小鼠干扰素γ基因克隆、测序及辐射诱导表达质粒pIRESEgr-IFNγ的构建

doi:吉林大学创新基金资助课题

小鼠干扰素γ基因克隆、测序及辐射诱导表达质粒pIRESEgr-IFNγ的构建

刘林林^1,2，杨巍²，吴丛梅²，田梅²，朴春姬²，李修义^2*

1. 吉林大学第二医院放疗科，吉林长春130041；2. 吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室，吉林长春130021

收稿日期:2003-08-25 修回日期:1900-01-01 出版日期:2004-03-28 发布日期:2004-03-28
通讯作者: 李修义

Cloning and sequencing of mouse IFN-γ and constructionof radiation-inducible expression plasmid pIRESEgr-IFNγ

LIU Lin-lin^1，2, YANG Wei², WU Cong-mei² ,TIAN Mei², PIAO Chun-ji², LI Xiu-yi^2*

1. Department of Radiotherapy, Second Hospital, Jilin University, Changchun 130041, China;2. MH Radiobiology Research Unit, School of Public Health, Jilin University,Changchun 130021,China

Received:2003-08-25 Revised:1900-01-01 Online:2004-03-28 Published:2004-03-28
Contact: LI Xiu-yi

摘要/Abstract

摘要： 目的：克隆小鼠干扰素γ（IFN-γ）编码区cDNA序列并构建含Egr-1启动子的辐射诱导表达质粒pIRESEgr-IFNγ。方法：利用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法，以小鼠脾细胞mRNA为模板，扩增获得全长IFNγcDNA，与pGEMT载体连接做全自动测序，并利用基因重组技术构建含Egr-1启动子的辐射诱导表达质粒pIRESEgr-IFNγ。结果：经测序证实获得的小鼠IFNγ cDNA序列与文献报道完全一致，并构建了含Egr-1启动子的辐射诱导表达质粒pIRESEgr-IFNγ。结论：成功克隆了小鼠IFNγ的cDNA序列，构建了辐射诱导表达质粒pIRESEgr-IFNγ。

关键词: Egr-1, 质粒, 逆转录聚合酶链反应, 序列分析, DNA

Abstract: Objective To clone the sequence of the cDNA of mouse interferon-gamma coding area and construct radiation-inducible expression plasmid pIRESEgr-IFNγ containing Egr-1 promoter. Methods With the technique of RT-PCR, mouse splenocyte mRNA was used as template to obtain full length mouse IFNγ. The pGEMT-IFNγ was sequenced automatically and radiation-inducible expression plasmid pIRESEgr-IFNγ containing Egr-1 promoter was constructed with gene recombinant technique. Results The sequencing proved the cloned mouse IFNγ cDNA to be completely identical with that reported in the literature and the radiation-inducible expression plasmid pIRESEgr-IFNγ containing Egr-1 promoter was constructed successfully. Conclusion Mouse IFNγ cDNA was cloned and the radiation-inducible expression plasmid pIRESEgr-IFNγ containing Egr-1 promoter was constructed successfully.

Key words: Egr-1, plasmids, reverse transcriptase polymerase chain reaction, sequence analysis, DNA

中图分类号:

Q782

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