Survivin-ASODN对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的促进作用及其机制
齐亚灵1，赵文杰2，方艳秋3，陈玉强4，孟德欣5，王伟群5，李尧1，李文1
- 1.佳木斯大学基础医学院组织与胚胎学教研室，黑龙江 佳木斯154007；2.黑龙江省农垦二院内科，黑龙江 佳木斯154002；3.吉林省人民医院肿瘤生物治疗中心，吉林 长春130021；4.佳木斯大学附属第一医院普外科，黑龙江 佳木斯154000；5.佳木斯大学基础医学院生理学教研室，黑龙江 佳木斯154007
Promotion effects of survivin-ASODN on apoptosis of SMMC-7221 cell and its mechanism
QI Ya-ling1,ZHAO Wen-jie2,FANG Yan-qiu3,CHEN Yu-qiang4,MENG De-xin5,WANG Wei-qun5,LI Yao1,LI Wen1
- 1.Department of Histology and Embryology,Jiamusi University,Jiamusi 154007,China;2.Department of Internal Medicine,Second Nongken Hospital of Heilongjiang Province,Jiamusi 54002,China;3. Tumor Biotherapy Center, People’s Hospital of JilinProvince,Changchun 130021,China;4. Department of General Surgery,First Affiliated Hospital，Jiamusi Universit y,Jiamusi154002,China；5. Department of Physiology,School of Basic Medical Sciences,Jiamusi Unversity,Jiamusi 154007,China
摘要：
目的：应用反义寡核苷酸（ASODN）技术靶向抑制生存素（survivin）基因，研究其对肝癌 SMMC-7721细胞凋亡的影响，阐明survivin反义寡核苷酸（survivin-ASODN）促进SMMC-7721细胞凋亡的作用机制。方法：设计合成survivin-ASODN序列（FAM荧光素标记）。利用脂质体介导法分别用浓度为100、200、300、400和600 nmol?L-1 survivin-ASODN转染SMMC-7721细胞(ASODN转染组)，并设空白对照组、空脂质体对照组 和正义寡核苷酸（SODN）对照组。应用流式细胞术(FCM)检测不同浓度survivin-ASODN体外转染SMMC-7721细胞24、48和72 h后SMMC-7721细胞凋亡率及细胞周期；Western blotting法检测survivin蛋白表达水平。结果：与各对照组比较，荧光素标记的ASODN转染SMMC-7721细胞24 h后，细胞生长开始受到抑制，细胞凋亡率增加，呈现剂量-时间依赖性（P<0.05）；作用48 h后，ASODN转染组细胞在G1期前出现明显的亚二倍体凋亡峰，G0/G1期细胞明显减少（P<0.05），G2/M期细胞显著增加（P<0.05），细胞被阻滞于G2/M期。与各对照组比较，不同浓度ASODN转染组SMMC-7721细胞survivin蛋白表达水平下降（P<0.05），且随作用时间的延长而降低（P< 0.05）。结论：survivin-ASODN通过抑制survivin蛋白表达、改变细胞周期进程等机制促进SMMC-7721细胞凋亡，并且呈现时间-剂量依赖性。
中图分类号:
- R733