实验检测2组细胞的细胞球形成率(SFE),实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组细胞中自我更新相关基因性别决定区Y框蛋白2(Sox2)、Nanog和八聚体结合转录因子4(Oct4)mRNA表达水平,Western blotting法检测2组细胞中Wnt/β-catenin通路相关蛋白无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)、细胞周期素D1(cyclinD1)、c-Myc和β-连环素(β-catenin)蛋白表达水平。

结果

与OVCAR3和SKOV3细胞比较,OVCAR3/DDP和SKOV3/DDP细胞中CENPU蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。顺铂作用后,与shControl组比较,shCENPU组OVCAR3/DDP和SKOV3/DDP细胞活性明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与shControl组比较,shCENPU组OVCAR3/DDP和SKOV3/DDP细胞的SEF,细胞中Sox2、Nanog和Oct4 mRNA水平以及Wnt1、cyclin D1、c-Myc和β-catenin蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。

结论

敲低CENPU能抑制顺铂耐药OC细胞的自我更新、顺铂耐药和Wnt/β-catenin信号活性。

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桦木酸通过调控JAK2/STAT3信号通路对骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响及其机制
冯佳, 徐海婵, 温健, 吴泽华, 陈琦
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  615-622.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210310
摘要 ( 669 )   [HTML]( ) PDF(1166KB) ( 99 )  
目的

探讨桦木酸(BA)通过介导Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子(STAT3)信号通路对多发性骨髓瘤(MM)细胞增殖和凋亡的影响及其机制。

方法

骨髓瘤U266细胞给予不同浓度(0、20、40、60、80、100、120和160 μmol·L-1)BA作为不同浓度BA组,同时设置空白组(不加入BA且无细胞),以未经BA处理的U266细胞作为对照组。检测各组骨髓瘤U266细胞增殖率。将U266细胞分为对照组和20、40、60 μmol·L-1 BA组,CCK-8法检测各组细胞增殖率,Annexin Ⅴ-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中原癌基因(c-Myc)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和JAK2/STAT3信号通路蛋白表达水平。将裸鼠分为对照组(给予100 μL DMSO)和20、30和40 mg·kg-1 BA组(给予20、30及40 mg·kg-1 BA),观察各组裸鼠瘤体质量和体积。

结果

与对照组比较,作用48和72 h时,20、40和60 μmol·L-1 BA组细胞增殖率和细胞中c-Myc、cyclin D1、Bcl-2及JAK2/STAT3信号通路蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞凋亡率和细胞中Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。作用48和72 h时,与20 μmol·L-1 BA组比较,40和60 μmol·L-1 BA组细胞增殖率、细胞中c-Myc、cyclin D1、Bcl-2及JAK2/STAT3信号通路蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞凋亡率和细胞中Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与40 μmol·L-1 BA组比较,60 μmol·L-1BA组细胞增殖率、细胞中c-Myc、cyclin D1、Bcl-2及JAK2/STAT3信号通路蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞凋亡率和细胞中Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较,20、30和40 mg·kg-1 BA组裸鼠瘤质量及体积明显降低(P<0.05);与20 mg·kg-1 BA比较,30和40 mg·kg-1 BA组裸鼠瘤质量及体积明显降低(P<0.05),与30 mg·kg-1BA组比较,40 mg·kg-1 BA组裸鼠瘤质量及体积明显降低(P<0.05)。

结论

BA可促进骨髓瘤细胞凋亡、抑制骨髓瘤细胞增殖及裸鼠移植瘤生长,其作用机制可能与BA抑制JAK2/STAT3信号通路激活有关。

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黄芩苷联合二甲双胍对多囊卵巢综合征大鼠内分泌、炎症因子和胰岛素抵抗的影响及其机制
谢磊, 刘晓丽, 葛静, 李亚威
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  623-629.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210311
摘要 ( 523 )   [HTML]( ) PDF(899KB) ( 116 )  
目的

探讨黄芩苷(BAL)联合二甲双胍(DMBG)对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠内分泌指标和炎症因子表达、子宫内膜情况和胰岛素抵抗的影响及其机制。

方法

将32只大鼠随机分为对照组(给予生理盐水)、模型组[(给予脱氢表雄酮(DHEA)]、二甲双胍组(给予DMBG)和联合组(给予BAL+DMBG),每组8只。除正常组外,其他各组大鼠采用DHEA诱导建立PCOS大鼠模型。大鼠腹主动脉取血,采用ELISA法检测各组大鼠血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)、雌二醇(E2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素6(IL-6)及白细胞介素18(IL-18)水平,采用放射免疫法检测各组大鼠空腹胰岛素(FINS)和空腹血糖(FBG)水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),检测各组大鼠子宫内膜隙/间质面积比和子宫内膜厚度,Western blotting法检测各组大鼠卵巢组织中磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)和蛋白激酶B(AKT)蛋白表达量。

结果

与对照组比较,DHEA组大鼠血清FSH和E2水平降低(P<0.05),LH、T、TNF-α、CRP、IL-6和IL-18水平升高(P<0.05),血清中FBG、FINS水平和HOMA-IR明显升高(P<0.05),子宫内膜隙/间质面积比和子宫内膜厚度明显减少(P<0.05);与DHEA组比较,BAL+DMBG组和DMBG组大鼠血清FSH、E2、TNF-α、CRP、IL-6及 IL-18水平升高(P<0.05),血清LH、T、FBG和FINS水平及HOMA-IR降低(P<0.05),子宫内膜隙/间质面积比和子宫内膜厚度增加(P<0.05);与DMBG组比较,BAL+DMBG组大鼠血清FSH、E2、TNF-α、CRP、IL-6和 IL-18水平升高(P<0.05),血清LH、T、FBG和FINS水平及HOMA-IR降低(P<0.05),子宫内膜隙/间质面积比和子宫内膜厚度增加(P<0.05)。

结论

BAL联合DMBG可通过上调PCOS大鼠卵巢组织中PI3K/AKT信号通路蛋白表达水平,纠正内分泌紊乱,抑制慢性低度炎症反应,改善胰岛素抵抗及子宫内膜情况。

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miR-106b靶向调控TGF-β/Smad通路对结肠癌细胞侵袭和迁移的促进作用
马博, 李建刚, 王俊, 候军丽, 李亮
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  630-636.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210312
摘要 ( 541 )   [HTML]( ) PDF(1143KB) ( 300 )  
目的

探讨miR-106b靶向转化生长因子β受体1(TGF-βR1)对结肠癌细胞侵袭和迁移的影响,阐明miR-106b与TGF-βR1基因的靶向关系及其可能作用机制。

方法

选取30例结肠癌患者癌组织和癌旁正常结肠组织、结肠癌SW-480细胞及正常结肠上皮NCM460细胞为研究对象;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各种组织和细胞中miR-106b表达水平及细胞中TGF-βR1 mRNA表达水平。将结肠癌SW-480细胞分为空质粒组(转染miR-NC空质粒)、miR-106b组(转染miR-106b-mimics)、pGL3-TGF-βR1组(转染pGL3-TGF-βR1)和miR-106b-mimics+pGL3-TGF-βR1组(同时转染miR-106b-mimics和pGL3-TGF-βR1);生物信息分析法预测miR-106b与TGF-βR1的靶向作用关系,荧光素酶报告实验检测各组SW-480细胞中荧光素酶活性。Transwell小室实验检测各组SW-480细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测各组SW-480细胞划痕愈合率,Western blotting法检测各组SW-480细胞中TGF-βR1、磷酸化Smad同源物2(p-Smad2)和磷酸化Smad同源物3(p-Smad3)蛋白表达水平。

结果

结肠癌组织中miR-106b表达水平高于正常结肠组织,结肠癌SW-480细胞中miR-106b表达水平高于正常结肠上皮NCM460细胞(P<0.01)。双荧光素酶报告基因检测结果提示TGF-βR1为miR-106b的靶基因。与空质粒组比较,miR-106b组SW-480细胞中TGF-βR1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),侵袭细胞数和细胞划痕愈合率明显升高(P<0.01),细胞中p-Smad2和p-Smad3蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与miR-106b组比较,miR-106b-mimics+pGL3-TGF-βR1组SW-480细胞中TGF-βR1 mRNA和蛋白表达表达水平明显升高(P<0.01),侵袭细胞数和细胞划痕愈合率明显降低(P<0.01),细胞中p-Smad2和p-Smad3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。

结论

miR-106b过表达可能通过抑制TGF-β/Smad通路促进结肠癌细胞的侵袭和迁移。

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二甲双胍通过PI3K/AKT/GSK3β信号通路对肺癌A549细胞增殖的影响
穆春青, 周磊, 赵楠, 王红, 李智
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  637-643.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210313
摘要 ( 1154 )   [HTML]( ) PDF(1466KB) ( 125 )  
目的

探讨二甲双胍对非小细胞肺癌A549细胞增殖的影响,并阐明其可能的作用机制。

方法

将肺癌A549细胞分为对照组和不同浓度(1、2、4、8、16和32 mmol·L-1)二甲双胍组,MTT法检测作用24、48和72 h后各组A549细胞增殖率,克隆形成实验检测各组A549细胞克隆形成数,细胞划痕实验检测各组A549细胞迁移率,RT-PCR法检测各组A549细胞中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)和糖原合成激酶3β(GSK3β)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组A549细胞中PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、AKT、磷酸化AKT(p-AKT)、GSK3β和磷酸化GSK3β(p-GSK3β)蛋白表达水平。

结果

与对照组比较,作用24、48和72 h后,不同浓度二甲双胍组A549细胞增殖率降低(P<0.05);与对照组比较,2和8 mmol·L-1 二甲双胍组A549细胞克隆形成数降低(P<0.05);与对照组比较,2和8 mmol·L-1二甲双胍组A549细胞迁移率降低(P<0.05);与对照组比较,2和8 mmol·L-1二甲双胍组A549细胞中PI3K、AKT和GSK3β mRNA表达水平明显降低(P<0.05);与对照组比较,2和8 mmol·L-1二甲双胍组A549细胞中PI3K、p-PI3K、p-AKT和p-GSK3β蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。

结论

二甲双胍可抑制肺癌A549细胞增殖和迁移,其机制可能与抑制PI3K/AKT/GSK3β信号通路有关。

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山茱萸多糖对难治性癫痫幼鼠行为学和海马组织中多药耐药基因1b及主穹隆蛋白表达的影响
冶秀兰, 李明, 王兆建, 赵海燕, 马建宁, 刘婧, 郑怡, 李顺清, 张玉
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  644-651.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210314
摘要 ( 539 )   [HTML]( ) PDF(1067KB) ( 114 )  
目的

探讨山茱萸多糖对难治性癫痫(RE)幼鼠行为学和海马组织中多药耐药基因1b(MDR1b)及主穹隆蛋白(MVP)的影响,并阐明其作用机制。

方法

40只幼鼠建立RE模型,随机分为模型组(n=8)、低剂量山茱萸多糖组(n=9)、高剂量山茱萸多糖组(n=10)和阳性对照组(n=10),同时另设假手术组(n=10)。低和高剂量山茱萸多糖组幼鼠分别给予0.14和0.56 g·kg-1山茱萸多糖灌胃,阳性对照组幼鼠给予154 mg·kg-1拉莫三嗪灌胃,对照组和模型组幼鼠给予等量生理盐水灌胃。观察各组幼鼠癫痫行为学变化,HE染色观察各组幼鼠海马组织病理形态表现,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组幼鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法分别检测各组幼鼠海马组织中核因子κB(NF-κB)、MDR1b及MVP mRNA和蛋白表达水平。

结果

与假手术组比较,模型组幼鼠癫痫发作总次数增加(P<0.05),总持续时间延长(P<0.05),血清中TNF-α和IL-1β水平、海马组织中NF-κB、MDR1b和MVP mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,低和高剂量山茱萸多糖组及阳性对照组幼鼠癫痫发作总次数减少(P<0.05),总持续时间缩短(P<0.05),血清中TNF-α和IL-1β水平、海马组织中MDR1b、MVP mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。HE染色,假手术组幼鼠海马区细胞形态结构正常;模型组幼鼠海马区细胞排列紊乱,大量细胞呈空泡样变,可见大量核破裂和核固缩;低和高剂量山茱萸多糖组及阳性对照组幼鼠海马区细胞排列较为整齐,细胞轮廓较清晰,可见少量空泡变性、核破裂和核固缩。

结论

山茱萸多糖可改善RE幼鼠癫痫发作情况,其机制可能与抑制MDR1b和MVP mRNA和蛋白表达有关。

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MCM10沉默对乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用及其机制
巩培, 刘竟然, 赵世敏, 王玉珍, 谢基明
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  652-659.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210315
摘要 ( 473 )   [HTML]( ) PDF(1601KB) ( 111 )  
目的

探讨微小染色体维持蛋白10 (MCM10)基因沉默对乳腺癌细胞的增殖抑制作用,并阐明其作用机制。

方法

将人三阴性乳腺癌(TNBC)MDA-MB-231细胞分为对照组、MCM10干扰组1(shMCM10-1组)和MCM10干扰组2(shMCM10-2组)。构建MCM10慢病毒干扰载体MCM10-1和MCM10-2,分别感染shMCM10-1组和shMCM10-2组MDA-MB-231细胞,对照组MDA-MB-231细胞感染阴性对照病毒。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测各组MDA-MB-231细胞中MCM10 mRNA和蛋白表达水平,Cellomics计数法检测各组MDA-MB-231细胞的增殖率,流式细胞术检测各组MDA-MB-231细胞凋亡率,采用Caspase3/7活性检测试剂盒检测各组MDA-MB-231细胞中Caspase3/7活性。

