目的 探讨负载二氧化铈（CeO₂）的树枝状介孔二氧化硅纳米颗粒（DS@CeO? NPs）对小鼠颌骨骨髓间充质干细胞（JBMMSCs）成骨分化的影响，并阐明其可能的作用机制。 方法 合成DS@CeO₂ NPs，采用透射电子显微镜（TEM）和动态光散射法（DLS）检测DS@CeO? NPs的形貌和粒径。采用酶消法提取小鼠JBMMSCs，流式细胞术鉴定细胞表面标志物。将细胞分为空白对照组和不同浓度（25、50、100和200 mg·L^-1）DS@CeO₂ NPs组，采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法和Calcein/碘化丙啶（PI）染色法检测各组细胞增殖及存活情况。将细胞分为对照组和不同浓度（0、25、50和100 mg·L^-1）DS@CeO? NPs成骨诱导组，成骨诱导7 d后，采用碱性磷酸酶（ALP）染色法检测各组细胞中ALP活性，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组细胞中ALP、Runt相关转录因子2（Runx2）、骨涎蛋白2（BSP2）和骨桥蛋白（OPN）mRNA表达水平，Western blotting法检测各组细胞中ALP、Runx2和OPN蛋白表达水平；另设单纯成骨组和成骨+DS@CeO₂ NPs组，采用RT-qPCR法和Western blotting法检测2组细胞中β-连环蛋白（β-catenin）mRNA及蛋白表达水平。在过氧化氢（H₂O₂）刺激下，将细胞分为对照组和DS@CeO₂ NPs预处理组，采用二氯二氢荧光素二乙酯（DCFH-DA）荧光染色法和流式细胞术检测2组细胞中活性氧（ROS）水平。 结果 TEM和DLS，DS@CeO? NPs呈近球形，平均水合粒径为378.2 nm。流式细胞术，细胞中CD73、CD90、CD105和CD44表达率均高于95%，CD34和CD45几乎不表达，可鉴定为JBMMSCs。CCK-8法，与对照组比较，25、50和100 mg·L^-1 DS@CeO? NPs组细胞存活率差异无统计学意义（P>0.05），200 mg·L^-1 DS@CeO? NPs组细胞存活率明显降低（P<0.05）。ALP染色法，与对照组和0 mg·L^-1 DS@CeO₂ NPs组比较，25和50 mg·L^-1 DS@CeO₂ NPs组细胞ALP染色较深且阳性染色面积较大，细胞ALP活性升高。RT-qPCR法和Western blotting法，与0 mg·L^-1 DS@CeO? NPs组比较，25 mg·L^-1 DS@CeO? NPs组细胞中ALP、BSP2、Runx2和OPN mRNA表达水平以及ALP、Runx2和OPN蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）。与单纯成骨组比较，成骨+DS@CeO? NPs组细胞中β-catenin mRNA和蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）。DCFH-DA染色法和流式细胞术，与对照组比较，DS@CeO? NPs预处理组细胞中ROS水平降低。 结论 DS@CeO? NPs具有良好的生物相容性，可促进JBMMSCs成骨分化，其作用机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路和抗氧化作用有关。

目的 探讨棕榈酸钠（PA）处理所致脂毒性对小鼠L929成纤维细胞线粒体功能和细胞凋亡的影响，并阐明其与线粒体融合蛋白2（MFN2）和线粒体相关内质网膜（MAMs）结构之间的关系。 方法 以小鼠L929成纤维细胞为研究对象，采用不同浓度（0.1、0.2、0.3、0.4、0.5和0.6 mmol·L^-1）PA处理细胞12、24、36和48 h，采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测处理后各组细胞存活率，筛选PA最佳干预条件。将细胞分为对照组和PA组。采用流式细胞术检测2组细胞凋亡率，油红O染色法观察2组细胞脂质沉积情况，透射电子显微镜（TEM）观察2组细胞线粒体和MAMs结构特征，流式细胞术检测2组细胞中活性氧（ROS）水平，JC-1法检测2组细胞线粒体膜电位，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法和Western blotting法检测2组细胞中MFN2 mRNA及蛋白表达水平。 结果 CCK-8法，处理12、24、36和48 h后，与对照组比较，PA处理浓度≥0.2 mmol·L^-1的各组L929细胞存活率均明显降低（P<0.05或P<0.001），且呈浓度和时间依赖性；其中处理24 h后0.3 mmol·L^-1 PA组L929细胞存活率约为60%，以该浓度和时间作为后续PA干预条件。流式细胞术和油红O染色法，与对照组比较，PA组L929细胞凋亡率明显升高（P<0.001），细胞内脂质沉积水平明显升高（P<0.001）。TEM观察，PA组L929细胞线粒体出现肿胀、嵴结构破坏和碎片化，MAMs接触位点减少，偶联距离增大。流式细胞术、JC-1法和RT-qPCR法，与对照组比较，PA组L929细胞中ROS水平明显升高（P<0.001），细胞线粒体膜电位明显降低（P<0.01），细胞中MFN2 mRNA和蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）。 结论 PA脂毒性可下调MFN2表达并破坏MAMs结构，促进细胞氧化应激、线粒体去极化和细胞凋亡，提示该条件下MFN2表达下调和MAMs结构受损与线粒体稳态失衡及细胞凋亡之间存在关联。

目的 探究益经汤（YJD）对自然衰老雌性果蝇卵巢储备功能的改善作用，并阐明其可能的作用机制。 方法 选取1 920只黑腹雌性果蝇随机分为年轻组、老年组、低剂量YJD（0.25 g·L^-1）组、中剂量YJD（0.50 g·L^-1）组、高剂量YJD（1.00 g·L^-1）组和阳性药20-羟基蜕皮酮（20E）组，每组320只。随机选取各组雌性果蝇100只，按雌雄果蝇1∶2的比例向各组加入对应数量的黑腹雄性果蝇，共同培养7 d后，收集雌性果蝇单独产卵48 h，计数各组果蝇产卵量和成蛹数，计算成蛹率。于体视显微镜下解剖各组果蝇卵巢，测量其长度和直径以评估卵巢形态。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组果蝇卵巢组织中20E和保幼激素（JH）水平，免疫荧光染色观察各组果蝇卵巢组织中生殖干细胞（GSCs）数量，Western blotting法检测各组果蝇卵巢组织中骨形态发生蛋白（BMP）/抗DPP同源物（Smad）信号通路相关蛋白Bam、Nos、Dpp、Smad4、Smad1/5/9和磷酸化Smad1/5/9（p-Smad1/5/9）表达水平。 结果 与年轻组比较，老年组雌性果蝇的产卵数、成蛹数和成蛹率均明显降低（P<0.01），卵巢形态萎缩，卵巢长度和直径均明显减少（P<0.01），卵巢组织中20E和JH水平明显降低（P<0.01），GSCs数量明显减少（P<0.01）。与老年组比较，低、中和高剂量YJD组及20E组果蝇产卵数、成蛹数和成蛹率均明显升高（P<0.05或P<0.01），卵巢形态恢复至饱满正常形态，卵巢长度和直径均明显增加（P<0.05或P<0.01），卵巢组织中20E和JH水平均明显升高（P<0.05或P<0.01），中和高剂量YJD组及20E组果蝇GSCs数量明显增加（P<0.01）。与年轻组比较，老年组果蝇卵巢组织中Bam、Nos、Dpp、Smad4和p-Smad1/5/9蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）；与老年组比较，低、中和高剂量YJD组及20E组果蝇卵巢组织中Bam、Nos、Dpp、Smad4和p-Smad1/5/9蛋白表达水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）。 结论 YJD可改善老年雌性果蝇卵巢储备功能，提升其生殖能力，恢复卵巢形态，上调卵巢激素水平并增加GSCs数量，其作用机制可能与调控BMP/Smad信号通路促进GSCs再生有关。

目的 探讨共表达β2微球蛋白（B2M）与嵌合抗原受体（CAR）对靶向间皮素（MSLN）的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）生物学行为的影响，阐明B2M在增强CAR-T细胞对MSLN阳性实体瘤疗效中的作用。 方法 构建共表达B2M与CAR的3代抗MSLN CAR-T（B2M-28bbz-T）细胞和对照传统抗MSLN CAR-T（28bbz-T）细胞。构建稳定过表达MSLN的293T细胞（293T-MSLN）。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组CAR-T细胞中B2M、重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）mRNA表达水平，流式细胞术检测各组CAR-T细胞中B2M蛋白和CAR分子表达情况及T淋巴细胞增殖能力。以293T-MSLN细胞和MSLN阳性卵巢癌SK-OV-3细胞为靶细胞，以效靶比（E/T）为1∶1分别将未转导的T淋巴细胞、28bbz-T细胞和B2M-28bbz-T细胞与靶细胞共孵育72 h，孵育后的靶细胞分别为T组、28bbz-T组和B2M-28bbz-T组。采用细胞毒性实验检测CAR-T细胞作用下各组靶细胞活性，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组靶细胞上清中干扰素γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。选取20只雌性NSG小鼠随机分为磷酸盐缓冲液（PBS）组、28bbz-T组、B2M-28bbz-T组和蓝色荧光蛋白（BFP）-28bbz-T组，每组5只。将SK-OV-3细胞皮下植入小鼠构建卵巢癌细胞系来源异种移植（CDX）模型，于第7天经尾静脉注射相应CAR-T细胞，观察结束后处死小鼠并测量各组小鼠肿瘤体积和质量。 结果 成功构建B2M-28bbz-T细胞和28bbz-T细胞。RT-qPCR法，与28bbz-T组比较，B2M-28bbz-T组细胞中B2M mRNA表达水平明显升高（P<0.01），VH和VL mRNA表达水平均无明显变化，差异无统计学意义（P>0.05）。流式细胞术，2组细胞CAR分子表达和增殖能力无明显差异。细胞毒性实验，与28bbz-T细胞比较，B2M-28bbz-T组293T-MSLN细胞和SK-OV-3细胞活性均明显降低（P<0.01或P<0.001）。ELLSA法，与28bbz-T组比较，B2M-28bbz-T组293T-MSLN细胞和SK-OV-3细胞上清中IFN-γ及TNF-α水平均明显升高（P<0.05）。体内实验，与PBS组比较，28bbz-T组和B2M-28bbz-T组小鼠的肿瘤生长均受到抑制，其中B2M-28bbz-T组1只小鼠肿瘤被完全清除。28bbz-T组小鼠肿瘤质量明显高于B2M-28bbz-T组（P<0.01）；28bbz-T组与BFP-28bbz-T组小鼠肿瘤质量比较差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 B2M与CAR分子共表达可通过促进T淋巴细胞活化和促炎细胞因子分泌，增强靶向MSLN的CAR-T细胞毒性及其体内抗肿瘤活性。

目的 探讨黄芪甲苷（AST Ⅳ）与三七总皂苷（PNS）配伍冰片复方（APB）调控有氧糖酵解和小胶质细胞极化对大鼠脑缺血/再灌注（CI/R）后神经炎症的抑制作用，并阐明其协同机制。 方法 取25只健康雄性SD大鼠，随机分为假手术组、模型组、低剂量APB组、高剂量APB组和阳性对照药物丁苯酞（NBP）组，每组5只。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞局灶性脑缺血（MCAO）模型，假手术组大鼠未实施血管阻断操作。各组大鼠于缺血2 h后再灌注开始时灌胃给药，每日2次。低剂量APB组大鼠给予60 mg·kg^-1冰片+80 mg·kg^-1 AST Ⅳ+200 mg·kg^-1 PNS，高剂量APB组大鼠给予120 mg·kg^-1冰片+160 mg·kg^-1 AST Ⅳ+400 mg·kg^-1 PNS，NBP组大鼠给予80 mg·kg^-1 NBP；假手术组和模型组大鼠给予等体积纯水。处死前2 h，评估各组大鼠改良神经功能缺损评分（mNSS）。再灌注48 h后，各组大鼠麻醉后经腹主动脉取血，处死大鼠并取缺血侧脑组织。采用HE染色和尼氏染色观察各组大鼠脑组织海马区神经细胞损伤情况及尼氏小体数量，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组大鼠血清中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素10（IL-10）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素4（IL-4）水平，免疫荧光染色检测各组大鼠脑组织中小胶质细胞M1型和M2型极化状态，Western blotting法检测各组大鼠脑组织中糖酵解关键限速酶乳酸脱氢酶A（LDHA）、葡萄糖转运蛋白1（GLUT1）和己糖激酶2（HK2）蛋白表达水平。 结果 mNSS评分法，与假手术组比较，模型组大鼠神经功能缺损评分明显升高（P<0.05）；与模型组比较，低剂量APB组、高剂量APB组和NBP组大鼠神经功能缺损评分均明显降低（P<0.05或P<0.01）。HE染色，假手术组大鼠海马区神经细胞排列规则；模型组大鼠海马区神经细胞出现核固缩或空泡样变性；与模型组比较，低剂量APB组、高剂量APB组和NBP组大鼠海马区神经细胞损伤减轻，核固缩和空泡细胞减少。与假手术组比较，模型组大鼠海马区神经细胞存活率明显降低（P<0.05）；与模型组比较，低剂量APB、高剂量APB和NBP组大鼠海马区神经细胞存活率均明显升高（P<0.05）。尼氏染色，与假手术组比较，模型组大鼠海马区神经细胞中尼氏小体数量明显减少（P<0.05）；与模型组比较，低剂量APB组、高剂量APB组和NBP组大鼠海马区神经细胞中尼氏小体数量均明显增加（P<0.05）。ELISA法，与假手术组比较，模型组大鼠血清中IL-1β和TNF-α水平明显升高（P<0.05），IL-10和IL-4水平明显降低（P<0.05或P<0.01）；与模型组比较，低剂量APB组、高剂量APB组和NBP组大鼠血清中IL-1β及TNF-α水平明显降低（P<0.05），IL-10和IL-4水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。免疫荧光染色，与假手术组比较，模型组大鼠脑组织中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）/离子钙结合接头蛋白分子1（Iba-1）共表达荧光强度明显升高（P<0.01），精氨酸酶1（Arg-1）/Iba-1共表达荧光强度明显降低（P<0.01）；与模型组比较，低剂量APB组、高剂量APB组和NBP组大鼠脑组织中iNOS/Iba-1共表达荧光强度均明显降低（P<0.05或P<0.01），Arg-1/Iba-1共表达荧光强度均明显升高（P<0.05或P<0.01）。Western blotting法，与假手术组比较，模型组大鼠脑组织中LDHA、GLUT1和HK2蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）；与模型组比较，低剂量APB组和高剂量APB组大鼠脑组织中LDHA蛋白表达水平均明显降低（P<0.05），高剂量APB组和NBP组大鼠脑组织中GLUT1及HK2蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。 结论 APB可通过下调糖酵解酶LDHA、GLUT1和HK2蛋白表达抑制小胶质细胞向M1型极化，从而减轻脑组织炎症反应，改善大鼠CI/R后的神经功能。

目的 探讨百克敏对小鼠精母细胞系GC-2细胞线粒体功能及动力学平衡的影响，并阐明其可能的作用机制。 方法 采用噻唑蓝（MTT）法检测不同浓度百克敏作用下各组GC-2细胞活性，确定合适的作用浓度。将小鼠精母细胞GC-2分为对照组、低浓度百克敏（0.8 μmol·L^-1）组、中浓度百克敏（1.6 μmol·L^-1）组和高浓度百克敏（2.4 μmol·L^-1）组。采用线粒体膜电位JC-1检测试剂盒检测各组GC-2细胞的线粒体内膜跨膜电位差（ΔΨ_m），2'，7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针法检测各组GC-2细胞中活性氧（ROS）水平，三磷酸腺苷（ATP）检测试剂盒测定各组GC-2细胞中ATP水平，Mito-Tracker荧光探针法检测各组GC-2细胞中线粒体融合分裂情况，Western blotting法检测各组GC-2细胞中线粒体融合分裂相关蛋白视神经萎缩蛋白1（OPA1）和动力相关蛋白1（DRP1）蛋白表达水平。 结果 与对照组比较，百克敏浓度≥1.0 μmol·L^-1时各组GC-2细胞活性明显降低（P<0.001），百克敏对GC-2细胞的半数抑制浓度（IC??）为4.8 μmol·L^-1。与对照组比较，低、中和高浓度百克敏组GC-2细胞中ΔΨ_m明显降低（P<0.05或P<0.01），细胞中ROS水平明显升高（P<0.05或P<0.01），细胞中ATP水平明显降低（P<0.001）。Mito-Tracker染色，对照组GC-2细胞线粒体呈连续网络状分布，融合状态良好；低、中和高浓度百克敏组GC-2细胞线粒体呈碎片化形态，网络结构断裂明显，融合减少、分裂增加。Western blotting法，与对照组比较，中和高浓度百克敏组GC-2细胞中OPA1蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01），低、中和高浓度百克敏组GC-2细胞中DRP1蛋白表达水平明显升高（P<0.001）。 结论 百克敏可诱导GC-2细胞线粒体融合与分裂失衡，导致线粒体功能紊乱，其毒性作用可能与线粒体动力学调控异常有关。

目的 探讨敲低NIPBL基因对小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化的影响，阐明其通过音猬因子（Shh）信号通路发挥作用的机制。 方法 分离培养C57小鼠第3代BMSCs，采用流式细胞术鉴定细胞表面标志物表达情况。采用携带绿色荧光蛋白（GFP）的慢病毒转染构建NIPBL基因敲低的BMSCs模型，分为对照组（常规培养）、sh-NC组（转染Scramble shRNA空载慢病毒）和sh-NIPBL组（转染NIPBL shRNA慢病毒）。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组BMSCs中NIPBL mRNA表达水平。对各组BMSCs进行成骨诱导培养，动态观察细胞形态变化，于成骨诱导后第7、14和21天收集细胞，采用Western blotting法检测各组细胞中Shh信号通路分子Shh、patched同源蛋白1（PTCH1）和胶质瘤相关癌基因同源蛋白1（GLI1）及成骨标志物碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OCN）和Ⅰ型胶原蛋白α1链（COL1A1）蛋白表达水平。于诱导后第21天采用茜素红染色法评估各组BMSCs矿化能力。 结果 第3代BMSCs生长状态良好，呈长梭形或纺锤形，且呈现典型的CD105?CD45?表型。sh-NIPBL组和sh-NC组小鼠BMSCs中GFP稳定表达率高于90%，对照组小鼠BMSCs中未观察到荧光信号。与对照组比较，sh-NIPBL组小鼠BMSCs中NIPBL mRNA表达水平明显降低（P<0.001），表明NIPBL稳定敲低的BMSCs模型成功构建。成骨诱导后第21天，对照组小鼠BMSCs中布满致密矿化结节；sh-NIPBL组细胞中仅见少量、散在的微小矿化结节，分布稀疏且不融合，提示该组细胞向成骨细胞分化滞后。成骨诱导后第21天，与sh-NC组比较，sh-NIPBL组小鼠BMSCs中Shh、PTCH1、GLI1、COL1A1、ALP和OCN蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。成骨诱导后第7、14和21天，sh-NIPBL组小鼠BMSCs中上述蛋白表达水平始终低于对照组和sh-NC组。茜素红染色，对照组和sh-NC组BMSCs中可见大量密集、融合成片的橙红色矿化结节，sh-NIPBL组BMSCs中仅见少量散在的橙红色斑点。与对照组比较，sh-NIPBL组细胞矿化能力明显降低（P<0.01）。 结论 敲低NIPBL基因可导致小鼠BMSCs成骨和矿化能力降低，其作用机制与抑制Shh信号通路活性和下调成骨相关蛋白表达有关。

目的 探讨敲低含硫氧还蛋白结构域蛋白9（TXNDC9）基因对结直肠癌（CRC）细胞凋亡和自噬的影响，并阐明其基于p53依赖途径的潜在分子机制。 方法 选用人源性结肠上皮细胞系NCM460细胞以及结肠癌细胞系HCT116、SW620、SW480和LoVo细胞。将结肠癌细胞HCT116分为NC组（转染阴性对照si-NC）、si-TXNDC9组（转染si-TXNDC9）和p53信号通路抑制剂PTF-α组（PTF-α组，转染si-TXNDC9并用5 μmol·L^-1 PTF-α处理24 h）。采用平板克隆实验和Transwell小室实验检测各组细胞克隆形成数及侵袭细胞数，Western blotting法检测各组细胞中自噬、凋亡和p53通路相关蛋白表达水平，末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记（TUNEL）法检测各组细胞凋亡率，透射电子显微镜（TEM）观察各组细胞自噬小体数。构建裸鼠移植瘤模型，随机分为对照组（接种si-NC转染的HCT116细胞）、敲低组（接种si-TXNDC9转染的HCT116细胞）和抑制剂组（接种si-TXNDC9转染的HCT116细胞并腹腔注射PTF-α），每组5只。每7 d测量并记录各组裸鼠肿瘤体积，于第28天处死各组裸鼠后剥离瘤体并称质量。 结果 细胞实验，与NCM460细胞比较，HCT116、SW620、SW480和LoVo细胞中TXNDC9蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）。与NC组比较，si-TXNDC9组HCT116细胞克隆形成数和侵袭细胞数明显减少（P<0.05），细胞凋亡率明显升高（P<0.05），细胞中B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）蛋白和B细胞淋巴瘤特大蛋白（Bcl-XL）表达水平明显降低（P<0.05），Bcl-2相关X蛋白（BAX）表达水平明显升高（P<0.05），自噬小体数明显增加（P<0.05），自噬相关蛋白7（ATG7）和Beclin-1蛋白表达水平及微管相关蛋白1轻链3（LC3）-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显升高（P<0.05），P62蛋白表达水平明显降低（P<0.05），P53和P21蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与si-TXNDC9组比较，PTF-α组HCT116细胞克隆形成数和侵袭细胞数明显增加（P<0.05），细胞凋亡率明显降低（P<0.05），细胞中Bcl-2和Bcl-XL蛋白表达水平明显升高（P<0.05），BAX蛋白表达水平明显降低（P<0.05），自噬小体数明显减少（P<0.05），细胞中ATG7和Beclin-1蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显降低（P<0.05），P62蛋白表达水平明显升高（P<0.05），P53和P21蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。动物实验，与对照组比较，敲低组裸鼠肿瘤质量和各时间点肿瘤体积均明显降低（P<0.05）；与敲低组比较，抑制剂组裸鼠肿瘤质量和各时间点肿瘤体积均明显升高（P<0.05）。 结论 敲低TXNDC9可通过调节p53依赖途径，促进CRC细胞凋亡和自噬，进而抑制其增殖和侵袭能力。

目的 探讨三七总皂苷（PNS）对胃癌（GC）细胞生物学行为的影响，并分析其与Kelch样ECH相关蛋白1（Keap1）-核因子E2相关因子2（Nrf2）信号通路的关系。 方法 以GC细胞系AGS和HGC27细胞及人正常胃黏膜上皮细胞GES-1为研究对象，给予不同浓度PNS处理，采用MTT法检测各组细胞活性。将AGS和HGC27细胞分为对照组（0 μmol·L^-1 PNS组）以及5、10和20 μmol·L^-1 PNS组。采用集落形成实验检测各组细胞增殖能力，Transwell小室实验检测各组迁移细胞数和侵袭细胞数，2'，7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针法检测各组细胞中活性氧（ROS）水平，Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、Bcl-2相关细胞死亡激动蛋白（Bad）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）和剪切型Caspase-3（cleaved Caspase-3）及Keap1和Nrf2蛋白表达水平，免疫共沉淀（Co-IP）法结合Western blotting法检测各组细胞中Keap1与Nrf2相互作用及Nrf2泛素化情况。 结果 处理48 h后，与对照组比较，5、10和20 μmol·L^-1 PNS组AGS及HGC27细胞活性均明显降低（P<0.001），GES-1细胞活性差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较，5、10和20 μmol·L^-1 PNS组AGS及HGC27细胞集落形成数以及迁移细胞数和侵袭细胞数均明显减少（P<0.001），细胞凋亡率和细胞中ROS水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）。与对照组比较，5、10和20 μmol·L^-1 PNS组AGS及HGC27细胞中Bcl-2和Nrf2蛋白表达水平明显降低（P<0.001），Bad、Bax、cleaved Caspase-3和Keap1蛋白表达水平明显升高（P<0.001）。与对照组比较，PNS组AGS和HGC27细胞中Keap1与Nrf2共沉淀信号均增强，AGS和HGC27细胞中Nrf2泛素化信号均减弱。 结论 PNS可抑制GC细胞增殖、迁移和侵袭，促进细胞凋亡并提高细胞内氧化应激水平，其作用与调控Keap1-Nrf2信号通路相关蛋白表达及Keap1-Nrf2相互作用有关。

目的 基于斑马鱼胚胎模型系统评价北细辛水提物的发育毒性及潜在的心脏和肝脏相关毒性，明确其剂量-反应关系及敏感靶器官，为北细辛的安全性评价提供实验依据。 方法 选取受精后天数（dpf）为1的野生型AB品系斑马鱼胚胎，剔除未受精及发育异常个体后，随机分为对照组（仅加入培养液）及不同浓度北细辛水提物（100、200、300、500、1 000和2 000 mg·L^-1）处理组，每组18枚，持续暴露至5 dpf。记录各组斑马鱼胚胎2 dpf孵化率和5 dpf死亡率，绘制浓度-效应曲线，采用Probit回归分析计算半数致死浓度（LC₅₀）和20%致死浓度（LC₂₀）、10%致死浓度（LC₁₀）及5%致死浓度（LC₅）。于5 dpf观察各组斑马鱼胚胎形态学改变，测定各组斑马鱼心率、静脉窦-动脉球（SV-BA）距离和心包面积以评价胚胎心脏结构与功能变化。采用油红O染色测定各组斑马鱼胚胎肝脏积分光密度（IOD）以评价肝脏脂质沉积水平。 结果 与对照组比较，≥300 mg·L^-1组斑马鱼胚胎孵化率均明显降低（P<0.05），死亡率均明显升高（P<0.01），呈浓度依赖性。Probit回归分析，北细辛水提物LC₅₀为641.11 mg·L^-1，LC₂₀、LC₁₀和LC₅分别为317.78、223.33及146.67 mg·L^-1。形态学观察，≥200 mg·L^-1组斑马鱼胚胎可见卵黄囊吸收延迟、心包水肿、下颌畸形及体长缩短等异常表现。与对照组比较，LC₁₀和LC₂₀组斑马鱼胚胎心率明显降低（P<0.01），SV-BA距离和心包面积明显增加（P<0.01），提示斑马鱼胚胎心脏结构发育和功能状态受到影响。油红O染色，LC₅、LC₁₀和LC₂₀组斑马鱼胚胎均可见肝脏区域脂质沉积增加，肝脏脂质沉积水平值较对照组均明显升高（P<0.01），其中LC₂₀组胚胎肝脏脂质沉积程度最高。 结论 北细辛水提物对斑马鱼胚胎具有浓度依赖性的发育毒性，并可在低于LC₅₀的水平下诱发心脏结构和功能异常及肝脏中性脂质沉积增加，提示心脏和肝脏可能是其敏感靶器官。

目的 基于网络药理学、分子对接分析和体外细胞实验探讨人参-紫草提取液对人瘢痕疙瘩（KD）成纤维细胞（HKF）增殖及侵袭的抑制作用，并阐明其机制。 方法 采用中药系统药理学（TCMSP）数据库、中医药综合数据库（TCMID）、Swiss Target Prediction数据库和UniProt数据库获得人参-紫草的活性成分及相关靶基因。采用GeneCards数据库和在线人类孟德尔遗传（OMIM）数据库筛选KD相关靶点。采用STRING在线平台和Cytoscape 3.10.3软件获得蛋白-蛋白相互作用（PPI）网络并获取核心靶点。采用Metascape数据库对上述核心靶点进行基因本体论（GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析。采用CB-Dock2网站进行分子对接分析及结果可视化。将HKF细胞分为空白组（100 \mathrm{\mu }\mathrm{L}完全培养基）、对照组（100 \mathrm{\mu }\mathrm{L}含等体积溶媒的完全培养基）和低、中及高剂量人参-紫草提取液组（100 \mathrm{\mu }\mathrm{L}含终浓度为10、20和40 mg·L^-1人参-紫草提取液的完全培养基）。采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测各组HKF细胞存活率，流式细胞术检测各组细胞周期百分比，Transwell小室实验检测各组侵袭细胞数，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组细胞中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1（AKT1）、白细胞介素1β（IL-1β）和前列腺素内过氧化物合酶2（PTGS2）mRNA表达水平。 结果 共筛选出人参-紫草活性成分27种，药物-KD疾病交集靶点31个；其中核心靶点9个，包括AKT1、IL-1β和PTGS2等。GO功能富集分析，核心靶点主要涉及细胞增殖、凋亡及氧化应激反应等生物过程；KEGG信号通路富集分析，核心靶点主要涉及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路、Janus激酶/信号转导及转录激活因子（JAK/STAT）信号通路和癌症相关信号通路等。PTGS2与5种活性成分的结合能均低于-7 kcal·mol^-1。与对照组比较，低、中和高剂量人参-紫草提取液组HKF细胞存活率明显降低（P<0.05），G₀/G₁期HKF细胞百分率明显升高（P<0.05），侵袭细胞数明显减少（P<0.05）。与对照组比较，低、中和高剂量人参-紫草提取液组HKF细胞中AKT1及IL-1β mRNA表达水平均明显降低（P<0.05），PTGS2 mRNA表达水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）。 结论 人参-紫草提取液可抑制HKF细胞增殖和侵袭，诱导细胞周期阻滞，其作用机制可能与调控核心靶点AKT1、IL-1β和PTGS2及介导PI3K-Akt、MAPK和JAK/STAT等信号通路有关。

目的 探讨人参皂苷Rg3（G-Rg3）对高糖诱导人肾小管上皮细胞HK2损伤的改善作用，并阐明相关作用机制。 方法 采用高糖（HG）培养基（含25 mmol·L^-1葡萄糖）诱导的人肾小管上皮细胞HK2损伤模型，将细胞分为阴性对照（NC）组（含5.5 mmol·L^-1葡萄糖培养基）、HG组（HG培养基）、核因子E2相关因子2（Nrf2）抑制剂ML385组（ML385组）（HG培养基+5 μmol·L^-1 ML385）、G-Rg3干预组（Rg3组）（HG培养基+40 μmol·L^-1 G-Rg3）和ML385+Rg3组（HG培养基+5 μmol·L^-1 ML385+40 μmol·L^-1 G-Rg3）。采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测各组HK2细胞活性，2'，7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光法检测各组HK2细胞中活性氧（ROS）水平，试剂盒法检测各组HK2细胞中超氧化物歧化酶（SOD）和乳酸脱氢酶（LDH）活性以及丙二醛（MDA）和二价铁离子（Fe2?）水平，Western blotting法检测各组细胞中Nrf2、血红素加氧酶1（HO-1）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）和长链酯酰辅酶A合成酶4（ACSL4）蛋白表达水平。 结果 CCK-8法、DCFH-DA荧光法和试剂盒法，培养48 h时，与NC组比较，HG组HK2细胞活性明显降低（P<0.01），细胞中ROS水平、LDH活性以及MDA和Fe2?水平均明显升高（P<0.01），SOD活性明显降低（P<0.01）；与HG组比较，ML385组HK2细胞中ROS水平、LDH活性以及MDA和Fe2?水平均明显升高（P<0.05），SOD活性明显降低（P<0.05）；Rg3组HK2细胞活性明显升高（P<0.01），细胞中ROS水平、LDH活性以及MDA和Fe2?水平均明显降低（P<0.01），SOD活性明显升高（P<0.01）；与Rg3组比较，ML385+Rg3组HK2细胞活性明显降低（P<0.01），细胞中ROS水平、LDH活性以及MDA和Fe2?水平均明显升高（P<0.01），SOD活性明显降低（P<0.01）。Western blotting法，与NC组比较，HG组HK2细胞中Nrf2、HO-1和GPX4蛋白表达水平明显降低（P<0.01），ACSL4蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。与HG组比较，ML385组HK2细胞中GPX4蛋白表达水平明显降低（P<0.01），ACSL4蛋白表达水平明显升高（P<0.01）；Rg3组HK2细胞中Nrf2、HO-1和GPX4蛋白表达水平明显升高（P<0.01），ACSL4蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与Rg3组比较，ML385+Rg3组细胞中Nrf2、HO-1和GPX4蛋白表达水平明显降低（P<0.01），ACSL4蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。 结论 G-Rg3对HG诱导的人肾小管上皮细胞HK2氧化损伤具有改善作用，其机制可能与上调Nrf2表达、激活Nrf2/HO-1/GPX4信号通路和抑制铁死亡有关。

目的 探讨泌石通胶囊对诱石液诱导的肾结石小鼠的治疗作用，并阐明其作用机制。 方法 选取50只SPF级雄性ICR小鼠，随机选择其中40只采用诱石液（0.75%乙二醇+0.75%氯化铵）3 mL·d^-1灌胃2周建立肾结石小鼠模型，剩余10只作为对照组。造模成功后，将40只模型小鼠随机分为模型组、低剂量泌石通胶囊组、高剂量泌石通胶囊组和阳性药物组，每组10只。造模1周后，低和高剂量泌石通胶囊组小鼠分别灌胃225及450 mg·kg^-1泌石通胶囊混悬液，阳性药物组小鼠灌胃5 g·kg^-1排石颗粒混悬液，对照组和模型组小鼠灌胃等体积生理盐水，连续给药2周，其间每周检测小鼠体质量。给药结束后，处死各组小鼠，分离肾组织并采集小鼠血清和粪便。采用试剂盒检测各组小鼠肾组织中还原型谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）水平及超氧化物歧化酶（SOD）活性以及血清中尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、钙（Ca）、磷（P）和镁（Mg）水平，Western blotting法检测各组小鼠肾组织中核因子E2相关因子2（Nrf2）、自噬相关蛋白5（ATG5）、P62和血红素氧合酶-1（HO-1）蛋白表达水平，16S核糖体RNA（rRNA）测序分析各组小鼠肠道菌群多样性。 结果 与对照组比较，模型组小鼠造模初期体质量略降低，伴精神萎靡、毛发蓬松。与模型组比较，低和高剂量泌石通胶囊组小鼠体质量下降趋势减缓，精神状态改善。试剂盒检测，与模型组比较，低和高剂量泌石通胶囊组及阳性药物组小鼠肾组织中GSH水平和SOD活性均明显升高（P<0.05），MDA水平均明显降低（P<0.05）。与模型组比较，低和高剂量泌石通胶囊组小鼠血清中BUN及Ca水平均明显降低（P<0.05或P<0.01），Mg水平均明显升高（P<0.05）；高剂量泌石通胶囊组小鼠血清中Cr和P水平均明显升高（P<0.05）；阳性药物组小鼠血清中BUN、Cr、Ca和P水平均明显降低（P<0.05或P<0.01），Mg水平明显升高（P<0.05）。Western blotting法，与模型组比较，低和高剂量泌石通胶囊组及阳性药物组小鼠肾组织中HO-1、Nrf2和ATG5蛋白表达水平均明显升高（P<0.05），P62蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。16S rRNA测序，与模型组比较，高剂量泌石通胶囊组和阳性药物组小鼠肠道菌群Chao1指数及Pielou’s均匀度指数均明显升高（P<0.05）。门水平上，与模型组比较，低和高剂量泌石通胶囊组小鼠肠道菌群中拟杆菌门（Bacteroidetes）相对丰度降低，厚壁菌门（Firmicutes）和变形菌门（Proteobacteria）相对丰度升高；属水平上，与模型组比较，高剂量泌石通胶囊组小鼠肠道菌群中普雷沃氏菌属（Prevotella）相对丰度升高，拟杆菌属（Bacteroides）相对丰度降低，并新增优势菌属螺杆菌属（Helicobacter）。 结论 泌石通胶囊可改善诱石液诱导的肾结石小鼠的病理生理损伤，其机制可能与降低血清中BUN和Cr水平，调节血清中Ca、P和Mg水平，减轻氧化应激损伤，调控Nrf2/ATG5/P62信号通路相关蛋白表达，以及改善肠道菌群结构有关。

目的 探讨三七总皂苷（PNS）通过调节有氧糖酵解对大鼠缺血性脑卒中神经损伤的改善作用，并阐明其作用机制。 方法 将48只大鼠随机分为假手术组、模型组、PNS组（40 mg·kg^-1）和PNS+磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）抑制剂LY294002组（5 mg·kg^-1）（PNS+LY294002组），每组12只。除假手术组外，其余组大鼠采用大脑中动脉闭塞/再灌注（MCAO/R）法建立大鼠缺血性脑卒中模型。采用Longa评分法评估各组大鼠神经功能缺损情况，氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法检测各组大鼠脑梗死面积百分比，HE染色和尼氏（Nissl）染色观察各组大鼠脑组织病理及神经元形态表现，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组大鼠脑组织中乳酸脱氢酶A（LDHA）、白细胞介素（IL）-1β和IL-18水平，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组大鼠脑组织中己糖激酶（HK）1、HK2、磷酸果糖激酶（PFK）1、PFK2和M2型丙酮酸激酶同工酶（PKM2）mRNA表达水平，免疫荧光染色法检测各组大鼠脑组织细胞中活性氧（ROS）水平和离子化钙结合衔接分子1（Iba1）阳性小胶质细胞周长/面积比（P/A），末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口末端标记（TUNEL）法检测各组大鼠脑组织神经元凋亡率，免疫组织化学染色法和Western blotting法检测各组大鼠脑组织中PI3K/蛋白激酶B（Akt）信号通路相关蛋白表达情况及磷酸化PI3K（p-PI3K）/PI3K和磷酸化Akt（p-Akt）/Akt比值。 结果 与假手术组比较，模型组大鼠神经功能缺损评分明显升高（P<0.05），脑梗死面积百分比明显升高（P<0.05），脑组织病理损伤严重。与模型组比较，PNS组和PNS+LY294002组大鼠神经功能缺损评分均明显降低（P<0.05），脑梗死面积百分比均明显降低（P<0.05），脑组织病理损伤减轻；与PNS组比较，PNS+LY294002组大鼠神经功能缺损评分明显升高（P<0.05），脑梗死面积百分比明显升高（P<0.05），脑组织病理损伤加重。ELISA法，与假手术组比较，模型组大鼠脑组织中LDHA、IL-1β和IL-18水平均明显升高（P<0.05）；与模型组比较，PNS组和PNS+LY294002组大鼠脑组织中LDHA、IL-1β及IL-18水平均明显降低（P<0.05）；与PNS组比较，PNS+LY294002组大鼠脑组织中LDHA、IL-1β和IL-18水平均明显升高（P<0.05）。RT-qPCR法，与假手术组比较，模型组大鼠脑组织中HK1、HK2、PFK1、PFK2和PKM2 mRNA表达水平均明显降低（P<0.05）；与模型组比较，PNS组和PNS+LY294002组大鼠脑组织中HK1、HK2、PFK1、PFK2及PKM2 mRNA表达水平均明显升高（P<0.05）；与PNS组比较，PNS+LY294002组大鼠脑组织中HK1、HK2、PFK1、PFK2和PKM2 mRNA表达水平均明显降低（P<0.05）。免疫荧光染色法，与假手术组比较，模型组大鼠脑组织细胞中ROS水平明显升高（P<0.05），Iba1阳性小胶质细胞P/A比值明显降低（P<0.05）；与模型组比较，PNS组和PNS+LY294002组大鼠脑组织细胞中ROS水平均明显降低（P<0.05），Iba1阳性小胶质细胞P/A比值均明显升高（P<0.05）；与PNS组比较，PNS+LY294002组大鼠脑组织细胞中ROS水平明显升高（P<0.05），Iba1阳性小胶质细胞P/A比值明显降低（P<0.05）。TUNEL法，与假手术组比较，模型组大鼠脑组织中神经元凋亡率明显升高（P<0.05）；与模型组比较，PNS组和PNS+LY294002组大鼠脑组织中神经元凋亡率均明显降低（P<0.05）；与PNS组比较，PNS+LY294002组大鼠脑组织中神经元凋亡率明显升高（P<0.05）。与假手术组比较，模型组大鼠脑组织中p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值均明显降低（P<0.05）；与模型组比较，PNS组和PNS+LY294002组大鼠脑组织中p-PI3K/PI3K及p-Akt/Akt比值均明显升高（P<0.05）；与PNS组比较，PNS+LY294002组大鼠脑组织中p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值均明显降低（P<0.05）。 结论 PNS可有效改善MCAO/R大鼠神经功能缺损，降低脑组织中ROS水平，其作用机制可能与激活PI3K/Akt信号通路、提高糖酵解能力，从而促进小胶质细胞的代谢重编程有关。

目的 探讨颈康胶囊有效成分对大鼠脑缺血损伤的保护作用，并阐明其可能的作用机制。 方法 选取70只SD大鼠，随机分为假手术组、模型组和低剂量颈康胶囊组（252 mg·kg^-1）、中剂量颈康胶囊组（630 mg·kg^-1）及高剂量颈康胶囊组（1 260 mg·kg^-1），药物用生理盐水配制，各组大鼠每日灌胃给药1次，持续预防给药14 d，假手术组和模型组大鼠给予等体积生理盐水。14 d后假手术组大鼠仅分离血管，不作其他处理，其余组大鼠以线栓法构建脑缺血模型。采用Longa评分法评估各组大鼠神经功能损伤情况，氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法检测各组大鼠脑梗死面积，HE染色和尼氏染色观察各组大鼠脑组织病理形态表现。构建“药物-成分-作用靶点”网络，结合生物信息学筛选颈康胶囊的作用靶点。采用Western blotting法检测各组大鼠皮层组织中蛋白激酶B（Akt）和凋亡相关蛋白表达水平。 结果 Longa评分法，与假手术组比较，模型组大鼠出现明显的神经功能缺损，神经功能缺损评分明显升高（P<0.001）；与模型组比较，中和高剂量颈康胶囊组大鼠神经功能缺损评分均明显降低（P<0.05或P<0.01）。TTC染色，与假手术组比较，模型组大鼠脑组织中可见明显梗死区域，脑梗死面积百分比明显升高（P<0.001）；与模型组比较，中和高剂量颈康胶囊组大鼠脑梗死面积百分比均明显降低（P<0.05或P<0.01）。HE染色和尼氏染色，与假手术组比较，模型组大鼠缺血侧脑组织结构疏松，可见神经元核固缩，神经元中尼氏小体数量明显减少（P<0.001）；与模型组比较，中剂量颈康胶囊组大鼠神经元变形减少、排列整齐、结构较完整，神经元中尼氏小体数量明显增加（P<0.01）。利用药物-成分-交集靶点数据构建了“药物-成分-作用靶点”网络，利用cytoHubba插件筛选了排名前10的靶点作为核心靶点。基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析，药物-疾病交集靶点主要富集通路大部分与凋亡和炎症等信号通路有关联。Western blotting法，与假手术组比较，模型组大鼠脑组织中磷酸化Akt（p-Akt）/Akt比值明显降低（P<0.01），B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）蛋白表达水平明显降低（P<0.01），Bcl-2相关X蛋白（Bax）和裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶3（Cleaved Caspase-3）蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）；与模型组比较，中和高剂量颈康胶囊组大鼠脑组织中p-Akt/Akt比值明显升高（P<0.01或P<0.001），Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01），Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）。 结论 颈康胶囊对脑缺血大鼠脑组织具有保护作用，且其保护作用可能与Akt和凋亡相关蛋白表达有关。

目的 探讨人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）来源外泌体（Exo）对大鼠脑出血（ICH）后神经损伤的保护作用，并阐明自噬在该过程中的调控机制。 方法 将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、ICH组和ICH+Exo组，每组10只。ICH组和ICH+Exo组大鼠采用胶原酶注射法建立大鼠ICH模型，假手术组大鼠仅钻孔并注射等量生理盐水；造模后24 h，ICH+Exo组大鼠于脑组织注射20 μg hBMSCs-Exo，ICH组大鼠仅注射磷酸盐缓冲液（PBS）。于术后第1、3、7、14和21天评估各组大鼠改良神经功能缺损评分（mNSS）。于术后第7天，采用尼氏染色检测各组大鼠脑组织中尼氏阳性神经元数量，末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口末端标记（TUNEL）染色法检测各组大鼠脑组织中TUNEL阳性细胞百分率，免疫荧光染色法观察各组大鼠脑组织中神经元核蛋白（NeuN）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和离子钙接头蛋白1（Iba1）表达情况，免疫组织化学法检测各组大鼠脑组织中自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3（LC3）、Beclin-1、P62和自噬相关蛋白7（ATG7）表达情况。体外以1-甲基-4-苯基吡啶离子（MPP?）诱导SH-SY5Y细胞氧化应激，设置对照组、MPP?组、MPP?+Exo组和MPP?+Exo+3-甲基腺嘌呤（3-MA）组。采用噻唑蓝（MTT）法检测各组细胞活性，吖啶橙（AO）染色法评估各组细胞自噬水平。 结果 mNSS评分，与假手术组比较，ICH组大鼠各时间点mNSS评分均明显升高（P<0.05）；与ICH组比较，ICH+Exo组大鼠各时间点mNSS评分均明显降低（P<0.05）。尼氏染色，与假手术组比较，ICH组大鼠脑组织中尼氏阳性神经元数量明显减少（P<0.001）；与ICH组比较，ICH+Exo组大鼠脑组织中尼氏阳性神经元数量明显增加（P<0.01）。TUNEL染色，与假手术组比较，ICH组大鼠脑组织中TUNEL阳性细胞百分率明显升高（P<0.05）；与ICH组比较，ICH+Exo组大鼠脑组织中TUNEL阳性细胞百分率明显降低（P<0.05）。免疫荧光染色，与假手术组比较，ICH组大鼠脑组织中NeuN阳性细胞数量明显减少（P<0.05），脑组织中GFAP和Iba1阳性面积百分率差异无统计学意义（P>0.05）；与ICH组比较，ICH+Exo组大鼠脑组织中NeuN阳性细胞数量明显升高（P<0.05）。免疫组织化学法，与假手术组比较，ICH组大鼠脑组织中LC3、Beclin-1、P62和ATG7蛋白阳性面积百分率均明显升高（P<0.05）；与ICH组比较，ICH+Exo组大鼠脑组织中P62蛋白阳性面积百分率明显降低（P<0.05），LC3和ATG7蛋白阳性面积百分率明显升高（P<0.05或P<0.01）。体外实验MTT法，与MPP?组比较，MPP?+Exo组SH-SY5Y细胞活性明显升高（P<0.05）；与MPP?+Exo组比较，MPP?+Exo+3-MA组SH-SY5Y细胞活性明显降低（P<0.05）。AO染色法，与MPP?组比较，MPP?+Exo组SH-SY5Y细胞自噬水平明显升高（P<0.05）；与MPP?+Exo组比较，MPP?+Exo+3-MA组SH-SY5Y细胞自噬水平明显降低（P<0.05）。 结论 hBMSCs-Exo可减轻大鼠ICH后神经损伤并改善其神经功能，其作用与促进自噬通量和抑制神经元凋亡等机制有关，自噬调控可能是其发挥神经保护效应的关键环节。

目的 探讨根皮素对野百合碱（MCT）诱导的肺动脉高压（PAH）大鼠肺血管重构的改善作用及其对肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖和迁移的影响，为PAH的靶向治疗提供依据。 方法 体内实验，将20只雄性SD大鼠随机分为对照组、MCT组（60 mg·kg^-1）、低剂量根皮素组（10 mg·kg^-1）和高剂量根皮素组（20 mg·kg^-1），每组5只。采用超声心动图检测各组大鼠肺动脉加速时间（PAT）和平均肺动脉压（mPAP），HE染色检测各组大鼠肺动脉血管壁厚度百分比（WT%）和血管壁面积百分比（WA%），免疫荧光染色法检测各组大鼠肺组织中增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平，Western blotting法检测各组大鼠肺组织中骨桥蛋白（OPN）表达水平。体外实验，采用酶消化法提取大鼠原代PASMCs，将细胞分为对照组、表皮生长因子（EGF）组（20 ng·L^-1）、EGF+10 μmol·L^-1根皮素组和EGF+20 μmol·L^-1根皮素组。采用细胞计数试剂盒8（CCK?8）法检测各组细胞活性，细胞划痕愈合实验和Transwell小室实验检测各组PASMCs划痕愈合率和迁移细胞数，Western blotting法检测各组PASMCs中PCNA蛋白表达水平。 结果 体内实验，与对照组比较，MCT组大鼠PAT明显缩短（P<0.05），mPAP明显升高（P<0.05），肺动脉WT%和WA%均明显升高（P<0.05或P<0.01），肺组织中PCNA蛋白表达水平明显升高（P<0.05），OPN蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与MCT组比较，低和高剂量根皮素组大鼠PAT明显延长（P<0.05或P<0.01），mPAP明显降低（P<0.05或P<0.01），肺动脉WT%和WA%均明显降低（P<0.05或P<0.01），肺组织中PCNA蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；高剂量根皮素组大鼠肺组织中OPN蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。体外实验，与EGF组比较，EGF+10 μmol·L^-1根皮素组PASMCs细胞活性明显降低（P<0.05），迁移细胞数明显减少（P<0.05），PCNA蛋白表达水平明显降低（P<0.05），细胞划痕愈合率差异无统计学意义（P>0.05）；EGF+20 μmol·L^-1根皮素组PASMCs细胞活性明显降低（P<0.05），细胞划痕愈合率明显降低（P<0.01），迁移细胞数明显减少（P<0.01），细胞中PCNA蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。 结论 根皮素不仅能有效改善MCT诱导的PAH大鼠肺血管重构，还可抑制EGF诱导的PASMCs增殖和迁移，提示根皮素有望成为治疗PAH的潜在候选药物。

