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吉林大学学报(医学版) 2019, 45(04) 825-829 DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190414 ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R |
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| 基础研究 |
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| Ndfip1质粒的构建及其在神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中的表达 |
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田娟, 毛建雯 |
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锦州医科大学组织胚胎学教研室, 辽宁 锦州 121001 |
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摘要：目的：观察Nedd4家族反应蛋白1（Ndfip1）过表达条件下神经细胞中二价金属离子转运蛋白1（DMT1）的表达，探讨Ndfip1对DMT1的调控作用。方法：构建Ndfip1真核表达质粒，应用Ndfip1质粒转染人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞，检测转染效率。Ndfip1质粒转染的SH-SY5Y细胞为实验组，空质粒转染的SH-SY5Y细胞为对照组，应用免疫荧光法观察2组细胞中DMT1蛋白表达强度，采用蛋白印迹法定量检测2组细胞DMT1蛋白表达水平。结果：Ndfip1质粒经扩增、电泳分离和测序比对，证明质粒构建成功。Ndfip1质粒转染48 h后，与转染前比较，SH-SY5Y细胞中Ndfip1蛋白表达水平明显增加（P<0.01），证明转染成功。免疫荧光法检测，与对照组比较，实验组细胞中DMT1的荧光强度明显减弱。蛋白印迹法检测，与对照组比较，实验组细胞中DMT1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。结论：Ndfip1过表达可下调神经细胞中DMT1蛋白的表达，Ndfip1对DMT1具有负性调控作用，通过减少神经细胞中铁离子的蓄积对神经细胞起到保护作用。 |
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关键词：
Nedd4家族反应蛋白1
二价金属离子转运蛋白1
质粒
神经细胞
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收稿日期
2018-09-16
修回日期
网络版发布日期
2019-08-02
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DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190414 |
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基金项目: 辽宁省科技厅自然科学基金资助课题（20170540343）；辽宁省教育厅大学生创新训练项目资助课题（201710160000188） |
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通讯作者: 田娟,副教授,硕士研究生导师(Tel:0416-4673196,E-mail:tian555juan555@sina.com) |
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作者简介: 田娟(1976-),女,辽宁省锦州市人,副教授,医学博士,主要从事金属离子与神经退行性疾病关系方面的研究。 |
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