结果

与对照组比较,shMCM10-1组和shMCM10-2组MDA-MB-231细胞中MCM10 mRNA表达率明显降低(P<0.01),未检测到MCM10蛋白表达;与对照组比较,shMCM10-1组和shMCM10-2组MDA-MB-231细胞相对增殖倍数明显降低(P<0.01),MDA-MB-231细胞凋亡率明显升高(P<0.01),MDA-MB-231细胞中Caspase3/7 活性明显升高(P<0.01)。

结论

MCM10基因沉默可以抑制MDA-MB-231细胞增殖,促进细胞凋亡,增加细胞中Caspase3/7 活性。

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标
骨髓间充质干细胞来源性外泌体携带miR-196b-5p对结肠癌细胞生物学特性的调控作用
李晓辉, 瞿紫微, 卢昕, 孟庆彬, 陈华涛, 任骏, 谭成沛
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  660-668.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210316
摘要 ( 610 )   [HTML]( ) PDF(2351KB) ( 226 )  
目的

探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)分泌的携带miR-196b-5p的外泌体对结肠癌细胞生物学特性的影响。

方法

分离培养小鼠骨髓MSCs,采用mimic-196b-5p模拟物(miR-196b-5p miR)和196b-5p抑制物(miR-196b-5p inhibitor)转染MSCs后,收集培养基,分离外泌体。透射电镜下观察外泌体形态表现,采用特定标志物表达鉴定外泌体后采用外泌体干预小鼠结肠癌CT26.WT细胞。将复苏后处于对数生长期的小鼠结肠癌CT26.WT细胞分为培养基组、mimic-NC组、inhibitor-NC组、未转染的外泌体组、mimic-外泌体组和inhibitor-外泌体组。采用MTT法检测各组结肠癌CT26.WT细胞增殖活性,流式细胞术检测各组不同细胞周期结肠癌CT26.WT细胞百分率和细胞凋亡率,Transwell小室实验检测各组结肠癌CT26.WT细胞的迁移和侵袭情况。

结果

与未转染的外泌体组比较,mimic-外泌体组结肠癌细胞增殖活性、迁移细胞数和侵袭细胞数均降低(P<0.05),G1期细胞百分率和细胞凋亡率升高(P<0.05),inhibitor-外泌体组结肠癌细胞增殖活性、迁移细胞数和侵袭细胞数均升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05)。

结论

MSCs来源携带高水平miR-196b-5p的外泌体可抑制结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡。

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标
基于高通量芯片对急性髓系白血病竞争内源性RNA网络的构建和分析
潘玉卿, 孙运艳, 李轶勋, 王丽英, 斯南卓玛, 陈睿, 张曦, 杜艳
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  669-676.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210317
摘要 ( 690 )   [HTML]( ) PDF(2078KB) ( 150 )  
目的

构建急性髓系白血病(AML)相关的竞争内源性RNA(ceRNA)网络,探讨AML发生发展的分子机制。

方法

采用NCBI的基因表达数据库(GEO)下载AML的表达矩阵(GSE96535),通过R语言的edgeR函数对差异表达的mRNA和长链非编码RNA(lncRNA)进行筛选。采用miRcode 、miRDB、miRTarBase和TargetScan数据库预测差异表达的lncRNA与miRNA以及差异表达的mRNA与miRNA之间的调控关系。采用Cytoscape软件构建lncRNA-miRNA-mRNA的 ceRNA调控网络,采用基因本体论(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)对差异基因进行富集分析,采用CytoHubba插件筛选核心基因,即Hub基因。采用GEPIA数据库比较AML患者和正常对照者中前10个Hub基因的表达,绘制Hub基因的生存曲线。

结果

与正常对照者比较,AML患者中有1 105个mRNA和387个lncRNA存在差异表达。构建的lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA调控网络由45个lncRNAs、31个miRNA和89个mRNA组成。GO分析,差异基因所调节的功能主要有膜微结构域调节、谷氨酸受体结合和上皮细胞增殖调节等。KEGG分析,19条通路被富集,其中包括转录调控、蛋白聚糖调控和Ras信号通路等。通过CytoHubba共筛选出GATA 结合蛋白 3(GATA3)、WT1转录因子(WT1)和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARG)等前10个连接度最高的Hub基因。采用GEPIA数据库验证GATA3、WT1、PPARG、MYB原癌基因(MYB)、性别决定相关的高迁移率基因群4(SOX4)和E2F7存在差异表达。E2F7低表达组患者生存率高于E2F7高表达组(P=0.028)。

结论

筛选出的lncRNA、miRNA和mRNA所构成的ceRNA网络可能促进了AML的发生发展。

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敲降miR-222-3p靶向PTEN对甲状腺癌131I放疗抵抗的影响及其机制
冯曜宇, 张承磊, 侯丽娟, 王益夫, 吴秀玲, 马云海
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  677-686.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210318
摘要 ( 624 )   [HTML]( ) PDF(2156KB) ( 127 )  
目的

探讨miR-222-3p通过人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白合同源基因(PTEN)对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响,阐明miR-222-3p在甲状腺癌131I放疗抵抗中的作用及机制。

方法

采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测人甲状腺癌细胞和人正常甲状腺滤泡上皮Nth-ori 3-1细胞中miR-222-3p表达水平。以人甲状腺癌K1细胞和放射抗性K1(K1R)细胞为研究对象,实验分为空白对照组、131I处理组、131I+miR-222-3p敲降组、131I+PTEN过表达组和131I+PTEN过表达+miR-222-3p过表达组。空白对照组K1和K1R细胞不经任何处理,131I处理组K1和K1R细胞经1和3 Gy 131I处理,131I+miR-222-3p敲降组K1和K1R细胞转染miR-222-3p inhibitor后再经1和3 Gy 131I处理,131I+PTEN过表达组K1和K1R细胞转染PTEN过表达载体后再经1 和3 Gy 131I处理,131I+PTEN过表达+miR-222-3p过表达组K1和K1R细胞同时转染PTEN过表达载体和miR-222-3p mimic后再经1和3 Gy 131I处理。克隆形成实验检测K1和K1R细胞克隆形成数,CCK-8实验检测K1和K1R细胞增殖活性,Annexin Ⅴ-FITC/PI双染法流式细胞术检测K1和K1R细胞凋亡率,Western blotting检测K1和K1R细胞中PTEN蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-222-3p与PTEN的靶向关系。

结果

与Nth-ori 3-1细胞比较,甲状腺癌细胞中miR-222-3p表达水平升高(P<0.01);且甲状腺癌K1R细胞中miR-222-3p表达水平高于甲状腺癌K1细胞(P<0.01)。与131I处理组比较,131I+miR-222-3p敲降组K1和K1R细胞克隆形成数减少(P<0.01),细胞增殖活性降低(P<0.01),细胞凋亡率升高(P<0.01)。与miR-NC-PTEN-WT组比较,miR-222-3p-PTEN-WT组HEK-293细胞中荧光素酶活性降低(P<0.01)。与敲降前比较,敲降miR-222-3p后K1和K1R细胞中PTEN蛋白表达水平升高(P<0.01)。与131I +PTEN过表达组比较,131I+PTEN+miR-222-3p过表达组K1和K1R细胞克隆形成数增加(P<0.01),细胞增殖活性升高(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01)。

