吉林大学学报(医学版) 2021, 47(5) 1201-1208 DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210517    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R

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基础研究
发酵红参总皂苷对高糖培养大鼠心肌间质成纤维细胞的保护作用及其机制
曲萌1,翁诗雅2,郑鸿1,李焱2,高润泽2,王胜告3,于春艳2,陈博学1,董志恒2()
1.北华大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,吉林 吉林 132013
2.北华大学基础医学院病理学教研室,吉林 吉林 132013
3.北华大学基础医学院解剖学教研室,吉林 吉林 132013
摘要目的

观察发酵红参总皂苷(FRGTS)对高糖培养的大鼠心肌间质成纤维细胞(cFb)增殖和胶原合成的作用,并阐明其作用机制。

方法

采用胰酶消化和差速贴壁法分离提取1~3 d龄SD大鼠cFb细胞,培养、传代后,取2~3代细胞用于实验;将细胞分成正常糖对照组(5.5 mmol·L-1 D-葡萄糖)、高糖组(25 mmol·L-1 D-葡萄糖)、高糖+15 mg·L-1 FRGTS组(F15组)和高糖+30 mg·L-1 FRGTS组(F30组);采用MTT法检测各组cFb细胞增殖活性,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组cFb细胞培养上清液中Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白水平,实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测各组cFb细胞中Smad3和Smad7 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组cFb细胞中尾加压素Ⅱ(UⅡ)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3和Smad7蛋白表达水平。

结果

与正常糖对照组比较,高糖组cFb细胞增殖活性明显升高(P<0.01),Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白水平明显升高(P<0.01);与高糖组比较,F15组和F30组cFb细胞增殖活性降低(P<0.05),其中F30组抑制作用强于F15组。发酵红参总皂苷干预24 h后,F15组和F30组细胞培养上清液中Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白水平明显低于高糖组(P<0.05),其中F30组作用较F15组更为明显。与正常糖对照组比较,高糖组cFb细胞中UⅡ和TGF-β1蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Smad3 mRNA和蛋白的表达水平明显升高(P<0.01),而Smad7 mRNA和蛋白的表达水平则明显降低(P<0.05);与高糖组比较,发酵红参总皂苷干预24 h后,F15组和F30组cFb细胞中UⅡ和TGF-β1蛋白表达水平明显降低(P<0.01),Smad3 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),而Smad7 mRNA和蛋白表达水平则明显升高(P<0.05或P<0.01),其中F30组作用优于F15组。

结论

FRGTS能有效抑制高糖所致的纤维化效应,保护糖尿病大鼠心肌,其作用机制与阻抑cFb细胞中UⅡ活化和调节TGF-β1/Smads传导通路有关。

关键词: 发酵红参总皂苷 高糖 细胞增殖 尾加压素Ⅱ 转化生长因子β1 Smads信号通路
收稿日期  2021-01-31   修回日期    网络版发布日期  2021-10-26  
DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210517
基金项目: 吉林省卫健委卫生与健康技术创新项目(2020J010);吉林省中医药管理局科技项目(2018109);国家级大学生创新训练项目(202010201002);吉林省大学生创新训练项目(201910201098);北华大学研究生创新计划项目(2019070);北华大学科研平台项目(20140301);北华大学大学生创新训练项目(202010201157)
通讯作者: 董志恒
作者简介: 曲 萌(1971-),女,吉林省吉林市人,副教授,医学博士,主要从事糖尿病慢性并发症方面的研究。

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