探讨瑞德西韦（RDV）在细胞与动物水平对肠道病毒71型（EV71）的抗病毒活性，并阐明其抗病毒作用机制。

基于人横纹肌瘤（RD）细胞进行RDV抗肠道病毒活性评价，检测RDV对EV71、柯萨奇病毒A6型（CA6）、肠道病毒D68型（EVD68）和柯萨奇病毒16型（CA16）的半数毒性浓度（CC₅₀）和半数有效浓度（EC₅₀），计算选择指数（SI）。将RD细胞分为细胞对照组（不处理）、病毒对照组和给药组。病毒对照组RD细胞给予EV71病毒液，给药组RD细胞再给予不同浓度（0.005、0.015、0.046、0.137、0.410、1.230、3.700、11.110、33.330和100.000 μmol·L^－1）RDV。72 h后，采用CellTiter-Glo^? Luminescent检测试剂盒测定各组RD细胞活性。在抗EV71细胞活性评价实验中，将RD细胞分为给药组和病毒对照组，给药组RD细胞给予不同浓度（0.03、0.10、0.30、0.80和2.50 μmol·L^－1）RDV。30 h后，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组RD细胞中EV71 RNA表达水平，采用Western blotting法和免疫荧光法检测各组RD细胞中EV71结构蛋白VP1表达量。采用加药时序实验验证RDV的抗病毒作用阶段。在抗EV71动物药效学实验中，将35只ICR乳鼠随机分为安慰剂组（给予2% Tween 80，n=12）、3.0 mg·kg^－1RDV组（给予3.0 mg·kg^－1 RDV，n=12）和1.5 mg·kg^－1组RDV组（给予1.5 mg·kg^－1 RDV， n=11），每只乳鼠经腹腔攻毒5×10³ PFU。4 h后进行第1次给药，连续给药2周，观察并记录乳鼠生存率。在攻毒后第3 天采用RT-qPCR法检测各组乳鼠各种组织中病毒载量（即EV71 RNA拷贝数）。

RDV对EV71、CA6、EVD68和CA16的EC₅₀分别为（0.05±0.01）、（0.14±0.06）、（0.02±0.01）和（0.10±0.03） μmol·L^－1。与病毒对照组比较，0.10、0.30、0.80和2.50 μmol·L^－1RDV组RD细胞中EV71 RNA表达水平降低（P<0.05或P<0.01），0.80和2.50 μmol·L^－1RDV组RD细胞中EV71结构蛋白VP1表达量降低。与病毒对照组比较，0.80 μmol·L^－1RDV组RD细胞中Ⅲ和Ⅳ阶段（病毒复制阶段）时EV71病毒基因组RNA拷贝数明显降低（P<0.05）。与安慰剂组比较，各给药组乳鼠生存率差异无统计学意义（P>0.05），但有一定的保护趋势。与安慰剂组比较，3.0 mg·kg^－1RDV组乳鼠肺和肌肉组织中病毒载量明显降低（P<0.05或P<0.01）。

RDV对以EV71为代表的肠道病毒具有良好的细胞水平抗病毒活性，并主要作用于病毒感染后的复制阶段。RDV能明显降低小鼠肺和肌肉组织中病毒载量，提示其在动物水平有一定的治疗潜力。