结论

敲降miR-222-3p靶向PTEN并上调其表达水平可以缓解甲状腺癌131I的放疗抵抗。

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C19ORF12对胃癌MKN45细胞增殖和化疗药敏感性的影响及其机制
杨颖, 赵伟, 吕丹
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  687-693.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210319
摘要 ( 532 )   [HTML]( ) PDF(1000KB) ( 395 )  
目的

探讨19号染色体开放读码框12(C19ORF12)对胃癌MKN45细胞增殖和化疗药物敏感性的影响,并阐明其作用机制。

方法

将胃癌MKN45细胞分为对照组和C19ORF12组。CCK-8法检测2组胃癌MKN45细胞的增殖活性,克隆形成实验检测2组胃癌MKN45细胞克隆形成数,CCK-8法检测加入化疗药物阿霉素或过氧化氢(H2O2)后2各组胃癌MKN45细胞存活率,流式细胞术检测2组胃癌MKN45细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜技术检测C19ORF12在胃癌MKN45细胞中的亚细胞定位,GEPIA分析癌症基因组图谱(TCGA)中C19ORF12 mRNA在正常胃组织和胃癌组织中的表达差异,KM-plot回顾性分析不同表达水平C19ORF12对胃癌患者预后的影响。

结果

与对照组比较,C19ORF12组胃癌MKN45细胞增殖活性明显升高(P<0.05),克隆形成数升高(P<0.01)。阿霉素或H2O2作用后,与对照组比较,C19ORF12组胃癌MKN45细胞存活率升高(P<0.05或 P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01)。激光共聚焦显微镜下,C19ORF12主要定位于胃癌MKN45细胞的线粒体中。与正常胃组织比较,胃癌组织中C19ORF12 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。与低表达C19ORF12的胃癌患者比较,高表达C19ORF12的胃癌患者总体生存期明显缩短(P<0.01)。

结论

C19ORF12能够促进胃癌细胞的增殖,并且降低胃癌细胞对化疗药物的敏感性。C19ORF12可以作为肿瘤治疗的潜在靶标。

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临床研究
Carisolv化学机械法治疗乳牙龋病效果的Meta分析
赵媛, 刘大勇, 田咏, 白大兵
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  694-700.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210320
摘要 ( 376 )   [HTML]( ) PDF(1202KB) ( 128 )  
目的

探讨Carisolv化学机械法用于儿童乳牙龋病治疗的效果,为该疗法广泛应用于临床提供循证医学依据。

方法

计算机检索PubMed、中国知网(CNKI)、Medline、Wiley Online Library、万方和维普数据库,检索时限均为建库至2020年10月31日,筛选符合纳入标准的完全随机对照试验进行Meta分析。

结果

最终纳入11个完全随机对照试验,共645例患者,1 051颗患牙。采用Carisolv化学机械法患者的无痛率明显高于采用其他传统龋病治疗方法(OR=4.84,95%CI:3.44~6.81,Z=9.04,P<0.01),且治疗后并发症发生率较低(RR=0.37,95%CI:0.21~0.63,Z=3.60,P=0.000 3)。儿童患者选择再次治疗的方法时更倾向于Carisolv化学机械法,但偏好性比较差异无统计学意义(OR=16.99,95%CI:1.50~192.31,Z=2.29,P=0.02)。

结论

接受Carisolv化学机械法治疗的儿童患者疼痛和并发症均更少,该方法也更易被儿童接受,是一种非常适合用于儿童乳牙龋病治疗的技术。

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促性腺激素释放激素激动剂在体外受精-胚胎移植患者黄体支持中的应用
曲丹妮, 王鹏, 李媛
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  701-706.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210321
摘要 ( 534 )   [HTML]( ) PDF(653KB) ( 61 )  
目的

探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者应用多剂量间断给予促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)用于黄体支持对妊娠结局及患者子代安全的影响,指导IVF-ET患者科学应用GnRH-a。

方法

前瞻性纳入106例首次进行IVF-ET的患者,采用随机区组分配方法分为对照组(n=53)和多剂量GnRH-a组(n=53)。对照组和多剂量GnRH-a组患者均给予标准的黄体支持治疗,多剂量GnRH-a组则在标准的黄体支持治疗基础上于取卵后的第2、5和8天加用GnRH-a治疗。比较2组患者妊娠结局(妊娠率、临床妊娠率和活产率)和分娩结局(子代早产率、低出生质量儿率和出生缺陷率)。比较2组患者血清黄体酮水平。对患者子代进行随访,采用Bayley婴儿发展量表(Bayley Ⅲ)和儿童行为检查表(CBCL)对患者子代运动、认知、语言及行为发育情况进行评价,得出Bayley Ⅲ评分和CBCL评分。

结果

多剂量GnRH-a组患者妊娠率、临床妊娠率和活产率均明显高于对照组(P<0.05)。2组患者间子代早产率、低出生质量儿率和出生缺陷率比较差异无统计学意义(P>0.05)。胚胎移植第14天,多剂量GnRH-a组患者血清黄体酮水平明显高于对照组(P<0.05)。亚组分析,胚胎移植第14天,多剂量GnRH-a组患者中成功妊娠和非妊娠患者血清黄体酮水平分别高于对照组(P<0.05)。2组患者子代24个月时Bayley Ⅲ评分与CBCL评分比较差异均无统计学意义(P>0.05)。

结论

在标准黄体支持治疗的基础上多剂量间断给予GnRH-a可获得更好的妊娠结局,且长期安全性良好。

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简化版Wells评分、修订版Geneva评分和D-二聚体水平在恶性肿瘤并发肺血栓栓塞症诊断中的应用价值
王聪, 郭秀, 迟昊, 张捷, 许溟宇, 董春玲
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  707-713.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210322
摘要 ( 880 )   [HTML]( ) PDF(697KB) ( 355 )  
目的

探讨简化版Wells评分、修订版Geneva评分和D-二聚体(DD)水平在恶性肿瘤并发肺血栓栓塞症(PTE)诊断中的应用价值,为临床诊断PTE提供参考。

方法

回顾性分析疑似诊断为PTE并行CT肺动脉造影(CTPA)检查的142例恶性肿瘤患者的临床资料,依据CTPA结果将72例恶性肿瘤并发PTE患者作为PTE组,70例不并发PTE 患者为非PTE组,对2组患者形成PTE的相关风险因素进行统计分析,绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),采用Z检验比较上述评分的ROC曲线下面积(AUC),评价其在恶性肿瘤并发PTE诊断中的应用价值。

