研制一种检测β胶联降解产物（β-CTX）和骨钙素N端中分子片段（N-MID）水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法（TRFIA）并评价其检测性能。

将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体（MAb）作为包被抗体包被在96孔培养板，采用铕离子（Eu³⁺）和钐离子（Sm³⁺）分别标记2G6和5A3 MAb作为检测抗体，建立双抗体夹心TRFIA分析法并制备成试剂盒。通过试剂盒的灵敏度、准确度（稀释回收率）、特异性、精密度、稳定性和临床样本比对等实验评价其检测性能。

制备的双标记TRFIA试剂盒对β-CTX的检测灵敏度为0.025 μg·L^－1，线性范围为0.025 ~ 5.000 μg·L^－1，对N-MID的检测灵敏度为0.5 μg·L^－1，线性范围为0.5~200.0 μg·L^－1。β-CTX平均稀释回收率为102.13%，N-MID平均稀释回收率为103.02%，与其他常见骨检测指标无明显交叉反应，特异性较强。β-CTX 批内变异系数（CV）为5.81%~7.82%，批间CV为5.97%~8.02%；N-MID批内CV 为6.05%~8.32%，批间CV为6.14%~8.56%；TRFIA试剂盒可在4 ℃稳定保存6个月，37 ℃稳定保存7 d。

建立的双标记TRFIA方法具有高灵敏度、高特异度、高准确率和方便快捷等优点，适用于大批量临床样品的检测。