小鼠B7-2基因的克隆、测序及其重组质粒的构建

doi:国家自然科学基金资助课题

小鼠B7-2基因的克隆、测序及其重组质粒的构建

杨建征，金光辉，田梅，潘雪娜，金顺子，刘树铮^*

吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室，吉林长春130021

收稿日期:2003-05-26 修回日期:1900-01-01 出版日期:2004-05-28 发布日期:2004-05-28
通讯作者: 刘树铮

Cloning and sequencing of mouse B7-2 gene and constructionof its recombinant plasmids

YANG Jian-zheng,JIN Guang-hui, TIAN Mei,PAN Xue-na, JIN Shun-zi,LIU Shu-zheng^*

MH Radiobiology Research Unit, School of Public Health,Jilin University,Changchun 130021,China

Received:2003-05-26 Revised:1900-01-01 Online:2004-05-28 Published:2004-05-28
Contact: LIU Shu-zheng

摘要/Abstract

摘要： 目的：克隆小鼠B7-2基因编码区的cDNA序列，并构建其表达载体。方法：利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法，以小鼠脾细胞mRNA为模板，扩增获得B7-2基因，与pMD-18T连接做全自动测序，并利用基因重组技术构建包含B7-2基因的表达质粒pcDNA3.1-CMV-B7-2及pcDNA3.1-Egr-B7-2。结果：经测序证实获得的B7-2基因与文献报道的基本一致，并成功地构建了表达质粒。结论：成功克隆了B7-2的编码基因，并成功构建了表达载体pcDNA3.1-CMV-B7-2及pcDNA3.1-Egr-B7-2。

关键词: CD, 免疫学, 逆转录聚合酶链反应, 方法, pcDNA3.1-B7-2表达载体

Abstract: Objective To clone the sequence of the cDNA of mouse B7-2 gene and construct its expression vectors. Methods Using mouse splenocyte mRNA as template to obtain full length B7-2 with the technique of RT-PCR followed by automatic sequencing of pMD18T-B7-2 and to construct recombinant plasmids containing CMV, Egr-1 and B7-2 gene with recombinant DNA technique. Results Sequencing proved the cloned B7-2 cDNA to be essentially identical with that reported in the literature and the recombinant plasmids containing CMV, Egr-1 and B7-2 gene were constructed successfully. Conclusion B7-2 cDNA was successfully cloned and two expression vectors pcDNA3.1-CMV-B7-2 and pcDNA3.1-Egr-B7-2 were constructed.

Key words: immunology, reverse transcriptase polymerase chain reaction, method, pcDNA3.1-B7-2 expression vector

中图分类号:

Q782

杨建征，金光辉，田梅，潘雪娜，金顺子，刘树铮. 小鼠B7-2基因的克隆、测序及其重组质粒的构建[J]. J4, 2004, 30(3): 333-335.

YANG Jian-zheng,JIN Guang-hui, TIAN Mei,PAN Xue-na, JIN Shun-zi,LIU Shu-zheng. Cloning and sequencing of mouse B7-2 gene and constructionof its recombinant plasmids[J]. J4, 2004, 30(3): 333-335.

[1]	刘丹, 杨晓波, 王颖, 于丽红, 石焱, 张英杰, 周琳, 石磊. 四物汤对小鼠化疗所致贫血的恢复作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(06): 1115-1119.
[2]	李媛, 史册, 张雪, 赵欢, 郝新青, 胡月, 刘苍维, 周怡君, 闫广兴, 张颖丽, 孙宏晨. 细胞极性相关蛋白CDC42和PAR3在小鼠牙胚发育过程中的表达[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(01): 41-44.
[3]	刘瑶, 赵晓云, 赵雅宁, 李建民, 李佳宁. 脑缺血后处理对大鼠大脑海马区Notch1、Cyclin D1和CDK4蛋白表达的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(06): 1142-1147.
[4]	孟峻, 侯艳军, 刘珊, 樊淑珍, 韩艳秋. 14-3-3ε蛋白在小鼠卵母细胞减数分裂恢复过程中对Cdc25B定位的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(06): 1080-1086.
[5]	邹飞, 王爽, 吴思, 孙峥嵘. 与人巨细胞病毒UL132编码蛋白相互作用蛋白的初步筛选和鉴定[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(04): 690-693.
[6]	苏军燕, 李迎今, 徐长妍. 急性白血病患儿白血病干细胞表面CD96和CD71的表达对其疗效和预后的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(04): 776-781.
[7]	孔钧令, 尹飞. 颈深肌与慢性颈痛关系的临床研究进展[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(03): 663-666.
[8]	温泉, 王园园, 司鹤南, 田亚萍. 成人郎格汉斯细胞组织细胞增生症1例报告及文献复习[J]. 吉林大学学报(医学版), 2016, 42(05): 985-987.
[9]	孟峻, 侯艳军, 张永梅, 呼格吉乐, 韩艳秋. 14-3-3ε和Cdc25B在小鼠卵母细胞生发泡期阻滞中的作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2016, 42(02): 215-220.
[10]	李倩, 李劲高, 周茂华, 廖鹏军, 彭琪, 陈景, 陈少贤, 魏姗姗, 黄晖婷, 佘妙容. 白血病细胞CD56抗原表达与急性髓系白血病患者预后的关系[J]. 吉林大学学报(医学版), 2016, 42(02): 283-289.
[11]	董泽丰, 郑田利, 范雪佳, 裴晓方. 2011-2013年成都地区发热呼吸道症候群住院患儿鼻病毒流行病学特征[J]. 吉林大学学报(医学版), 2016, 42(01): 177-181.
[12]	方芳, 方青, 赵良中, 李强, 陈爽, 张铎, 王立国. CD147通过Beclin-1抑制前列腺癌PC-3细胞自噬[J]. 吉林大学学报(医学版), 2016, 42(01): 15-18.
[13]	方芳, 张万生, 唐化勇, 赵良中, 陈爽, 李强, 王立国. CD147 RNA干扰对前列腺癌LNCaP-AI细胞体外侵袭力的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2015, 41(03): 460-463.
[14]	魏姗姗, 周茂华, 李劲高, 陈景, 陈少贤, 李倩, 夏平方, 彭琪, 佘妙容. 急性髓系白血病患者白血病细胞CD34和CD38抗原的表达及其临床意义[J]. 吉林大学学报(医学版), 2015, 41(02): 362-368.
[15]	王丽英, 杨勇, 李占东, 李东复, 刘力宾, 王敏. siRNA干预树突状细胞CD40表达对大鼠炎症性肠病的治疗作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2015, 41(01): 54-59.