结果

病理类型为腺癌、肿瘤发生转移、并发深静脉血栓(DVT)和DD阳性是恶性肿瘤患者发生PTE的独立危险因素(P<0.05);简化版Wells评分、修订版Geneva评分和DD水平的灵敏度分别为87.5%、87.5%及97.2%,阴性预测值分别为74.3%、70.0%及83.3%,上述2种评分量表与DD水平联合评价的灵敏度均为100%,漏诊率较低,且其阴性预测值可达100%,排除价值较大;简化版Wells评分、修订版Geneva评分、DD水平、修订版Geneva评分联合DD水平和简化版Wells评分联合DD水平的AUC分别为0.762、0.687、0.649、0.741及0.786,简化版Wells评分联合DD水平的AUC最大,大于其他种类量表(P<0.05)。

结论

简化版Wells评分联合DD水平对恶性肿瘤并发PTE患者诊断更具有参考价值。

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miR-30a-5p靶向调控TRIM31表达对结直肠癌细胞5-氟尿嘧啶耐药的逆转作用及其机制
卢瑞云,谷敬锋,张建,张新,徐菲
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  714-723.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210323
摘要 ( 637 )   [HTML]( ) PDF(1540KB) ( 63 )  
目的

探讨miR-30a-5p靶向三结构域蛋白31(TRIM31)基因对结直肠癌(CRC)细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的影响,并阐明其作用机制。

方法

收集27例5-FU化疗敏感(5-FU/S组)CRC患者和23例5-FU化疗耐药(5-FU/R组)CRC癌患者的CRC组织,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测癌组织中miR-30a-5p和TRIM31 mRNA表达水平,Pearson相关分析法分析miR-30a-5p和TRIM31 mRNA表达的相关性。体外培养人CRC 5-FU耐药细胞HT-29/5-FU细胞及其亲本HT-29细胞,MTT法检测2种细胞增殖活性并计算半数抑制浓度(IC50)和耐药指数(RI),RT-qPCR法检测2种细胞中miR-30a-5p和TRIM31 mRNA表达水平,Western blotting法检测2种细胞中TRIM31蛋白表达水平。将HT-29/5-FU细胞分为空白对照组、mimics NC组(转染miR-30a-5p阴性对照mimics NC)、miR-30a-5p mimics组(转染miR-30a-5p mimics)、miR-30a-5p mimics+vector组(转染miR-30a-5p mimics和阴性对照空载体)和miR-30a-5p mimics+TRIM31组(转染miR-30a-5p mimics和TRIM31过表达载体)。RT-qPCR法检测各组HT-29/5-FU细胞中miR-30a-5p和RTIM31 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组HT-29/5-FU细胞中TRIM31蛋白表达水平,MTT法检测各组HT-29/5-FU细胞增殖活性,流式细胞术检测各组HT-29/5-FU细胞凋亡率,双荧光素酶报告基因系统验证miR-30a-5p与TRIM31的靶向关系。

结果

与5-FU/S组比较,5-FU/R组患者CRC组织中miR-30a-5p表达水平降低(P<0.01),TRIM31 mRNA表达水平升高(P<0.01),miR-30a-5p和TRIM31 mRNA表达水平呈负相关关系(R2=0.885,P<0.01)。与HT-29细胞比较,HT-29/5-FU细胞中miR-30a-5p表达水平降低(P<0.01),TRIM31 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01)。HT-29/5-FU细胞和HT-29细胞的IC50值分别为(104.41±0.22)和(9.82±0.31)mg·L-1,RI值为12.42。与空白对照组和mimics NC组比较,miR-30a-5p mimics组HT-29/5-FU细胞中miR-30a-5p表达水平升高(P<0.01),TRIM31蛋白表达水平降低(P<0.01),HT-29/5-FU细胞增殖活性明显降低(P<0.01),HT-29/5-FU细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。与miR-30a-5p mimics组比较,miR-30a-5p mimics+TRIM31组HT-29/5-FU细胞中TRIM31蛋白表达水平升高(P<0.01),HT-29/5-FU细胞增殖活性明显升高(P<0.01),HT-29/5-FU细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。双荧光素酶报告基因系统证实TRIM31是miR-30a-5p的靶基因。

结论

miR-30a-5p通过靶向TRIM31基因表达增强CRC耐药细胞对5-FU的敏感性。

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接受不同化疗方案乳腺癌患者血清B族维生素水平检测及其临床意义
王青,解思琦,郑凯,唐一吟,李红万,张恒瑀,谭明建,彭蕾,刘德权,唐诗聪
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  724-730.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210324
摘要 ( 781 )   [HTML]( ) PDF(627KB) ( 134 )  
目的

检测接受不同化疗方案乳腺癌患者血清B族维生素水平,阐明接受不同化疗方案乳腺癌患者血清B族维生素水平差异及其临床意义。

方法

回顾性分析乳腺癌化疗患者(病例组,n=62)和健康体检者(对照组,n=48)的临床资料。根据乳腺癌患者血清维生素B12(VitB12)、维生素B9(VitB9)和维生素B6(VitB6)水平,将其分为6个亚组,分别为VitB12<0.025 μg·L -1组与VitB12≥0.025 μg·L-1组、VitB9<3.93 μg·L-1组与VitB9≥3.93 μg·L-1组、VitB6<1.955 μg·L-1组与VitB6≥1.955 μg·L -1组,统计不同亚组乳腺癌患者的基线特征和化疗方案。病例组患者根据化疗方案分为AC-T组21例、EC-T组22例、TC组11例和其他化疗方案组8例。于第1个化疗周期时在输注完全部化疗药物后的第2天清晨,取患者空腹血清,采用液相色谱-串联质谱仪检测2组研究对象血清B族维生素水平,并比较和分析接受不同化疗方案的乳腺癌患者血清B族维生素水平及不同血清B族维生素水平乳腺癌患者的化疗方案。

结果

对照组研究对象血清VitB9水平高于病例组(t=-3.343,P<0.05)。病例组患者血清VitB12和VitB6水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。血清VitB12<0.025 μg·L-1组和VitB12≥0.025 μg·L-1组乳腺癌患者间是否绝经比较差异有统计学意义(χ2=7.127,P=0.008),年龄、体质量指数(BMI)、TNM分期、肿瘤大小、有无淋巴结转移、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(Her-2)、Ki-67和病理分型比较差异均无统计学意义(P>0.05);VitB6<1.955 μg·L-1组和VitB6≥1.955 μg·L-1组乳腺癌患者间淋巴结有无转移比较差异有统计学意义(χ2=6.057,P=0.014), 年龄、BMI、是否绝经、TNM分期、肿瘤大小、ER、PR、Her-2、Ki-67和病理分型比较差异无统计学意义(P>0.05)。VitB9<3.93 μg·L-1组和VitB9≥3.93 μg·L-1组乳腺癌患者间年龄、是否绝经、BMI、TNM分期、肿瘤大小、有无淋巴结转移、ER、PR、Her-2、Ki-67和病理分型比较差异无统计学意义(P>0.05)。在纳入的62例乳腺癌患者中,有11例行TC方案治疗,21例行AC-T方案治疗,22例行EC-T方案治疗,8例行其他化疗方案,接受不同化疗方案的乳腺癌患者血清VitB12、VitB9和VitB6水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。

