碱性成纤维细胞生长因子对羊骨髓间充质干细胞体外增殖和分化的影响

doi:国家自然科学基金资助课题（30370439）

碱性成纤维细胞生长因子对羊骨髓间充质干细胞体外增殖和分化的影响

杨雷，李薇，姜震宇，王冠军

吉林大学第一医院血液肿瘤科，吉林长春 130021

收稿日期:2006-07-26 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-05-28 发布日期:2007-05-28
通讯作者: 王冠军

Effect of basic fibroblast growth factor on sheep bone marrow mesenchymal 　stem cells proliferation and differentiation in vitro

YANG Lei, LI Wei, JIANG Zhen-yu, WANG Guan-jun

Department of Hematology and Oncology, First Hospital, Jilin University, Changchun 130021,China

Received:2006-07-26 Revised:1900-01-01 Online:2007-05-28 Published:2007-05-28
Contact: WANG Guan-jun

摘要/Abstract

摘要： 目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对羊骨髓间充质干细胞（BMSCs）体外增殖与分化的影响。方法：体外分离培养的羊原代BMSCs分为实验组和对照组，实验组添加bFGF(2 μg•L^-1)于L-DMED培养液中，对照组使用L-DMED常规培养液。分别测定2组BMSCs生长曲线以及碱性磷酸酶（ALP）活性。应用诱导剂对2组细胞进行成骨、成脂肪诱导，分别在显微镜下观察其分化潜能。结果：单个核细胞接种大约1周成纤维细胞样集落开始出现，2周后形成的集落数量增加，每个集落的体积变大。当第1代BMSCs细胞生长到汇合期时，实验组细胞数是对照组的2.5倍。于第16天实验组ALP活性比对照组明显降低（P＜0.05）。2组BMSCs经成骨诱导培养3周后，经Von Kossa染色，已经成骨的细胞内均可见钙盐沉积；已经成骨的细胞内油红-“O”染色显示，成脂肪诱导培养2周后，2组BMSCs均能分化形成脂肪细胞，2组每高倍视野下脂肪细胞计数差异无显著性（P>0.05）。结论：bFGF能提高羊BMSCs集落形成数量及扩增效率,并抑制其ALP活性，同时保持了BMSCs向成骨细胞、脂肪细胞的分化潜能。

关键词: 间充质干细胞, 成纤维细胞生长因子

Abstract: Abstract:Objective To evaluate the effect of basic fibroblast growth factor (bFGF) on sheep bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) proliferation and differentiation in vitro. Methods The sheep BMSCs were isolated and expanded in vitro　and divided into experimental group and control group. bFGF(2 μg•L^-1) was added into cell culture medium of experimental group. In control group, no bFGF was added. The morphological differences of BMSCs between two group were observed. Growth curves and alkaline phosphatase(ALP) activity were assessed. In order to observe the influence of bFGF on differentiation potential of BMSCs, osteogenic and adipogenic inductions were conducted on BMSCs in two groups. Results Fibroblast colonies appeared 1 week after seeding of the mononuclear cells. 2 weeks later, more colonies formed and each colony became larger . The cell number was 2.5 times of the control when the first passage cells grew to confluence and the ALP activity in experimental group was lower than that in control group(P<0.05). Osteogenic and adipogenic inductions were confirmed by Von Kossa and oil red-“O” staining respectively.Conclusion bFGF can increase sheep BMSCs colony and proliferation efficiency and inhibit ALP activity while retain the potential of osteogenic and adipogenic differentiation in vitro.

Key words: mesenchymal stem cell, fibroblast growth factor

中图分类号:

R329.28+

杨雷，李薇，姜震宇，王冠军. 碱性成纤维细胞生长因子对羊骨髓间充质干细胞体外增殖和分化的影响[J]. J4, 2007, 33(3): 510-513.

YANG Lei, LI Wei, JIANG Zhen-yu, WANG Guan-jun. Effect of basic fibroblast growth factor on sheep bone marrow mesenchymal 　stem cells proliferation and differentiation in vitro[J]. J4, 2007, 33(3): 510-513.

[1]	龚庆, 宋秋莹, 邱莉晶, 黄晓巍, 赵文海. 聚丙交酯-乙交酯微球搭载鹿茸多肽联合骨髓间充质干细胞对大鼠坐骨神经损伤的修复作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(06): 1174-1178.
[2]	石旭, 余欣, 曲兴龙, 曹扬, 张广娟, 李长远. 低氧及其下游因子miRNA-145在脐带间充质干细胞向Ⅱ型肺泡上皮细胞分化中的作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 935-942.
[3]	孟琳, 王璐, 布文奂, 丁鑫鑫, 高华丽, 王梓霖, 刘玉兰, 李琛, 孙宏晨. 小鼠骨髓间充质干细胞对人舌鳞状细胞癌Cal27细胞的归巢作用及其对Cal27细胞增殖和迁移的促进作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 891-896.
[4]	周丹, 赵辉, 赵洋, 刘晋宇. 人毛囊间充质干细胞临床应用的研究进展[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 1086-1089.
[5]	俞冬升, 蔡大敏, 陈婕妤, 吕方怡, 花扣珍, 银国利, 王俊娟. 纤维型肌动蛋白对间充质干细胞衰老的调节作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(03): 483-486.
[6]	田大川, 李海乐, 肖大伟, 周山健, 苏永蔚, 刘丹平, 綦惠. 联合应用软骨再生支架与突变型HIF-1α修饰BMSCs分泌的外泌体对晚期软骨缺损修复的促进作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(02): 216-222.
[7]	赵欢, 史册, 张雪, 李媛, 刘杰, 李杏, 胡月, 孙宏晨. 激活素受体样激酶2调控骨重塑的研究进展[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(06): 1278-1281.
[8]	宋媛媛, 陈香润, 吕欣, 于清香, 王瑞, 高春时, 任明, 李波. 间充质干细胞对糖尿病相关病变治疗作用的研究进展[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(03): 656-658.
[9]	王治国, 刘学明, 佟胜全, 石哲群, 饶莉. 骨髓间充质干细胞移植对大鼠肺动脉高压的治疗作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(01): 21-25.
[10]	费倩怡, 刘书会, 朱振威, 邹永巍, 郑明, 刘春丽, 刘志辉. 转染leptin的胎盘间充质干细胞对放射损伤复合创伤愈合的促进作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2016, 42(06): 1066-1070.
[11]	赵美子, 王丹丹, 虞振静, 段颜莉, 马丽娜. 肝细胞损伤条件培养基对大鼠骨髓间充质干细胞肝向分化的促进作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2016, 42(06): 1108-1115.
[12]	刘微, 姚杨, 马萧萧, 邓裕宣, 梅迪, 刘磊, 王会岩. 融合表达载体pET22b-SUMO-FGFR4的构建及其在大肠杆菌中表达条件的优化[J]. 吉林大学学报(医学版), 2016, 42(04): 642-647.
[13]	赵民学, 李柏文, 王德盛, 曹宏. miR-122在骨髓间充质干细胞治疗大鼠急性肝损伤中的作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2015, 41(06): 1150-1153.
[14]	冷冰, 马恩元, 何巍, 蒋为海, 辛建海, 薛昊罡. 17β-雌二醇对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2015, 41(04): 763-768.
[15]	王长文, 刘敏, 刘磊, 姜勇, 张磊, 李艳, 王会岩. 不同理化因素对重组人成纤维细胞生长因子21蛋白纯度的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2015, 41(03): 506-509.