目的 探讨奥马珠单抗通过调控无翅型MMTV整合位点家族蛋白（Wnt）/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路对哮喘小鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖和迁移的影响。 方法 将12只小鼠随机分为正常组和模型组，每组6只，采用卵清蛋白和氢氧化铝混合液致敏及激发的方式构建哮喘小鼠模型。取2组小鼠支气管组织，分离原代ASMCs，采用免疫荧光染色法鉴定ASMCs中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）阳性表达。ASMCs分为对照组、哮喘组、奥马珠单抗组、iCRT3（Wnt/β-catenin信号通路抑制剂）组和奥马珠单抗+SKL2001（Wnt/β-catenin信号通路激活剂）组。对照组ASMCs为正常组小鼠支气管组织分离的ASMCs；其他组ASMCs均为模型组小鼠支气管组织分离的ASMCs，并进行相应处理。采用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷（EdU）染色法和细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测各组ASMCs中EdU阳性细胞百分比及增殖活性，细胞划痕实验法检测各组ASMCs细胞划痕愈合率，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组ASMCs上清液中白细胞介素（IL）-6、IL-17、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、IL-33和IL-13水平，Western blotting法检测各组ASMCs中增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、Wnt 3a和β-catenin蛋白表达水平。 结果 在正常组和模型组小鼠支气管组织中分离的细胞中，98%以上的细胞呈α-SMA阳性，表明成功分离ASMCs。与对照组比较，哮喘组ASMCs中EdU阳性细胞百分比，细胞增殖活性，划痕愈合率，上清液中IL-6、IL-17、TNF-α、IL-33和IL-13水平以及细胞中PCNA、MMP-9、Wnt 3a和β-catenin蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）。与哮喘组比较，奥马珠单抗组和iCRT3组ASMCs中EdU阳性细胞百分比，细胞增殖活性，划痕愈合率，上清液中IL-6、IL-17、TNF-α、IL-33及IL-13水平以及细胞中PCNA、MMP-9、Wnt 3a和β-catenin蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）；与奥马珠单抗组比较，奥马珠单抗+SKL2001组ASMCs中上述指标均明显升高（P<0.05）。 结论 奥马珠单抗可抑制哮喘小鼠ASMCs增殖、迁移和炎症反应，其作用机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

目的 探讨橙酮对成骨细胞分化的影响和对大鼠糖皮质激素性骨质疏松症（GIOP）的改善作用，并阐明其作用机制。 方法 体外实验选取成骨细胞MC3T3-E1，采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测不同浓度地塞米松（Dex）和橙酮处理后各组细胞活性，确定Dex和橙酮的最佳处理浓度。采用1 μmol·L^-1 Dex诱导成骨细胞MC3T3-E1，建立细胞损伤模型。将细胞分为对照组、Dex组、Dex+橙酮组、Dex+GNF351组和Dex+橙酮+GNF351组。采用试剂盒检测各组细胞中丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）活性，2'，7'-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光法检测各组细胞中活性氧（ROS）水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β和IL-6水平，碱性磷酸酶（ALP）试剂盒检测各组细胞ALP活性，Western blotting法检测各组细胞中Runt相关转录因子2（RUNX-2）、骨钙素（OCN）、Ⅰ型胶原α1链（COL1A1）、骨桥蛋白（OPN）、芳香烃受体（AHR）、核因子红细胞系2相关因子2（NRF2）和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（磷酸）：醌氧化还原酶1（NQO1）蛋白表达水平。体内实验选取20只雌性大鼠随机分为假手术组、GIOP组、GIOP+低剂量橙酮（7 mg·kg^-1）组和GIOP+高剂量橙酮（14 mg·kg?1）组，每组5只，除假手术组外各组大鼠采用1 mg·kg^-1 Dex灌胃构建GIOP模型。各组大鼠于造模后2 h起给予药物灌胃处理，连续干预7周后采血并处死，收集股骨组织。采用HE染色法观察各组大鼠股骨组织病理形态表现，组织形态计量学检测各组大鼠股骨组织骨密度（BMD）和骨小梁体积分数（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁数目（Tb.N）及骨小梁分离度（Tb.Sp），Western blotting法检测各组大鼠股骨组织中AHR、NRF2和NQO1蛋白表达水平。 结果 与0 μmol·L?1 Dex比较，1 μmol·L?1 Dex组MC3T3-E1细胞活性明显降低（P<0.01），确定后续采用1 μmol·L?1 Dex处理细胞。与Dex组比较，Dex+5 μmol·L?1橙酮组MC3T3-E1细胞活性明显升高（P<0.01），后续采用5 μmol·L?1橙酮处理细胞。与对照组比较，Dex组MC3T3-E1细胞活性明显降低（P<0.01），细胞中MDA和ROS水平及上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6水平均明显升高（P<0.01），SOD活性明显降低（P<0.01），细胞ALP活性明显降低（P<0.01），细胞中RUNX-2、OCN、COL1A1和OPN蛋白表达水平均明显降低（P<0.01），细胞核中AHR和NRF2蛋白表达水平及细胞中NQO1蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）。与Dex组比较，Dex+橙酮组MC3T3-E1细胞活性明显升高（P<0.01），细胞中MDA和ROS水平及上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6水平均明显降低（P<0.01），SOD活性明显升高（P<0.01），细胞ALP活性明显升高（P<0.01），细胞中RUNX-2、OCN、COL1A1和OPN蛋白表达水平均明显升高（P<0.01），细胞核中AHR和NRF2蛋白及细胞中NQO1蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）。与Dex+橙酮组比较，Dex+橙酮+GNF351组细胞ALP活性明显降低（P<0.01），细胞核中AHR和NRF2蛋白表达水平以及细胞中NQO1、RUNX-2和OCN蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）。体内实验，与假手术组比较，GIOP组大鼠股骨组织骨小梁变薄、数量减少且面积缩小，大鼠股骨组织中BMD、BV/TV、Tb.Th和Tb.N均明显降低（P<0.01），Tb.Sp明显升高（P<0.01），大鼠股骨组织中AHR、NRF2和NQO1蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）。与GIOP组比较，GIOP+低剂量橙酮组和GIOP+高剂量橙酮组大鼠股骨组织病理损伤均改善，股骨组织中BMD、BV/TV、Tb.N和Tb.Th均明显升高（P<0.05），Tb.Sp明显降低（P<0.05），股骨组织中AHR、NRF2和NQO1蛋白表达水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）。 结论 橙酮可促进大鼠成骨细胞分化，缓解大鼠GIOP，其作用机制可能与促进AHR核易位和激活AHR/NRF2/NQO1信号通路有关。

目的 系统评价中药外敷治疗恶性胸腔积液（MPE）的临床有效性和安全性，为临床应用提供循证医学依据。 方法 检索中国知网、维普、万方数据、中国生物医学文献数据库、PubMed、Embase、Cochrane Library和Web of Science数据库，收集建库至2026年3月18日发表的中药外敷治疗MPE的随机对照试验（RCT）研究的文献。依据不同干预措施将患者分为试验组（采用中药外敷单独治疗或在西医常规治疗基础上联合中药外敷辅助治疗）和对照组（采用单纯西医常规治疗或安慰剂外敷）。采用RevMan 5.4和R 4.3.3软件实施Meta分析，结局指标包括患者胸腔积液缓解率、卡氏功能状态（KPS）评分、KPS评分改善率和不良反应发生率。该系统评价已在PROSPERO平台完成前瞻性注册（注册号：CRD420251178277）。 结果 共纳入25项RCT，总计1 616例患者。Meta分析，与对照组比较，试验组患者胸腔积液缓解率明显升高［相对危险度（RR）=1.30，95%置信区间（CI）：1.22~1.40，P<0.000 1］，KPS评分明显升高［均数差（MD）=9.28，95%CI：6.79~12.76，P<0.000 1］，且KPS评分改善率明显升高（RR=1.42，95% CI：1.15~1.74，P=0.000 9）。安全性评价，与对照组比较，试验组患者胃肠道反应（RR=0.65，95%CI：0.51~0.82，P=0.000 3）、白细胞减少（RR=0.56，95%CI：0.33~0.93，P=0.03）和胸痛（RR=0.80，95%CI：0.67~0.97，P=0.02）发生率均明显降低，患者局部皮肤反应发生率明显升高（RR=8.38，95%CI：2.58~27.15，P=0.000 4）。 结论 中药外敷作为辅助治疗在改善MPE患者胸腔积液缓解率及功能状态方面具有潜在价值，但需关注皮肤不良反应。

目的 采用中国胶质瘤基因组图谱（CGGA）数据库建立复发性胶质母细胞瘤（GBM）患者差异表达基因（DEGs）和差异表达长链非编码RNAs（DELs）的预后模型，分析DEGs和DELs与患者预后之间的关系，并通过实验进行验证。 方法 从CGGA数据库中下载GBM患者转录组数据和相应的临床数据，包括203例原发GBM患者（原发GBM组）和103例复发GBM患者（复发GBM组）。采用Perl语言编写的合并脚本将每个样本的表达信息合并成矩阵，Ensembl数据库对该表达矩阵进行注释，R语言edgeR和DESeq2软件包筛除低表达转录本并完成数据提取及标准化。比较原发GBM组与复发GBM组患者之间的转录本表达差异，计算差异倍数（FC），以|log₁₀FC|>0.5且P<0.05为标准筛选DEGs和DELs。采用单因素Cox比例风险回归模型分析DEGs和DELs与GBM患者预后的关系，选择与患者预后相关的DEGs和DELs，构建多因素Cox比例风险回归模型，计算患者风险评分。基于风险评分中位数将患者分为低风险组和高风险组，采用Kaplan-Meier生存分析和受试者工作特征（ROC）曲线评估风险评分的预后预测效能，并分析比较不同临床病理特征患者的风险评分差异。采用Lasso回归分析预后相关DEGs和DELs对患者生存情况的预测效能，构建列线图。选取6例原发GBM患者和6例复发GBM患者的肿瘤组织样本分别作为原发组及复发组，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法和荧光原位杂交（FISH）法检测2组患者肿瘤组织中RP11-283I3.2表达水平及阳性细胞数。 结果 原发GBM组与复发GBM组患者转录组数据比较，共筛选出151个DEGs和DELs，其中12个下调，139个上调。单因素Cox回归分析鉴定出4个与GBM患者预后相关的DEGs，分别为CHRNA1、HIST1H4I、SLC18A3和TMEM61，以及8个与患者预后相关的DELs，分别为AC002454.1、AC006262.6、AC123886.2、CDKN2B-AS1、FAM225B、HAR1A、LBX1-AS1和RP11-283I3.2。Kaplan-Meier生存分析，高风险组GBM患者的OS明显低于低风险组（P<0.001）。时间依赖性ROC曲线，风险评分预测GBM患者1、3和5年生存概率的曲线下面积（AUC）分别为0.675、0.750及0.772。异柠檬酸脱氢酶（IDH）野生型GBM患者风险评分明显高于IDH突变型患者（P<0.001）。Lasso回归分析，RP11-283I3.2在预后相关DEGs和DELs中得分最高；基于表达谱将患者分为Cluster 1组和Cluster 2组，与Cluster 1组比较，Cluster 2组患者OS更低（P<0.01）。RT-qPCR法和FISH法，与原发组比较，复发组患者肿瘤组织中RP11-283I3.2表达水平和阳性细胞数均明显升高（P<0.001）。 结论 本研究共鉴定出12个与GBM患者预后相关的DEGs和DELs，并构建了具有较好预测效能的预后模型。RP11-283I3.2在复发GBM患者组织中呈高表达，提示其可能成为GBM复发的潜在分子标志物。

目的 探讨高电压长时程脉冲射频（HL-PRF）治疗对颈源性头痛（CEH）患者认知功能的影响，评估该治疗方式在改善CEH患者认知功能方面的潜在临床价值。 方法 选取23例CEH患者作为研究对象，给予患侧C2背根神经节HL-PRF治疗。分别于治疗前和治疗后3个月，采用北京版蒙特利尔认知评估量表（MoCA-BJ）评估患者整体认知功能，听觉词语学习测验-华山版（AVLT-H）各子项评分（N1、N2、N3、N4、N5和N6）评估患者情景记忆能力，数字广度测试（DST）评估患者注意力与工作记忆能力，疼痛数字评分（NRS）评估患者疼痛程度，头晕视觉模拟评分（VAS）评估患者头晕程度。采用彩色多普勒超声检测患者治疗前、治疗后即刻、治疗后1周、治疗后1个月和治疗后3个月患侧C1段椎动脉的血流参数，包括平均流速（Vm）、收缩期峰值流速（PSV）、最低流速（Vmin）、阻力指数（RI）和搏动指数（PI）。采用Pearson相关系数和（或）Spearman相关系数分析评估患者疼痛和头晕评分与各项认知测试评分的相关性。 结果 与治疗前比较，患者治疗后3个月MoCA-BJ评分和DST评分差异无统计学意义（P>0.05），AVLT-H各项评分均明显升高（P<0.05）。与治疗前比较，患者治疗后3个月NRS评分明显降低（P<0.001），头晕VAS评分差异无统计学意义（P>0.05）。与治疗前比较，患者治疗后即刻患侧C1段椎动脉Vm、PSV和Vmin均明显升高（P<0.05或P<0.001），PI和RI差异无统计学意义（P>0.05）；患者治疗后1周、1个月和3个月上述血流参数与治疗前比较差异均无统计学意义（P>0.05）。相关性分析，患者头晕VAS评分变化值与AVLT-H子项N3评分变化值呈负相关关系（r=-0.466，P<0.05）。 结论 HL-PRF可有效缓解CEH患者的疼痛症状，并改善特定认知领域（如情景记忆）的表现，同时可引起治疗后早期椎动脉血流动力学的一过性改善。患者头晕症状的缓解与部分记忆功能指标的改善存在一定相关性。

目的 利用16S 核糖体DNA（rDNA）扩增子测序技术系统分析抗菌光动力疗法（aPDT）对感染根管菌群的影响，评估其作为根管消毒辅助手段的临床应用效果。 方法 临床纳入15例慢性牙髓炎（CP）患者为CP组，15例慢性根尖周炎（CAP）患者为CAP组，分别采集2组患者开髓后（Pre组）、常规根管预备与消毒后（Post组）、aPDT干预后（PDT组）和氢氧化钙法（CHM）封药后（CHM组）4个关键阶段的根管菌群样本。对通过质量检测与文库构建的合格样本进行16S rDNA扩增子测序，分析样本中根管菌群的Alpha多样性指数（Chao1指数、Shannon指数和Simpson指数）、Beta多样性指数和群落组成差异。 结果 CP组患者样本中，PDT组测序失败率明显高于Post组（P<0.05）；后续分析共纳入6例样本。CP组患者4组样本的Alpha多样性指数均呈降低趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）；Post组和PDT组Beta多样性指数比较差异无统计学意义（P>0.05）；与其他3组比较，CHM组样本中厚壁菌门（Firmicutes）、加氏乳杆菌（Lactobacillus gasseri）和未培养的乳杆菌（uncultured Lactobacillus）相对丰度均明显升高（P<0.05）。CAP组患者样本中，PDT组与Post组测序失败率比较差异无统计学意义（P>0.05）；后续分析共纳入12例样本。CAP组患者4组样本的Chao1指数有降低趋势，但Alpha多样性指数比较差异均无统计学意义（P>0.05）；Post组和PDT组Beta多样性指数比较差异有统计学意义（P<0.05）；与Post组比较，PDT组样本中放线菌门（Actinobacteria）、链球菌属（Streptococcus）、放线菌属（Actinomyces）和牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis）相对丰度明显降低（P<0.05）；与其他3组比较，CHM组样本中卟啉单胞菌属（Porphyromonas）和Porphyromonas gingivalis相对丰度明显升高（P<0.05）。 结论 aPDT辅助根管消毒有明显的抗菌增效作用，其效果存在疾病类型特异性。CP患者中，aPDT可进一步提升灭菌效果，并呈现降低根管菌群丰富度和均匀度的趋势；CAP患者中，aPDT除呈现降低根管菌群丰富度的趋势外，还可改变根管菌群群落组成。aPDT对菌群变化的影响可能与患者预后有关。

目的 探讨创伤后脓毒症患者外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）、血小板与淋巴细胞比值（PLR）和红细胞分布宽度（RDW）变化，阐明其对预后的预测价值。 方法 回顾性分析2021年6月-2025年6月因创伤收入本院重症监护室（ICU）的651例患者临床资料，根据治疗过程中是否并发脓毒症，分为脓毒症组和非脓毒症组；根据脓毒症确诊后28 d内存活状态，进一步将脓毒症组患者分为死亡组和存活组；比较各组患者临床相关指标。采用多因素Logistic回归模型分析脓毒症患者死亡的危险因素，受试者工作特征（ROC）曲线分析各指标对脓毒症患者预后的预测价值。 结果 非脓毒症组纳入患者436例（66.97%），脓毒症组纳入患者215例（33.03%）。脓毒症组患者NLR、PLR和RDW均明显高于非脓毒症组（P<0.05）。脓毒症组患者中，存活组128例（59.53%），死亡组87例（40.47%）。死亡组脓毒症患者的序贯器官衰竭（SOFA）评分、急性生理与慢性健康评估Ⅱ（APACHE Ⅱ）评分、白细胞计数（WBC）、乳酸（LAC）水平、NLR、PLR和RDW均明显高于存活组（P<0.001）。多因素Logistic回归模型，SOFA评分升高、APACHE Ⅱ评分升高、LAC水平升高、NLR升高、PLR升高和RDW升高均为脓毒症患者死亡的危险因素（P<0.05）。ROC曲线分析，LAC、NLR、PLR、RDW、NLR+PLR+RDW联合检测和LAC+NLR+PLR+RDW联合检测ROC曲线下面积分别为0.750、0.699、0.740、0.730、0.835及0.875。 结论 NLR、PLR和RDW升高与创伤后脓毒症的发生及患者不良预后存在关联，上述指标均为脓毒症患者死亡的独立危险因素。联合检测NLR、PLR和RDW对脓毒症患者预后具有一定预测价值。

同种异体骨移植是修复骨缺损的常用方法，但临床上对其远期并发症（如病理性骨吸收）认识尚不充分。本文作者报道1例同种异体骨移植治疗跟骨骨折2年后出现进行性骨吸收的罕见病例，探讨其诊断和治疗策略，并结合相关文献进行复习。患者，男性，48岁，7年前因双跟骨骨折行切开复位内固定术并一期植入同种异体骨，术后第2年出现双足跟疼痛且逐年加重。影像学检查显示双跟骨存在大面积空洞样骨质缺损，伴有骨髓炎样改变。术中探查见跟骨内大量淡黄色液体、砂砾状骨碎屑及肉芽组织。术后病理提示病灶内慢性炎症细胞浸润，细菌培养呈阴性，确诊为慢性无菌性骨髓炎。经彻底清创并采用自体髂骨移植修复骨缺损，术后半年随访显示患者症状明显改善，CT检查显示植骨区骨整合良好，无吸收征象。同种异体骨移植后可能发生迟发性、进展性骨吸收并发症，通过彻底清除炎性病灶并使用自体骨进行重建可有效治疗该并发症。

非综合征型恒牙融合牙（NSFPT）是一种由非系统性疾病因素导致的牙齿发育异常。恒牙融合牙好发于上颌中切牙与上颌侧切牙，由上颌恒中切牙融合而成的NSFPT极为罕见。本文作者报道1例NSFPT患者，制定正畸治疗方案，并结合相关文献进行复习。患者，女性，15岁，主诉牙不齐，嘴突。患者既往体健，否认系统性疾病史。影像学检查示患者蝶鞍-鼻根-上牙槽座角（SNA）、蝶鞍-鼻根-下牙槽座角（SNB）和上中切牙-前颅底平面角（U1-SN）偏大，上颌前牙区双侧恒中切牙冠根完全融合。诊断为11与21融合牙，安氏Ⅱ类1分类，凸面型。治疗方案为拔除融合牙和双侧下颌第二前磨牙，采用正畸-修复联合治疗以恢复正常面型和牙列形态。患者因个人原因未接受治疗。融合牙患者临床上需通过口内检查结合影像学检查明确诊断。依据病因、牙齿萌出状态及发生来源可将融合牙分为不同类型，本病例为NSFPT且非多生牙来源。正畸治疗需综合考量牙列拥挤度和侧貌等多种因素，以决定是否进行拔牙矫治。临床上应早发现、早干预，以减少对患者颜面部和牙列的影响，降低后续矫治难度。

甲状腺肿瘤主要分为上皮源性肿瘤和非上皮源性肿瘤，其中上皮源性肿瘤占甲状腺肿瘤的95%~99%，来源于滤泡上皮细胞；非上皮源性肿瘤多起源于淋巴组织；另有极少部分肿瘤起源于间叶组织，又称间叶源性肿瘤，占比不足0.5%。软组织透明细胞肉瘤（CCSST）作为特殊类型的间叶源性肿瘤更为罕见，且预后较差。国内外尚未见原发性甲状腺CCSST相关病例的报道。本文作者报道1例原发性甲状腺CCSST患者，其肿瘤经基因检测证实伴有EWSR1基因重排（22q12断裂），并进行相关文献复习，总结其临床特点与诊疗经验。患者，女性，57岁，10余年前因甲状腺功能亢进症行核素治疗后定期复查，1年前体检发现甲状腺结节，进一步评估后入院行甲状腺双叶全切除术。术后石蜡病理和免疫组织化学检测提示肿瘤细胞S-100及性别决定区Y框蛋白10（SOX10）阳性和人黑色素瘤抗原45（HMB45）阴性，荧光原位杂交（FISH）技术检测证实存在EWSR1基因重排（22q12断裂），明确诊断为原发性甲状腺CCSST伴EWSR1基因重排；术后正电子发射断层显像-计算机断层扫描（PET-CT）检查排除全身其他部位转移。临床工作中，对于特殊类型甲状腺肿瘤患者的罕见基因（EWSR1基因等）应予以重视，并制定个体化诊疗方案及随访计划，以实现肿瘤早期识别和精准干预，从而改善患者长期预后。