结论

采用不同化疗方案的乳腺癌患者血清B族维生素水平无明显差异,但乳腺癌化疗患者血清VitB9水平与正常人比较有明显差异。

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基于miniPDX动物模型筛选化疗方案治疗卵巢癌的临床效果评价
苏丹, 刘屹, 崔慢慢, 杨年, 黄宇, 何文静
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  731-739.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210325
摘要 ( 761 )   [HTML]( ) PDF(2112KB) ( 137 )  
目的

建立迷你人源性肿瘤移植(miniPDX)动物模型,筛选敏感上皮性卵巢癌(EOC)患者化疗方案并评价效果,为实现EOC个体化药物治疗提供依据。

方法

选取首次诊断为EOC并进行肿瘤细胞减灭术的患者22例作为药敏组,22例患者均同意进行miniPDX试验并签署相关同意书;另选取同期治疗并基本情况匹配的41例EOC患者作为对照组。药敏组采用患者肿瘤组织制成细胞悬液装入胶囊,并植入裸鼠皮下建立miniPDX模型。采用不同化疗药物治疗裸鼠后取出胶囊,CellTiter- Glo荧光细胞活力测定法测定胶囊中肿瘤细胞增殖率,选用细胞增殖率最低的方案对患者进行化疗。对照组采用紫杉醇+卡铂或紫杉醇+顺铂化疗方案。评价2组患者的疗效和不良反应发生率。将2组患者肿瘤组织病理切片进行CK7、WT-1、p16、p53、Ki-67和配对盒基因8抗原(PAX-8)免疫组织化学染色,分析其阳性结果与患者对含铂化疗敏感性之间的关系。

结果

药敏组22例患者中,14例完全缓解(CR),4例部分缓解(PR),总缓解率(ORR)为81.8%(18/22);对照组41例患者中,13例CR,14例PR, ORR为65.9%(27/41),药敏组患者ORR高于对照组(P<0.05)。2组患者的年龄、病理类型和分期等临床特征比较差异无统计学意义(P>0.05)。药敏组和对照组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(P> 0.05)。免疫组织化学检测,p16、p53、Ki-67和PAX-8阳性铂敏感患者百分率高于p16、p53、Ki-67和PAX-8阴性铂敏感患者(P<0.05),CK7和WT-1阳性铂敏感患者百分率与CK7和WT-1阴性者铂敏感患者比较差异无统计学意义(P>0.05)。

结论

根据miniPDX动物模型筛选EOC化疗方案可提高EOC患者治疗效果;p16、p53、Ki-67和PAX-8阳性表达可预测EOC患者的铂敏感。

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临床医学
平面对接式边缘全瓷修复体修复后牙大面积缺损的短期临床修复效果
高愉淇, 储顺礼, 赵爽, 陈星竹, 刘双, 于明岳, 刘玉艳
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  740-746.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210326
摘要 ( 609 )   [HTML]( ) PDF(940KB) ( 69 )  
目的

采用平面对接式边缘的椅旁CAD/CAM全瓷修复体修复后牙大面积缺损,分析患者的短期修复效果。

方法

回顾性分析椅旁CAD/CAM全瓷修复后牙大面积缺损患者的临床资料。共计患牙107颗,修复体均为平面对接式边缘,统计修复体类型。全部患牙均采用“改良美国公众健康服务标准”进行即刻检查以及12个月后的随访检查,比较即刻检查和复诊时修复体完整性、颜色匹配性、修复体固位、牙体完整性、邻接关系和牙周组织健康的A级构成比。

结果

修复体包括32个髓高嵌体和75个髓超嵌体。即刻与复诊检查时各项指标的A级构成比比较,髓高嵌体的修复体完整性由100%下降至96.88%,颜色匹配性由84.38%增加至93.75%;髓超嵌体的修复体固位由100%下降至98.67%,颜色匹配性由89.33%增加至92.00%;2类修复体的基牙完整性、邻接关系及牙周组织健康A级构成比均保持100%;修复失败患者包括1例髓超嵌体脱落和1例髓高嵌体折裂。

结论

对于大面积缺损的后牙髓高嵌体和髓超嵌体修复,采用平面对接式的边缘设计短期修复效果稳定,是较为理想的修复方式。

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胆囊小细胞癌伴肝脏和腹膜后淋巴结转移1例报告及文献复习
周东奎, 鲁明骞, 林雅欣, 冯雪松, 高嫣, 宋浩
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  747-752.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210327
摘要 ( 666 )   [HTML]( ) PDF(1330KB) ( 202 )  
目的

分析胆囊小细胞癌(SCC)患者的临床表现、影像学和病理学特征和治疗方法,提高临床医师对该疾病的认识。

方法

收集1例胆囊SCC患者的临床资料,并结合相关文献复习,探讨胆囊SCC的临床特点、诊断和治疗方法。

结果

患者,男性,51岁,因“上腹部胀痛伴腰背部放射痛半月余”入院。腹部CT提示胆囊占位。肝脏动脉和静脉血管成像CT检查,胆囊新生物侵犯胆总管,胆总管及肝内胆管扩张,肝脏多发转移,肝门区腹膜后淋巴结转移。肿瘤相关抗原CA125水平为65.2 U·mL-1,神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平为23.5 μg·L-1,两者均升高。行超声引导下肝脏占位性病变穿刺活检,病理诊断为转移性SCC。结合病史和临床资料诊断为胆囊SCC伴肝脏及腹膜后淋巴结转移。患者确诊后未行手术治疗,接受2个周期依托泊苷口服化疗,4个周期奈达铂+依托泊苷(EP)静脉化疗,复查腹部CT发现病灶明显缩小。目前患者病情稳定,密切随访中。

结论

胆囊SCC临床表现特异性较差,且容易发生远处转移,病理诊断和免疫组织化学法是诊断本病的金标准,本例胆囊SCC患者EP方案治疗有效,肿瘤体积明显缩小。胆囊SCC患者治疗过程中应定期随访。

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标
影像学
直肠腔内三维超声和MRI检测对中下段直肠癌患者术前T分期和环周切缘的诊断价值
陈东, 李支尧, 陈海涛, 钏志睿, 张映贤, 金鑫, 唐诗聪, 罗晓茂
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  753-760.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210328
摘要 ( 618 )   [HTML]( ) PDF(1480KB) ( 140 )  
目的

比较直肠腔内三维超声(3D-ERUS)和核磁共振成像(MRI)对中下段直肠癌患者术前T分期和环周切缘的诊断效果,探讨3D-ERUS在评估中下段直肠癌患者术前T分期和环周切缘中的临床价值。

方法

收集94例经术后病理诊断为直肠癌患者的临床资料,患者术前均行3D-ERUS和盆腔MRI检查。3D-ERUS和MRI的T分期结果与病理结果的一致性比较采用Kappa检验,以灵敏度、特异度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)、精确率、召回率和F1评价3D-ERUS和MRI对T分期的诊断效果,比较3D-ERUS和MRI对直肠癌患者T分期和环周切缘有无受累的诊断有无差异性。

