构建人肝细胞癌相关抗原HCA661和mtHSP70刺激表位的融合基因疫苗
李玉琴1,2，谭 岩1，李树蕾3，刘力华1，段秀梅1，方艳秋1，许淑芬1
- 1.吉林大学第一医院中心实验室，吉林 长春 130021；2. 吉林大学第一医院消化内科,吉林 长春 130021；3.吉林大学基础医学院组织学与胚胎学教研室， 吉林 长春 130021
Construction of fusion gene vaccine of human hepatocellular carcinoma antigen 661 (HCA661) and stimulating epitope of mycobacterium tuberculosis heat shock protein 70
摘要： 目的：构建人肝细胞癌相关抗原661（HCA661）与牛型结核分枝杆菌热休克蛋白70 （mtHSP70）刺激表位的融合基因疫苗。方法：通过PCR技术扩增HCA661基因，定向克隆至真核表达质粒pCI-neo后测序。通过PCR技术从牛型结核分支杆菌基因组中扩增包含mtHSP70刺激表位的DNA片段，亚克隆至pGEM-T easy后测序。将该刺激表位片段插入pCI-HCA661中HCA6 61下游，利用PCR和酶切方法鉴定重组真核表达质粒pCI-HCA661-mtHSP70E。结果：HCA661 PCR扩增产物为1 040 bp，mtHSP70表位PCR产物为312 bp，测序结果均分别与GenBank登记的序列完全相同。PCR和酶切鉴定结果表明，构建的重组真核表达质粒 pCI-HCA661-mtHSP70刺激表位中含有正确编码的融合基因片段。结论：成功构建含有人肝细胞癌相关抗原HCA661-mtHSP70刺激表位的融合基因疫苗。
中图分类号:
- Q78