摘要： 目的：进行人脂肪干细胞的分离、体外培养及鉴定，为组织工程的进一步研究提供实验依据。方法：将剪碎的人脂肪组织加入Ⅰ型胶原酶消化，离心。将细胞悬液置于6孔培养板中，37℃、5%CO₂培养箱中培养，细胞达80％融合时进行传代。选取第3代细胞，进行免疫组织化学染色，检测细胞表面抗原标记物；选取第3代细胞，分为成骨诱导组和成脂诱导组，每组又分为诱导组（加入相应诱导培养基）及对照组（未经诱导的细胞）。成骨诱导72 h后进行碱性磷酸酶（AKP）含量检测，8 d后进行茜素红染色，检验细胞内是否出现钙沉积；成脂诱导2周后进行油红O染色，检测细胞内是否形成脂滴。结果：培养细胞均有CD44、CD49d抗原阳性表达，不表达CD45、CD106抗原；成骨诱导72 h后，诱导组细胞内AKP含量(0.488 3 U•g^-1prot)较对照组(0.063 2 U•g^-1prot)明显增高（P<0.05）；8 d后诱导组茜素红染色阳性，对照组阴性；成脂诱导2周后油红O脂肪颗粒染色为阳性，对照组为阴性。结论：利用原代细胞培养技术可成功地从人脂肪组织中分离出脂肪干细胞。

关键词: 细胞分离, 细胞培养

中图分类号: 

• Q813.11