目的 探讨经自然腔道内镜手术（NOTES）实施保胆取石术的安全性及经胃隧道入路的可行性。 方法 选用6只体质量为（18±2）kg的小型猪，通过喂饲法建立胆囊结石模型，建模成功后采用随机数字表法随机分为隧道组（经黏膜下隧道入路）和对照组（胃壁逐层切开入路），每组3只。2组小型猪均经胃窦前壁切口进入腹腔，行胆囊切开取石，再以金属夹闭合胆囊及胃壁切口。记录2组小型猪的手术时间、出血量和并发症发生情况，并于术后1个月解剖观察切口愈合情况。于术前30 min、术后24 h、术后72 h和术后1个月分别检测2组小型猪血清中白细胞（WBC）计数及C反应蛋白（CRP）水平以及肝功能指标总胆红素（TBIL）水平和丙氨酸氨基转移酶（ALT）及天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性。 结果 6只小型猪均顺利完成手术，67%（4/6）的模型猪成功形成1~3枚直径约为1~8 mm的胆囊结石。与对照组比较，隧道组小型猪胃壁切开时间明显增加（P<0.05）。与对照组比较，隧道组小型猪胃壁切口出血量更少，但差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较，隧道组小型猪术中胃壁夹闭时间明显缩短（P<0.05），金属夹使用数量明显减少（P<0.05）。2组小型猪术后无严重并发症，术后1个月行解剖显示切口愈合良好。实验室指标检测，与术前30 min比较，术后24 h小型猪血清中WBC计数和CRP水平均明显升高（P<0.01），术后72 h小型猪血清中WBC计数恢复至正常水平，CRP水平仍明显升高（P<0.01）。与术前比较，术后各时间点小型猪TBIL水平和ALT及AST活性差异均无统计学意义（P>0.05）。 结论 经胃NOTES保胆取石术安全可行，隧道入路在减少出血及胃壁切口闭合方面具有优势。

目的 探讨超声功率对氧化石墨烯（GO）分散性的调控作用，揭示分散性与GO/锌膜复合涂层材料微观结构及生物性能的关联，优化GO基生物医用涂层制备工艺。 方法 以纯度≥99%的GO粉末和锌膜为原料，采用搅拌同步超声分散-浸渍涂覆工艺制备GO分散体系和GO/锌膜复合涂层材料，设置分为100、300和600 W 3个超声功率梯度。采用扫描电子显微镜（SEM）和拉曼光谱仪分析不同超声功率下各组GO/锌膜复合涂层材料的GO表面分散形态、表面片径、涂层孔隙率及结构缺陷，活/死细胞染色法和细胞计数试剂盒8（CCK-8）法评估不同超声功率处理后GO分散液作用下各组小鼠间充质干细胞（MSCs）存活情况及增殖活性，平板计数法测定各组GO分散液处理后大肠杆菌（E.coli）和金黄色葡萄球菌（S.aureus）存活率。 结果 SEM观察，超声分散后的GO涂层可在锌膜表面实现均匀、连续的覆盖，其中300 W组GO/锌膜涂层材料表面平整致密。300 W组GO/锌膜涂层材料表面片径和孔隙率适中，二者均低于100 W组且高于600 W组（P<0.05）。拉曼光谱仪，300 W组GO/锌膜涂层材料拉曼光谱中缺陷峰与石墨峰强度比（I_D/I_G）比值高于100 W组，低于600 W组；其石墨化程度和结构缺陷处于适中水平。活/死细胞染色，300 W组MSCs中存活细胞占比高，细胞铺展良好且伪足清晰；100 W组MSCs中存在少量死亡细胞，存活细胞胞体收缩、伸展范围窄，600 W组MSCs中死亡细胞数较100 W组和300 W组增加。CCK-8法，干预108 h后，与100 W组和600 W组比较，300 W组小鼠MSCs增殖活性明显升高（P<0.05）。平板计数法，与100 W组比较，300 W组E.coli和S.aureus存活率均明显降低（P<0.05）；与600 W组比较，300 W组S.aureus存活率明显降低（P<0.05）。 结论 300 W为制备GO/锌膜复合涂层材料的最优超声功率，该参数可通过精准调控GO分散性，同步优化涂层界面结合性能和生物活性，实现生物安全性与抗菌性能的协同提升，为GO基生物医用涂层的工业化生产及临床转化提供关键工艺参数与理论依据。

糖基化和泛素化是两类广泛存在的蛋白质翻译后修饰（PTM）方式，二者通过交互作用构成动态调控网络，共同参与调控蛋白质稳态、信号转导级联反应和细胞分化及发育等关键生物学过程。糖基化修饰可通过调控泛素连接酶活性及其底物特异性，影响泛素化进程；反之，泛素化修饰则可通过改变糖基转移酶稳定性和底物空间构象，反向调控糖基化修饰的发生和修饰类型。现有证据表明：上述2种修饰的动态平衡失调及其调控网络的紊乱与肿瘤发生发展、病毒免疫逃逸和代谢综合征等病理过程存在密切关联。本文结合近年来国内外相关研究进展，对糖基化与泛素化修饰的生物学功能和二者在肿瘤等疾病发生发展及病毒感染中的相互调控作用进行综述，探讨将糖基化与泛素化修饰涉及的关键分子作为潜在治疗靶点的可行性，以期为肿瘤和病毒感染的治疗策略提供理论支撑。

胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3（IGF2BP3）是生物体中重要的RNA结合蛋白，在调控mRNA定位、稳定性和转录后翻译等过程中均发挥关键作用。N6-甲基腺嘌呤（m⁶A）是哺乳动物mRNA上最为普遍的修饰之一，IGF2BP3可作为m⁶A甲基化修饰的阅读蛋白参与调控mRNA代谢。IGF2BP3在多种恶性肿瘤中呈高表达并与患者不良预后相关， 靶向IGF2BP3或其上下游调控网络可能成为肿瘤治疗新策略。本文总结了IGF2BP3作为RNA结合蛋白和m⁶A阅读蛋白，在胶质母细胞瘤（GBM）、乳腺癌（BC）和肺癌等多种肿瘤细胞中调控细胞增殖、侵袭、代谢重编程及耐药性等恶性生物学行为的作用及其可能的机制，以期为恶性肿瘤治疗提供新思路。

去泛素化酶（DUBs）通过调控蛋白质的泛素化状态，在维持细胞稳态和调节病毒与宿主相互作用中发挥重要作用。在人类免疫缺陷病毒（HIV）感染过程中，DUBs广泛参与病毒生命周期的多个关键阶段，包括病毒转录、复制、宿主限制因子的稳定性调控及免疫逃逸等，展现出其抗病毒潜力。DUBs可通过调控HIV关键分子，直接或间接影响HIV的复制和传播，因而成为抗病毒治疗的重要潜在靶点。然而，DUBs家族成员众多、功能复杂，其调控网络与其他翻译后修饰之间存在相互作用，针对DUBs的药物开发仍面临挑战。本文旨在系统综述DUBs在HIV感染中的作用机制，重点阐述其对宿主限制因子及关键病毒蛋白的调控作用，并探讨以DUBs为靶点开发新型抗病毒药物的重要意义及其潜在价值。通过深入解析DUBs的作用机制，并结合新药研发技术，有望实现高效且精准的DUBs靶向治疗策略，为HIV治疗及其他病毒感染的干预提供新的思路和理论支撑。

胰腺癌是一种起病隐匿、恶性程度高且预后极差的消化道恶性肿瘤，其临床治疗面临早期诊断困难、易发生转移和耐药性强等多重挑战。长链非编码RNA（lncRNA）通过竞争性内源RNA（ceRNA）机制在胰腺癌基因表达调控中扮演关键角色。然而，目前lncRNA介导的ceRNA调控机制在胰腺癌发生发展中的作用及其机制未得到系统梳理，其临床转化应用前景也缺乏充分的理论依据。现结合近年来有关lncRNA介导的ceRNA调控机制在胰腺癌发生发展中的研究进展，系统梳理其在肿瘤增殖、转移、上皮-间质转化（EMT）、肿瘤微环境重塑及化疗耐药等方面的具体分子机制，重点探讨其衍生的潜在治疗靶点及其干预策略，并归纳总结lncRNA作为潜在生物标志物的临床应用价值及发展前景。lncRNA介导的ceRNA调控机制研究有望为胰腺癌的精准诊疗提供新的研究思路。

寡腺苷酸合成酶（OAS）家族是由干扰素（IFN）诱导表达的抗病毒蛋白家族，广泛参与病毒识别、2'-5'连接的寡腺苷酸聚合物（2-5A）合成、核糖核酸酶L（RNase L）激活和细胞凋亡等生物学过程，近年来其在肿瘤领域的研究逐渐受到关注。OAS家族成员在多种实体瘤和血液系统肿瘤中呈现异常表达，参与调控肿瘤发生发展、免疫逃逸和治疗抵抗等环节，具有重要的研究价值和临床转化潜力。在实体肿瘤中，OAS1、OAS2、OAS3和OAS样蛋白（OASL）的高表达与肿瘤患者不良预后、免疫浸润特征及化疗耐药等存在密切关联，其中部分成员还被多项研究纳入患者预后预测模型，提示其可作为潜在的预后生物标志物和治疗靶点。在血液系统肿瘤中，OAS家族成员同样参与免疫调节和药物敏感性调控。本文系统概述OAS基因家族结构和功能，重点关注OAS1、OAS2、OAS3和OASL在不同类型肿瘤中的表达特征、作用机制及其临床意义等方面，并对其作为诊断和治疗靶点的应用前景以及当前研究的局限性进行探讨，以期为后续基础研究和临床转化研究提供参考。