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)检测非结构蛋白μNS和σNS之间的相互作用及其结合区域，阐明纳尔逊湾正呼肠孤病毒（NBV）的致病机制。
采用Lipo3000转染试剂将pCAG M3和pEFHAσNS质粒分别和共同转染至BHK细胞中，免疫荧光法检测μNS和σNS蛋白在细胞中的定位和分布；用NBV感染BHK细胞，采用Western blotting法检测μNS和σNS蛋白在感染细胞中的表达。构建σNS蛋白N末端10~60个氨基酸（aa）残基缺失的质粒，免疫荧光法检测μNS和σNS蛋白在细胞内共定位的结合区域，酵母双杂交实验验证μNS和σNS蛋白相互作用的结合区域。
亚细胞定位显示，NBV的μNS蛋白在无其他病毒蛋白的情况下会形成包涵体结构，而σNS蛋白弥散地分布在整个细胞质中。Western blotting检测证实μNS和σNS蛋白在感染细胞中表达。采用偶联抗体进行免疫染色，共聚焦显微镜下观察到μNS和σNS蛋白共定位于细胞质中。利用酵母双杂交实验检测到与μNS蛋白相互作用的σNS蛋白的基本区域位于σNS蛋白 N末端区域的60个aa残基区域内。
NBV自噬相关蛋白σNS蛋白可以通过与μNS蛋白相互作用而共同表达于病毒包涵体中，σNS蛋白与μNS蛋白的结合区域位于σNS蛋白N末端的60个aa残基区域内。