探讨柯萨奇病毒A16型（CA16）3C蛋白对横纹肌肉瘤RD细胞凋亡的影响，并阐明其可能的作用机制。

体外培养RD细胞，分为对照组（转染0.4 μg空载体质粒pCMV-HA）、0.1 μg pCMV-HA-3C组（转染0.1 μg pCMV-HA-3C和0.3 μg pCMV-HA）、0.2 μg pCMV-HA-3C组（转染0.2 μg pCMV-HA-3C和0.2 μg pCMV-HA）、0.4 μg pCMV-HA-3C组（转染0.4 μg pCMV-HA-3C）和蛋白激酶B （AKT）激活剂SC79处理组（先用4 mg·L^－1 SC79处理细胞4 h，然后转染0.2 μg pCMV-HA-3C和0.2 μg pCMV-HA）。MTT法检测各组细胞存活率，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，实时荧光定量 PCR（RT-qPCR）法检测各组RD细胞中Bcl-2同源拮抗剂/杀伤剂（Bak）、Bcl-2相关的细胞死亡激动剂（Bad）和p53上调凋亡调节因子（PUMA）mRNA表达水平，Western blotting 法检测各组 RD细胞中Bad、Bak、PUMA、聚ADP核糖聚合酶（PARP）、裂解聚ADP核糖聚合酶（cleaved-PARP）、裂解含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved-caspase-3）、AKT和磷酸化AKT（p-AKT）蛋白表达水平。

与对照组比较，0.4 μg pCMV-HA-3C组细胞存活率明显降低（P<0.01）。与对照组比较，不同剂量pCMV-HA-3C组细胞凋亡率明显升高（P<0.01）。与对照组比较，0.2 μg pCMV-HA-3C组细胞中Bak、Bad和PUMA mRNA和蛋白表达水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）。与对照组比较，不同剂量 pCMV-HA-3C组细胞中cleaved-PARP和cleaved-caspase-3蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。SC79处理实验中，与对照组比较，0.2 μg pCMV-HA-3组细胞中cleaved-PARP、cleaved-caspase-3和AKT蛋白表达水平明显升高（P<0.05），p-AKT蛋白表达水平明显降低（P<0.01）；与0.2 μg pCMV-HA-3C组比较，SC79处理组细胞中cleaved-PARP、cleaved-caspase-3和AKT蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01），p-AKT蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。

CA16型3C蛋白可能通过抑制AKT信号通路诱导RD细胞凋亡。