上一篇
|
下一篇
)2.吉林大学基础医学院 病理生理学教研室，吉林 长春 130021
3.吉林大学第一医院乳腺外科，吉林 长春 130021
4.吉林大学第一医院肾病内科，吉林 长春 130021
探讨线粒体分裂融合蛋白表达失衡在IgA肾病（IgAN）小鼠肾脏病理学变化中的作用，为IgAN的治疗提供一定的实验依据。
20只健康SPF级雄性BALB/C小鼠， 6~8周龄，随机分为对照组和模型组，每组10只。采用牛血清白蛋白（BSA）、脂多糖（LPS）和四氯化碳（CCl4）联合给药的方式建立小鼠IgAN模型。采用免疫荧光技术检测肾小球中IgA沉积，苏木精-伊红（HE）染色观察小鼠肾组织病理形态表现，以评价模型是否构建成功。称量小鼠体质量和肾脏质量，计算各组小鼠肾脏指数；酶活性法检测小鼠血清中肌酐和尿素氮水平。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组小鼠血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测小鼠肾组织中调控线粒体分裂融合的关键基因动力相关蛋白1（Drp1）、线粒体融合蛋白1（Mfn1）和线粒体融合蛋白2（Mfn2）mRNA表达水平，Western blotting法检测小鼠肾组织中Drp1、Mfn1和Mfn2蛋白表达水平。
与对照组比较，模型组小鼠肾小球出现明显的IgA沉积，伴随肾小球萎缩，肾小球系膜细胞和基质增生导致系膜区增宽，肾小管部分细胞肿胀坏死，表明IgAN模型构建成功。与对照组比较，模型组小鼠肾脏指数、血清肌酐和尿素氮水平均明显升高（P<0.05），小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显升高（P<0.05或P<0.01），小鼠肾组织中Drp1 mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05），而小鼠肾组织中Mfn1和Mfn2 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。
线粒体分裂融合蛋白表达失衡可能是IgAN发生发展的机制之一，以分裂融合稳态为靶点的研究可能为IgAN的治疗提供新思路。