结果

3D-ERUS对直肠癌患者术前T分期的诊断结果与病理诊断结果的准确率为81.91%(Kappa=0.736,P<0.01),MRI对直肠癌患者术前T分期的诊断结果与病理诊断结果的准确率为74.47%(Kappa=0.624,P<0.01),二者比较差异无统计学意义(χ2=1.12,P=0.289)。3D-ERUS对直肠癌患者Tis期、T1期和T2期的灵敏度、特异度、PPV、NPV、精确率、召回率及F1均分别高于MRI。MRI对T4期直肠癌诊断的灵敏度、特异度、PPV、NPV、精确率、召回率和F1均高于3D-ERUS。3D-ERUS和MRI评估环周切缘有无受累的准确率分别为88.30%和84.04%,二者比较差异无统计学意义(χ2=0.402,P=0.526)。

结论

3D-ERUS和MRI评估中下段直肠癌患者术前T分期和环周切缘状态准确率较高,3D-ERUS对早期直肠癌患者的T分期评估具有较高的临床价值。

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调查研究
中国中老年人心脏代谢性共病与失能的关系
王瑞芬, 罗颜, 陈子烁, 黄紫婷, 苏鹤轩, 徐慧雯, 许蓓蓓, 杨金霞
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  761-769.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210329
摘要 ( 526 )   [HTML]( ) PDF(682KB) ( 95 )  
目的

探讨中国中老年人心脏代谢性共病(CMM)与失能的关系,为我国中老年人群的失能风险评估提供依据。

方法

基于2011-2015年中国健康与养老追踪调查数据,以45岁以上中国中老年人群为研究对象,描述其人口学特征,采用广义估计方程分析CMM与失能的关系。

结果

纳入测量日常活动能力(ADL)功能的对象18 051名和测量工具性日常活动能力(IADL)功能的对象18 541名。在控制年龄和性别等混杂变量后,患有CMM者与ADL失能风险增加(OR=2.18,95%CI:1.95~2.43)以及IADL失能风险增加(OR=1.64,95%CI:1.50~1.80)有关联。患有1种、2种、3种及以上心脏代谢性疾病(CMD)者,发生ADL失能的风险分别是无CMD者的1.29倍、2.13倍和3.41倍,发生IADL失能的风险分别是无CMD者的1.17倍、1.60倍及2.26倍。患有2种、3种、4种CMD的患者中,ADL失能风险最高的组合分别为高血压和卒中(OR=6.00,95%CI:4.27~8.44),高血压、卒中和血脂异常(OR=11.43,95%CI:6.27~20.80),高血压、心脏病、卒中和血脂异常(OR=9.44,95%CI:4.19~21.20);IADL失能风险最高的组合分别为高血压和卒中(OR=5.76,95%CI:4.07~8.17),高血压、卒中和血脂异常(OR=6.93,95%CI:3.45~13.90),高血压、心脏病、卒中和血脂异常(OR=8.56,95%CI:4.27~17.10)。

结论

CMM是影响中老年人群失能风险的重要因素。不同的CMD数量与疾病组合对中老年人失能的影响程度可能存在差异。

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方法学
检测β⁃CTX和N⁃MID水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法的建立和评价
毛骞, 陈翠翠, 梁焕坤, 刘鹏娥, 钟树海, 李来庆
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  770-776.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210330
摘要 ( 601 )   [HTML]( ) PDF(722KB) ( 135 )  
目的

研制一种检测β胶联降解产物(β-CTX)和骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并评价其检测性能。

方法

将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔培养板,采用铕离子(Eu3+)和钐离子(Sm3+)分别标记2G6和5A3 MAb作为检测抗体,建立双抗体夹心TRFIA分析法并制备成试剂盒。通过试剂盒的灵敏度、准确度(稀释回收率)、特异性、精密度、稳定性和临床样本比对等实验评价其检测性能。

结果

制备的双标记TRFIA试剂盒对β-CTX的检测灵敏度为0.025 μg·L-1,线性范围为0.025 ~ 5.000 μg·L-1,对N-MID的检测灵敏度为0.5 μg·L-1,线性范围为0.5~200.0 μg·L-1。β-CTX平均稀释回收率为102.13%,N-MID平均稀释回收率为103.02%,与其他常见骨检测指标无明显交叉反应,特异性较强。β-CTX 批内变异系数(CV)为5.81%~7.82%,批间CV为5.97%~8.02%;N-MID批内CV 为6.05%~8.32%,批间CV为6.14%~8.56%;TRFIA试剂盒可在4 ℃稳定保存6个月,37 ℃稳定保存7 d。

结论

建立的双标记TRFIA方法具有高灵敏度、高特异度、高准确率和方便快捷等优点,适用于大批量临床样品的检测。

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规模化制备高纯度牛奶外泌体工艺方法的建立及其分子与细胞生物学活性鉴定
杨晶, 徐铭枝, 张东伟, 董亚楠, 王伊, 宋海峰
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  777-787.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210331
摘要 ( 1856 )   [HTML]( ) PDF(2608KB) ( 554 )  
目的

建立一种规模化的牛奶外泌体纯化工艺,用于实验室制备和工业规模生产,并评价牛奶外泌体的分子与细胞生物学活性。

方法

取市售多种全脂或脱脂牛奶,以外泌体提取金标准——超速离心法(UC)作为对照,采用多种化学前处理方法去除乳蛋白,切向流超滤技术(TFF)进一步去除残留的乳蛋白,并实现牛奶样品的初纯与浓缩,多模式色谱法(BE-SEC)精纯牛奶外泌体,采用纳米流式细胞术(NanoFCM)检测牛奶外泌体的粒径、颗粒浓度和纯度,透射电子显微镜(TEM)观察牛奶外泌体的形态表现,高效液相色谱(HPLC)验证牛奶外泌体的尺寸和纯度, Western blotting 法检测牛奶外泌体特异性蛋白的表达,基因本体(GO)富集分析差异表达微小RNA(miRNA)的候选靶基因, DAVID Bioinformatics Resources 6.8和KOBAS软件检测京都基因和基因组百科(KEGG)通路中目标候选基因的统计富集度,CytoFlex流式细胞术检测细胞对牛奶外泌体的摄取情况,流式细胞术检测牛奶外泌体作用后Caco-2细胞凋亡率。

结果

工艺研究,磷酸钠沉淀法在操作便利性、方法稳定性和产品质量方便均优于其他预处理方法。TFF法可进一步去除残留乳蛋白并可实现液体浓缩目的,有效衔接至下游BE-SEC精纯方法。以该三步工艺所得外泌体样品经TEM成像显示均呈典型的盘状或杯状外泌体形态。NanoFCM法检测的样品粒径为30~150 nm,且优于UC所得外泌体样本纯度。Western blotting 法检测,确定外泌体样品含有CD81、Alix和TSG101等外泌体特异性标志物。SEC-HPLC分析,不同批次终产物均为单一均质峰,无游离蛋白污染。GO与和KEGG数据库分析,牛奶外泌体富含免疫相关蛋白与炎症反应调节信号通路相关miRNA。上述制备工艺所得外泌体具备高效穿透细胞膜的能力,4 h内入胞比例达99%。

