吉林大学学报(理学版) ›› 2019, Vol. 57 ›› Issue (04): 989-996.
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田栢会1,2, 易乐2, 王习文2, 李颂1,2, 付世杰1,2, 王雨田2,曲晗2, 李志萍2, 王丽萍3, 张淑华1, 夏志平2
TIAN Baihui1,2, YI Le2, WANG Xiwen2, LI Song1,2, FU Shijie1,2, WANG Yutian2, QU Han2, LI Zhiping2, WANG Liping3, ZHANG Shuhua1, XIA Zhiping2#br#
摘要: 构建T7噬菌体展示禽流感病毒抗原变异性基因片段文库. 首先, 从Gene Bank中查找筛选禽流感病毒抗原变异性基因, 将其截短、 修饰、 简并后得到禽流感病毒抗原变异性基因微阵列. 其次, 将合成的禽流感病毒抗原变异性基因片段文库扩增、 酶切, 链接到双酶切后的T7噬菌体载体基因上, 构成重组噬菌体DNA. 最后, 重组噬菌体DNA经体外包装和扩增, 得到T7噬菌体展示文库, 并进行T7噬菌体展示文库滴度、 重组率和免疫活性测定. 实验结果表明, 从Gene Bank中查找、 筛选、 剪切和修饰共获得96 258条序列构建T7噬菌体展示文库, 原始文库滴度为3.6×107个菌落/mL, 重组率大于90%. 用禽流感病毒H5N1抗体进行捕获, 经聚合酶链式反应(PCR)鉴定, 得到理想目的条带, 证明噬菌体表面展示蛋白具有抗原活性, 可用于禽流感病毒感染患者的快速检测及抗原表位筛选.
中图分类号: