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金属鳌合亲和层析填料的制备及其在重组六聚组氨酸融合蛋白中的应用

张培因1,王燕媚1,卫红飞1,王爱丽1,于永利2,王丽颖1   

  1. 1.吉林大学基础医学院分子生物学教研室,吉林 长春 130021;2.吉林大学基础医学院免疫学教研室,吉林 长春 130021
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-03-28 发布日期:2008-03-28
  • 通讯作者: 王丽颖

Preparation of metal-sequestrated affinity chromatograph packing and its application in purifying recombinant 6-histidine-fused protein

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-03-28 Published:2008-03-28

摘要: 目的:制备Ni2+螯合金属层析填料,分离HSP65-MUC1-histag基因工程蛋白质。方法:应用Sepharose 4B作为载体,亚氨基二乙酸(IDA)为起始材料合成金属鳌合层析填料,同时应用5-Br-PADAP一阶导数光度法对Ni2+的吸收峰进行鉴定和定量。最后应用制备的Ni2+-Sepharose 4B纯化HSP65-MUC1-histag。结果:Ni2+最佳吸收峰为574 nm,凝胶中螯合的Ni2+为5.2 mg•g-1,Ni2+-Sepharose 4B金属螯合亲和层析纯化重组蛋白纯度≥98%,回收率≥90%。结论:制备了能应用于蛋白质亲和层析的高效金属鳌合层析填料。

关键词: 基因工程蛋白质, 纯化

中图分类号: 

  • TQ937