结论

建立了一套由化学沉淀前处理、TFF和BE-SEC三步结合的牛奶外泌体高纯度制备工艺方法。该工艺方法所得牛奶外泌体纯度、产率均优于金标准——UC所得样品。样品理化性质符合典型牛奶外泌体标准,可在数小时内穿透细胞膜,并富含免疫与炎症反应调控相关miRNA。

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综述
猪肾脏异种移植的研究进展Research progress in pig kidney xenotransplantation
于佳庆, 方一晽, 方铭慧, 安培培, 胡正
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  788-795.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210332
摘要 ( 1076 )   [HTML]( ) PDF(750KB) ( 129 )  

猪肾脏异种移植是解决临床供体器官短缺的潜在可行方法,但是猪肾脏异种移植的临床应用面临诸多挑战,包括异种移植免疫排斥、凝血/补体调节功能异常、肾脏生理兼容性与生长速度差异和跨种属病毒感染风险等。近年来,基因编辑技术的进步提高了制备多基因编辑猪的效率,促进了异种移植的发展。敲除α-gal的基因和导入人凝血/补体调节蛋白等基因可使猪肾到非人灵长类动物体内异种移植存活时间明显延长。包括CD154和CD40信号阻断的免疫抑制方案的应用对异种肾脏移植效果十分关键;而SMPDL3b与抗CD20利妥昔单抗的应用有助于缓解猪肾到狒狒移植的蛋白尿症状。抗生素、供体筛选和基因敲除技术相结合亦有望规避异种肾脏移植中的感染风险。在基因编辑猪的构建方面仍然有未知靶点,异种肾脏生理功能变化的机制仍需探讨。现对近年来猪肾脏异种移植相关研究进展进行归纳,展望异种肾脏移植的发展趋势,为异种肾脏移植的深入研究提供参考。

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遗传性视神经病变相关线粒体动力学和基因异常研究进展Research progress in mitochondrial dynamics and gene abnormalities related to hereditary optic neuropathy
彭小蓼, 方芳, 彭龄, 姜文敏
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  796-801.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210333
摘要 ( 527 )   [HTML]( ) PDF(681KB) ( 151 )  

遗传性视神经性疾病是以视神经退行性病变为主的一组疾病的统称。遗传性视神经病变发病中存在视网膜神经节细胞线粒体动力学异常和线粒体基因突变、进而导致线粒体功能障碍,从而引起神经节细胞凋亡等。现简要综述线粒体动力学相关融合、分裂蛋白及其突变所引起的视神经相关疾病,着重阐述与遗传相关视神经病变相关的线粒体动力学异常引起的神经元变性与视神经性疾病之间的相关性,以及相对应的线粒体相关基因的异常,为遗传学视神经病变发病机制中线粒体功能失调机制研究提供依据。

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甲状腺交界性肿瘤诊断和预后相关分子标志物的研究进展Research progress in diagnosis- and prognosis-related molecular markers of borderline thyroid tumor
吴越, 杨帅, 周晶晶, 李真胜男, 孟宪瑛, 臧晓军
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  802-810.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210334
摘要 ( 549 )   [HTML]( ) PDF(890KB) ( 195 )  

甲状腺交界性肿瘤概念的提出对于减少甲状腺肿瘤的过度诊疗具有重要意义,但是利用超声和组织病理检查等传统甲状腺肿瘤诊断方法诊断甲状腺交界性肿瘤具有一定局限性。近年来,分子标志物在临床工作中的应用越来越广泛,其中细胞角蛋白19(CK19)、半乳糖凝集素3(Galectin-3)、骨髓内皮细胞标记物1(HBME-1)和甲状腺过氧化物酶(TPO)等免疫组织化学标志物以及v-raf鼠类肉瘤滤过性病毒致癌基因同源体B1(BRAF)、鼠肉瘤病毒致癌基因同源物基因(RAS)、端粒酶逆转录酶基因(TERT)和微小RNA(miRNA)等遗传学标志物被证实与甲状腺交界性肿瘤的发生发展密切相关,其在甲状腺交界性肿瘤组织中的表达水平有别于传统的甲状腺良恶性肿瘤,因此其不仅可以作为诊断的特异性标志物,还可以用于肿瘤危险度分层、治疗方案的决定、复发监测以及基因治疗等。现从免疫组织化学标志物和遗传学标志物2个方面,介绍包括透明变梁状肿瘤、恶性潜能未定的滤泡性肿瘤、恶性潜能未定的高分化肿瘤和具有乳头状核特点的非浸润性甲状腺滤泡性肿瘤在内的4种甲状腺交界性肿瘤的诊断及预后相关分子标志物的研究进展。

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Wnt5a/Frizzled-2/Ca2+和Wnt3a/Frizzled通路的生理及病理学研究进展Research progress in physiology and pathology of Wnt5a/Frizzled-2/Ca2+ and Wnt3a/Frizzled pathways
王海英, 武心洁, 苑金香, 韩逸君, 张宇琪, 孟慧, 徐赫松, 亚白柳
吉林大学学报(医学版). 2021 (3):  811-818.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210335
摘要 ( 711 )   [HTML]( ) PDF(821KB) ( 290 )  

Wnt信号通路是一种古老且高度保守的信号通路,由Wnt配体蛋白、Wnt受体及其相关附件组成。Wnt通路可分为依赖β-连环蛋白(β-catenin)的经典信号通路和非依赖β-catenin的非经典信号通路两大类。Wnt3a和Wnt5a可分别激活经典的Wnt/β-catenin通路和非经典的Wnt/ Ca2+信号通路。2种通路在神经和心血管等各系统中广泛分布,参与调控胚胎发育、细胞增殖分化和癌症等重要生理和病理过程。Wnt5a/Frizzled-2/Ca2+通路刺激成骨细胞和肺上皮细胞生成,维持成熟海马的突触可塑性和结构并营养神经元,加剧损伤后神经细胞和心肌细胞中的钙超载,维持心脏发育,在癌症的发生发展过程中起促进或抑制的双重作用。Wnt3a/Frizzled通路参与炎症反应并起抗炎作用,减少阿尔茨海默病等疾病中的神经元凋亡,与Frizzled-1或Frizzled-2结合可分别促进或抑制心脏成纤维细胞分化,促进肿瘤增殖、迁移和侵袭。现综述Wnt5a/Frizzled-2/Ca2+和Wnt3a/Frizzled信号通路在胚胎发育、炎症、神经系统、心血管系统和癌症发生过程中的异常激活和抑制引起的生理及病理变化以及对疾病的发生发展及修复的影响,为Wnt信号通路在多系统生理及病理状态下作为研究和治疗靶点提供思路。

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