抗氯霉素单克隆抗体的制备、纯化及其特异性鉴定

doi:国家自然科学基金资助课题（30671762）

抗氯霉素单克隆抗体的制备、纯化及其特异性鉴定

王颖^1,2,3，任立松^1,2，李研东^1,2，沈庆丰^1,2，柳增善^1,2

1.吉林大学畜牧兽医学院细菌室，吉林长春 130062；2.吉林大学教育部重点实验室人兽共患病所细菌室，吉林长春 130062；3.黑龙江省八一农垦大学食品学院，黑龙江大庆 136319

收稿日期:2007-10-10 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-03-28 发布日期:2008-03-28
通讯作者: 柳增善

Preparation,purification and identification of specialties of monoclonal antibody against chloramphenicol

Received:2007-10-10 Revised:1900-01-01 Online:2008-03-28 Published:2008-03-28

摘要/Abstract

摘要： 目的：获得能稳定分泌高亲和力抗体的抗氯霉素杂交瘤细胞。方法：重氮化法偶联制备氯霉素（CAP）的免疫抗原和检测抗原（CAP-BSA和CAP-OVA）。应用常规技术融合，三次有限稀释克隆和间接竞争ELISA法筛选杂交瘤细胞株，并鉴定抗体特异性。结果：得到一株能够稳定分泌高亲和力，特异性强抗体的杂交瘤细胞株4B12，辛酸-硫酸铵法纯化体内诱生法制备的腹水；纯化后的抗体效价>1∶256 000，杂交瘤细胞染色体平均数为50±2，分泌的抗体属于IgG₁亚类，相对分子质量为157.92 ku，亲和常数为8.26×10⁸M^-1；与甲砜霉素、庆大霉素、泰乐菌素、青霉素、链霉素和卡那霉素无交叉反应。结论：该细胞株可满足建立免疫学检测方法的需要和开发应用的要求。

关键词: 抗体, 单克隆, 纯化, 亲和常数

中图分类号:

S852.43

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抗氯霉素单克隆抗体的制备、纯化及其特异性鉴定

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