徐珊,燕蒙蒙,刘 扬,李鹏武,马淑梅,刘晓冬
XU Shan,YAN Meng-meng,LIU Yang,LI Peng-wu,MA Shu-mei,LIU Xiao-dong
摘要:
目的:探讨miR-21与宫颈癌HeLa细胞辐射敏感性之间的关系,阐明miR-21对细胞凋亡和自噬改变的可能作用机制。方法:人宫颈癌HeLa细胞分为假照组和4 Gy照射组,分别转染miR-21 NC(阴性对照)、miR-21 mimics、miR-21 inhibitor NC和miR-21 inhibitor。实时荧光定量PCR检测照射前和照射后miR-21的表达水平;集落形成实验观察miR-21对HeLa细胞辐射敏感性的影响;流式细胞术检测细胞凋亡和自噬细胞百分率;采用生物信息学方法预测miR-21的靶基因;荧光素酶报告基因分析验证miR-21与靶基因3′UTR的结合;Western blotting法检测相关蛋白beclin1表达水平。结果:与假照组比较,4 Gy照射组miR-21表达水平明显增加(P<0.05);集落形成实验,与miR-21 NC组比较,miR-21 mimics组HeLa细胞辐射敏感性无明显变化(P>0.05);与miR-21 inhihitor NC组比较,miR-21 inhibitor 组HeLa细胞辐射敏感性无明显变化(P>0.05);与miR-21 NC+4 Gy组比较,miR-21 mimics+4 Gy组HeLa细胞凋亡率明显增加(P<0.05);与miR-21 inhibitor NC组比较,miR-21 inhibitor组HeLa细胞凋亡率明显减少(P<0.05)。与miR-21 NC组比较,miR-21 mimics组自噬率升高(P<0.05)。与miR-21 NC+4 Gy组比较,miR-21 mimics+4 Gy组自噬率升高(P<0.05);与miR-21 NC+4 Gy组比较,miR-21 mimics+4 Gy组beclin1蛋白表达水平增加(P<0.05)。 结论:发现了miR-21新的靶基因beclin1。过表达miR-21促进辐射诱导的凋亡和自噬,但对于宫颈癌HeLa细胞辐射敏感性无直接影响。 [关键词] miR-21;宫颈肿瘤;HeLa细胞;辐射敏感性;细胞凋亡;自噬
中图分类号: