吉林大学学报(医学版) 2022, 48(4) 946-953 DOI: 10.13481/j.1671-587X.20220414    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R

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基础研究
肿瘤相关巨噬细胞来源IL-6通过上调肿瘤细胞中LIF表达对口腔鳞状细胞癌Cal27细胞侵袭和迁移的促进作用
李玮柏1,曹娟1,郭秀2,林欣萍1,董春玲2(),李波1,3()
1.吉林大学口腔医院实验教学中心,吉林 长春 130021
2.吉林大学第二医院呼吸内科,吉林 长春 130041
3.中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院实验教学中心 辽宁省口腔疾病重点实验室,辽宁 沈阳 110002
摘要目的

探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)来源的白细胞介素6(IL-6)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)Cal27细胞中白血病抑制因子(LIF)表达及侵袭和迁移的影响,并阐明其可能的作用机制。

方法

体外培养人OSCC Cal27细胞和小鼠腹腔巨噬细胞(Raw264.7细胞)。Raw264.7细胞分为对照组和实验组,对照组细胞用普通培养基孵育,实验组细胞用Cal27细胞上清液孵育得到TAMs,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测2组细胞中IL-6 mRNA表达水平及IL-6水平。Cal27细胞分为对照组和实验组(5 μg·L-1 Tocilizumab),对照组直接加入TAMs上清液,实验组提前用IL-6受体(IL-6R)抑制剂Tocilizumab干预后加入TAMs上清液,Transwell小室实验检测2组Cal27细胞迁移和侵袭能力,细胞划痕实验检测2组Cal27细胞划痕愈合率,RT-qPCR法和Western blotting法检测2组Cal27细胞中LIF mRNA及蛋白表达水平。

结果

RT-qPCR法和ELISA法检测,与对照组Raw264.7细胞比较,实验组TAMs中IL-6 mRNA表达水平和IL-6水平明显升高(P<0.01)。Transwell小室实验,与对照组比较,实验组Cal27细胞迁移和侵袭细胞数明显减少(P<0.01)。细胞划痕实验,与对照组比较,实验组Cal27细胞划痕愈合率明显降低(P<0.01)。RT-qPCR法和Western blotting法检测,与对照组比较,实验组Cal27细胞中LIF mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。

结论

TAMs来源的IL-6通过上调肿瘤细胞中LIF表达进而促进OSCC Cal27细胞的侵袭和迁移。

关键词: 白血病抑制因子 口腔鳞状细胞癌 肿瘤相关巨噬细胞 白细胞介素6
收稿日期  2021-10-27   修回日期    网络版发布日期  2022-07-26  
DOI: 10.13481/j.1671-587X.20220414
基金项目: 吉林省科技厅自然科学基金项目(20200201329JC);辽宁省科技厅自然科学基金面上项目(2021-MS-175);吉林省教育厅“十三五”科学技术研究规划项目(JJKH20201110KJ);吉林省财政厅优秀中青年骨干人才项目(JCSZ2019378-14);吉林省财政厅卫生专项项目(2020SCZT023);吉林省卫健委青年科技骨干培养计划项目(2016Q020);吉林省卫健委科研计划项目(2015Z007);吉林大学白求恩计划科研项目(2018B27)
通讯作者: 董春玲,李波
作者简介: 李玮柏(1994-),女,黑龙江省大庆市人,在读硕士研究生,主要从事口腔肿瘤发病机制和治疗方面的研究。

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